中药鉴定学实验部分教案

实验十五动物类中药的鉴定一、实验目的1、掌握下列药材的性状鉴定特征：水蛭、全蝎、蟾酥、石决明、海马、蛤蚧、蕲蛇、乌梢蛇、斑蝥、麝香、鹿茸、牛黄、羚羊角、穿山甲。2、掌握蟾酥、麝香的显微鉴定特征。3、掌握蟾酥、牛黄、鹿茸、麝香的理化鉴定方法。二、实验仪器、试剂及材料1、仪器：显微镜、试管、小漏斗、烧杯、蒸发皿、水浴锅、回流装置、量瓶、电吹风、薄层色谱用具、紫外分光光度计、紫外光灯、酒精灯、吸管、电动离心机、超声波震荡器。2、试剂：50%甘油水溶液、硫酸、碘试液、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、醋酐、环己烷、对二甲氨基苯甲醛、10%硫酸乙醇溶液、脂蟾毒配基、华蟾蜍次素、甘油醋酸、水合氯醛、浓过氧化氢（30%）、盐酸、氢氧化钡、胆酸、去氧胆酸、异辛烷、醋酸乙酯、冰醋酸、茚三酮试液、10%氢氧化钠、0.5%硫酸铜溶液、70%乙醇、甘氨酸、正丁醇、2%茚三酮丙酮溶液、硅胶G、羧甲基纤维素钠。3、材料：实验目的项下列出的中药材；蟾酥粉末、麝香仁粉末、鹿茸粉末、牛黄粉末、鹿茸对照药材粉末。三、实验内容1、药材性状鉴定主要特征（1）水蛭Hirudo：蚂蝗：扁平纺锤形，有多数环节，长4～10cm，宽0.5～2cm。背部黑褐色或黑棕色，用水浸后，可见黑色斑点排成5条纵线；腹面棕黑色，两侧棕黄色。前端略尖，吸盘不显著，后端钝圆，吸盘较大。质脆，易折断，断面胶质状。水蛭：扁长圆柱形，体多弯曲扭转，长2～5cm，宽0.2～0.3cm。柳叶蚂蝗：狭长而扁，长5～2cm，宽0.1～0.5m。（2）全蝎Scorpio：头胸部和前腹部呈扁平长椭圆形，后腹部呈尾状，皱缩弯曲，完整者体长约6cm。头胸部呈绿褐色，前面有一对短小的螯肢及一对较长大的钳状脚须，形似蟹螯，背覆有梯形背甲，腹面有足4对；前腹部由7节组成，背面绿褐色，有5条隆脊线；后腹部6节，棕黄色，末节有锐钩状毒刺。（3）蟾酥VenenumBufonis：呈扁圆形团块状或片状。棕褐色或红棕色。团块状者质坚，不易折断，断面棕褐色，角质状，微有光泽；片状者质脆，易碎，断面红棕色，半透明。、气微腥，味初甜而后有持久的麻辣感，粉末嗅之作嚏。断面沾水，即呈乳白色隆起。粉末少许置于锡箔纸上，加热即熔成油状。（4）石决明ConchaHaliotidis：杂色鲍：呈长卵圆形，内面观略呈耳形，长7～9cm，宽5～6cm，高约2cm。表面暗红色，有多数螺肋和细密生长线，螺旋部小，体螺部大，从螺旋部顶处开始向右排列有20余个疣状突起，末端6～9个开孔，孔口与壳面平。内面光滑，具珍珠样彩色光泽。壳较厚。质坚硬，不易破碎。皱纹盘鲍：呈长椭圆形，长8～12cm，宽6～8cm，高2～3cm。表面灰棕色，有多数粗糙而不规则的皱纹，生长线明显，常有苔藓类或石灰虫等附着物，末端4～5个开孔，孔口突出壳面。壳较薄。羊鲍：近圆形，长4～8cm，宽2．5～6cm，高0．8～2cm。壳顶位于近中部而高于壳面，螺旋部与体螺部各占1/2，从螺旋部边缘有2行整齐的突起，尤以上部较为明显，末端4～5个开孔，呈管状。澳洲鲍：呈扁平卵圆形，长13～17cm，宽11～14cm，高3．5～6cm。表面砖红色，螺旋部约为壳面的1/2，螺肋和生长线呈波状隆起，疣状突起30余个，末端7～9个开孔，孔口突出壳面。耳鲍：狭长，略扭曲，呈耳状，长5～8cm，宽2．5～3．5cm，高约1cm。表面光滑，具翠绿色、紫色及褐色等多种颜色形成的斑纹，螺旋部小，体螺部大，疣状突起的末端5～7个开孔，孔口与壳面平，多为椭圆形，壳薄，质较脆。白鲍：呈卵圆形，长11～14cm，宽8．5～11cm，高3～6．5cm。表面砖红色，光滑，壳顶高于壳面，生长线颇为明显，螺旋部约为壳面的1/3，疣状突起30余个，末端9个开孔，孔口与壳面平，壳薄，质较脆。（5）海马Hippocampus：线纹海马：体呈扁长形而弯曲，长可达30cm。黄白色。头略似马头，吻长管状，两眼深陷。躯干部七棱形，尾部四棱形，渐细卷曲，体上有瓦楞形的节纹并具短棘。习称“马头、蛇尾、瓦楞身”。体轻，骨质，坚硬。三斑海马：体侧背部1、4、7节的短棘基部各有1黑斑。小海马：体形小，长7～10cm，黑褐色节纹及短棘均较细小。刺海马：体长15～20cm。头和躯干上的棘特别发达，棘细而尖，长2～4mm。大海马：体长20～30cm，黑褐色。（6）蛤蚧Gecko：全体呈扁片状，头颈部及躯干部长9～18cm，头颈部约占三分之一，腹背部宽6～11cm，尾长6～12cm。头略呈扁三角形，两眼多凹陷成窟窿，无眼睑，口内角质细齿密生于颚的边缘，无异型大齿。吻部半圆形，吻鳞不切鼻孔，与鼻鳞相连，上鼻鳞左右各1片，上唇鳞12～14对，下唇鳞(包括颏鳞)21片。腹背部呈椭圆形，腹薄。背部灰黑色或银灰色，有黄白色或灰绿色斑点(进口蛤蚧多为砖红色斑点)散在或密集呈不显著的斑纹，脊椎骨及两侧肋骨突起。四足均有五趾，除第一指趾外，均具爪，趾间仅具蹼迹，足趾底面具吸盘。尾细而坚实，几与体长相等，微显骨节，与背部颜色相同，有不甚明显的6～7个银灰色环带。全身密被类圆形微有光泽的细鳞。质坚韧。（7）蕲蛇Agkistrodon：呈圆盘状，盘径17～34cm，体长可达2m。头在中间稍向上，呈三角形而扁平，吻端向上，习称“翘鼻头”。上腭有管状毒牙，中空尖锐。背部两侧各有黑褐色与浅棕色组成的“V”形斑纹17～25个，其“V”形的两上端在背中线上相接，习称“方胜纹”，有的左右不相接，呈交错排列。腹部撑开或不撑开，灰白色，鳞片较大，有黑色类圆形的斑点，习称“连珠斑”；腹内壁黄白色，脊椎骨的棘突较高，呈刀片状上突，前后椎体下突基本同形，多为弯刀状，向后倾斜，尖端明显超过椎体后隆面。尾部骤细，末端有三角形深灰色的角质鳞片1枚，习称“佛指甲”。（8）乌梢蛇Zaocys：呈圆盘状，盘径约16cm。表面黑褐色或绿黑色，密被菱形鳞片；背鳞行数成双，背中央2～4行鳞片强烈起棱，形成两条纵贯全体的黑线。头盘在中央，扁圆形，眼大而下凹陷，有光泽。上唇鳞8枚，第4、5枚入眶，颊鳞1枚，眼前下鳞1枚，较小，眼后鳞2枚。脊部高耸成屋脊状，俗称“剑脊”。腹部剖开边缘向内卷曲，脊肌肉厚，黄白色或淡棕色，可见排列整齐的肋骨。尾部渐细而长，尾下鳞双行。剥皮者仅留头尾之皮，中段较光滑。（9）斑蝥Mylabris：南方大斑蝥：呈长圆柱形，长1.5～2.5cm，宽0.5～1cm。头及口器下垂，有复眼及触角各1对，触角多已脱落。背部具革质鞘翅1对，黑色，有3条黄色或棕黄色的横纹；鞘翅下面有棕褐色薄膜状内翅2片。胸腹部乌黑色，胸部有足3对。有特殊的臭气，刺激性强，不宜口尝。黄黑小斑蝥：体形较小，长1～1.5cm。（10）麝香Moschus：毛壳麝香：呈囊状球形、椭圆形或扁圆形，直径3～8cm，厚2～4cm。开口面的皮革质，棕褐色，略平，密生白色或灰棕色短毛，从两侧围绕中心排列，中央有一小囊孔，直径约2～3mm。另一面为棕褐色略带紫色的皮膜，微皱缩，偶显肌肉纤维，略有弹性；剖开后，可见中层皮膜呈棕褐色或灰褐色，半透明；内层皮膜呈棕色，内含颗粒状及粉末状的麝香仁和少量细毛及脱落的内层皮膜(习称“银皮”或“云皮”)。有特异香气。麝香仁：野生品质柔、油润、疏松；其中呈不规则圆球形或颗粒状者习称“当门子”，外表多呈紫黑色，微有麻纹，油润光亮，断面黄棕色或深棕色；粉末状者多呈棕色或棕褐色，并有少量脱落的内层皮膜和细毛。（11）鹿茸CornuCerviPantotrichum：花鹿茸：锯茸：呈圆柱状分枝，具1个分枝者习称“二杠”，主枝习称“大挺”，长17～20cm，锯口直径4～5cm，离锯口约1cm处分出侧枝，习称“门庄”，长9～15cm，枝顶钝圆，较大挺略细。外皮红棕色或棕色，多光润，表面密生红黄色或棕黄色细茸毛，上端毛密，下端较疏；分岔间具一条灰黑色筋脉，皮茸紧贴。锯口面黄白色，中部有致密的蜂窝状小孔，外围无骨质。体轻。气微腥，味微咸。具2个分枝者习称“三岔”，大挺长23～34cm，直径较二杠细，略呈弓形而微扁，枝端略尖，下部多有纵棱筋及突起小疙瘩；皮红黄色，茸毛较稀而粗；锯口外围多已骨化；体稍重。二茬茸(再生茸)：和头茬茸近似，但主枝长而不圆或下粗上细，下部有纵棱筋，皮灰黄色，茸毛较粗糙，锯口外围多已骨化。（12）牛黄CalculusBovis蛋黄：多呈卵形、类球形、四方形或三角形，大小不一，直径0．6～3(4．5)cm。表面黄红色至棕黄色，有的表面挂有一层黑色光亮的薄膜，习称“乌金衣”，有的粗糙，具疣状突起，有的具龟裂纹。体轻，质酥脆，易分层剥落，断面金黄色，可见细密的同心层纹，有的夹有白心。气清香，味苦而后微甜，人口有清凉感，嚼之易碎，不粘牙。管黄：呈管状，完整者长约3cm，直径可达1．5cm，或为破碎的小片。表面不平或有横曲纹，有裂纹及小突起，红棕色或棕褐色。质酥脆，断面有较少的层纹，有的中空，色较深。（13）羚羊角CornuSaigaeTataricae：呈长圆锥形，略呈弓形弯曲，长15～33(44)cm，基部直径3～4cm。类白色或黄白色，基部稍呈青灰色；嫩枝全体光润如玉，无裂纹，对光透视有“血丝”或紫黑色斑纹，老枝有细纵裂纹。除顶端部分外，有10～16个隆起的环脊，间距约2cm，用手握之，四指正好嵌入凹处。角的基部横截面类圆形，内有坚硬质重的角柱，习称“骨塞”，长约占全角的1/2～1/3，表面有突起的纵棱与其外面角鞘内的凹沟紧密嵌合，从横断面观，其结合部呈锯齿状。除去“骨塞”后，角的下半段成空筒状，全角呈半透明，对光透视，上半断无骨塞部分的中央有一条隐约可辨的细孔道直通角尖，习称“通天眼”。（14）穿山甲SquamaManis：扇形、三角形、菱形或盾形的扁平片状或半折合状，中间较厚，边缘较薄。外表面黑褐色或黄褐色，有光泽，宽端有数十条排列整齐的纵纹及数条横线纹；窄端光滑。内表面中部有1条明显突起的弓形横向棱线，其下方有数条与棱线相平行的细纹。角质，半透明，坚韧而有弹性，不易折断。2、显微鉴定（1）蟾酥：1）取蟾酥粉末，以水合氯醛试液装片，稍加热，碎块透明并逐渐溶解。2）取蟾酥粉末，以浓硫酸装片，立即呈橙黄色或橙红色，碎块周围逐渐溶解缩小而呈类圆形的透明小块，表面出现龟裂状纹理，放置稍久，即全部溶解消失。蟾酥粉末图：1.用水合氯醛夜装片2.硫酸装片，示逐渐溶解状态（2）麝香：麝香仁粉末棕褐色或黄棕色。为无数无定形颗粒状物集成的半透明或透明团块，淡黄色或淡棕色；团块中包埋或散在有方形、柱状、八面体或不规则形的晶体；并可见圆形油滴，偶见毛和内皮层膜组织。麝香粉末图：1.分泌物团块2.晶体3.表皮组织碎片4.麝毛3、理化鉴定（1）牛黄：1）取牛黄粉末0.1g，加盐酸1ml及氯仿10ml，充分振摇，混匀，氯仿层呈黄褐色，分取氯仿层，加氢氧化钡试液5ml，振摇，即生成黄褐色沉淀，分离除去水层和沉淀，取氯仿层约1ml，加醋酐1ml，硫酸2滴，摇匀，放置，溶液呈绿色（检查胆固醇）。2）取牛黄粉末10mg，加三氯甲烷20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取胆酸对照品、去氧胆酸对照品，加乙醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸(15：7：5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。3）取牛黄粉末少许，加氯仿1ml，摇匀，再加硫酸与浓过氧化氢溶液（30%）各2滴，振摇即显绿色（检查胆红素）。（2）鹿茸：1）取鹿茸粉末0.1g，加水4ml，加热15分钟，放冷，滤过。取滤液1ml,，加茚三酮试液3滴，摇匀，加热煮沸数分钟，显蓝紫色（氨基酸显色反应）；另取滤液1ml，加10％氢氧化钠溶液2滴，摇匀，滴加0.5％硫酸铜溶液，显蓝紫色（蛋白质显色反应）。2）取鹿茸粉末0.4g，加70％乙醇5ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取鹿茸对照药材0.4g，同法制