中药新药开3-1制备工艺(前处理提取纯化)

中药新药制备工艺研究1指导原则•中药、天然药物原料前处理技术指导原则•中药、天然药物提取纯化技术指导原则•中药、天然药物制剂研究技术指导原则•中药、天然药物中试研究技术指导原则2内容•重要性•特点、原则和程序•前处理•提取纯化•制剂•中试•申报资料•常见问题3制备工艺研究的重要性•中药新药研究的重要环节（新药成败和水平的关键）质标、药效、毒理、临床研究稳定样品的前提工艺不合理，会影响新药的疗效(有效性)工艺不稳定，会影响各项实验的结果(稳定性)工艺不成熟，会影响新药的正式投产(适用性、经济性)如解表药不提挥发油;小试工艺直接生产,收率不稳定4联结中医中药之桥梁去粗取精增效减毒控速控量内服外用5社会效益和经济效益的保证中成药生产水平6•系统性：处方组成、原料质量、提取、纯化、浓缩、干燥、剂型、辅料、制剂、中试、报批临床、报批生成、试生产、生产•筛选性：各环节从头至尾的筛选优化•全面性：安全性、有效性，稳定性、可控性，原辅料溶剂的成本、生产工艺的繁简、产品生产成本等制备工艺研究的特点7•中医药特色原则–保存各药的药性（与功能主治相关的成分）–实现君药的特性（质量控制指标）–临床需要之剂型–功能与主治为主线贯穿研究过程•时代特色原则–新技术、新工艺、新辅料、新设备、新剂型–评价指标和评价方法现代化和综合化制备工艺研究的原则81、处方筛选药味药味比例口服剂量制备工艺研究的一般程序92、工艺筛选工艺路线（根据剂型、处方、药味性质、工厂技术、设备）工艺条件成型剂型：临床适应性、质量稳定行、生产可行性方法辅料的种类、用量、用法造型工艺条件前处理粉碎药物粉碎程度粉碎方法细粉收率提取提取药物提取方法提取溶媒种类、用量提取工艺条件分离除杂浓缩干燥方法设备工艺条件半成品质量标准及收率鉴定与检验炮制与加工提取纯化103、包装选择5、临床实验用药品的制备工艺（制备方法）4、中试6、生产用制备方法内包装容器的材料、结构、形状、规格标签设计说明书拟订制备临床实验用药及各种考核样品3～5批以上考核、修改工艺配套设备初步核算成本11中药新药制备工艺研究前处理12•概念•必要性•原料的鉴定与检验•药材的炮制与加工原料的前处理13•概念原料－处方中的药材、中药饮片、提取物（包括有效部位）和有效成分。前处理－仅指投料前原料的鉴定、检验、炮制与加工。强调鉴定与检验，是为了确保投料的准确。14含竹签虫草•必要性鉴定及检验是保证临床用药安全有效的前提。（大黄三基源、土大黄）炮制及加工是中药制剂特色，保证制剂质量及疗效。15•原料的鉴定与检验1.目的：检验合格后方可投料，确保投料准确，制剂质量均一2.依据应为法定标准无法定标准，应明确药材基源，制定质标如有修订，应执行修订后标准。161）药材、饮片法定标准•国家药品标准（药典、部标）、地标、炮制规范•中药大辞典、中药志、中草药汇编、收载于药典或部颁附录中只有药材来源的不能作为法定标准•地标药材，建议提供复印件及检验报告•药材自检时应全检•仿制药所用药材标准问题172）提取物和有效成分法定标准•仅有国家药品标准•附于制剂标准后的提取物标准只能作为该制剂使用•应做有机溶剂残留的检查，因多数制备使用了有机溶剂183）多来源中药材一般应固定品种，品种不同而质量差异较大的药材，必须固定品种，并提供品种选用依据。(大黄，芥子)4）药材质量随产地不同而有较大变化时，应固定产地。（中国和法国麻黄）195）药材质量随采收期不同而明显变化时，（购买时）应注意采收期。6）质量标准过于简单，难以满足新药要求，应自选完善标准（多数为增加含测），作为企业内控标准。207）毒性药材应提供自检报告国务院颁布的《医疗用毒性药品管理办法》28品种：砒石、砒霜、水银、生马钱子、生川乌、生草乌、生白附子、生附子、生半夏、生南星、生巴豆、斑蝥、青娘虫、红娘虫、生甘遂、生狼毒、生藤黄、生千金子、生天仙子、闹洋花、雪上一枝蒿、红升丹、白降丹、蟾酥、洋金花、红粉、轻粉、雄黄8）濒危物种药材应注意来源合法性、符合国家规定。说明购货途径，不须提供发票21国家重点保护野生药材物种名录收载野生药材物种76种，涉及中药材42种。虎骨、豹骨、羚羊角、鹿茸、麝香、熊胆、穿山甲、蟾酥、哈蟆油、金钱白花蛇、乌梢蛇、蕲蛇、蛤蚧、甘草、黄连、人参、杜仲、厚朴、黄柏、血竭、川贝母、伊贝母、刺五加、黄芩、天冬、猪苓、龙胆、防风、远志、胡黄连、肉苁蓉、秦艽、细辛、紫草、五味子、蔓荆子、诃子、山茱萸、石斛、阿魏、连翘、羌活。虎骨、豹骨已被禁用。22•药材的炮制与加工依据：方剂对药性要求、药材质地和特性、不同提取方法净制：去除非药用杂质，“净药材”切制：鲜切、软化切（防成分损失）；片段丝块炮炙：国家标准或地方规范，水制、火制、水火共制粉碎：粉碎度及依据、出粉率23黄芪片牛膝段陈皮丝大黄块24中药炮制特色1、降毒：乌头2、改变或缓和药性（寒热温凉，生地/熟地）3、增效。如延胡索醋炙，大大提高了镇痛效果。4、改变或增强药物作用趋向（升降沉浮，酒炙大黄升提）5、改变药物作用部位或增强对某一部位的作用（药物归经）如醋炙入肝、入盐走肾等。6、便于调剂和制剂，杏仁去皮7、确保药物洁净，有利于储存保管。8、有利于服用（矫味），醋炙或酒炙水蛭25粉碎•确定粉碎药物–龟板等质地坚硬者为提取而粉碎；–西洋参等贵重药材为直接入药粉碎成细粉；–山药等含淀粉量多者为直接入药粉碎成细粉，兼作赋形剂26•确定粉碎程度–提取药材一般粉碎成粗粉（过10目筛）–眼用粉200目–口服100-120目27•确定粉碎方法(1)干法粉碎混合粉碎：含糖或胶质、粘性、油性或动物的皮、肉、骨等特殊药料的，须采用串料、串油、蒸罐等粉碎技术。单独粉碎：贵重细料、毒性药物、树脂、树胶类药物、质地坚硬药物、单独提取的药物等需单独粉碎。(2)湿法粉碎：水飞法和加液研磨法(3)低温粉碎：树脂、树胶类药物如乳香、没药等；糖分、粘液质、胶质含量较高的药物如玉竹、熟地等(4)超微粉碎28•选择粉碎机械–小型截切式磨粉机–锤击式粉碎机（榔头机）–柴田式粉碎机（万能粉碎机）–万能磨粉机–球磨机–羚羊角粉碎机–流能磨：即气流粉碎机–超微粉碎机29•计算细粉收率–出粉率太低、导致处方比例变化者，应单独粉碎–根、根茎、茎木类药材要求出粉率达95％以上–全草类、花类药材要求达到90％以上30中药新药制备工艺研究提取纯化研究31•目的及重要性•工艺路线选择•工艺条件选择•评价指标确定•实验设计方法提取纯化工艺研究内容32目的：去粗取精保持或提高疗效、减小剂量、便于制剂。重要性：直接决定药物作用的物质基础：安全性、有效性、制剂质量。关系到药材资源能否充分利用，大生产可行性和经济效益。目的及重要性33•一般原则1、安全性和有效性为前提（特别是乌头等毒性有效成分的限度）2、综合性：处方特点（合提/分提）、药材性质（粉性/纤维性质）、大生产可行性和成本及环保（有机溶剂使用问题）3、科学性和先进性（大孔吸附树脂等现代分离技术）工艺路线选择（提取纯化）34•内容–提取纯化–浓缩干燥人参龟甲黄芪、玉竹等五味30％蔗糖吐温－801％山梨酸2％）12倍水蒸馏6h渗漉液回收乙醇至1.18-1.22（60℃）浓缩液药渣水提液8倍70％乙醇浸24h，渗漉9倍水煮三次3h/次石菖蒲等五味药渣浓缩液药液挥发油药渣10倍水煮2次2h/次药渣药液浓缩至1.15-1.20（60℃）60％醇沉，回收乙醇至1.18-1.22（60℃）浓缩液枕中健脑液配液灌封浓缩至1.08-1.12（60℃）35分提实例•提取纯化工艺路线设计思路–文献查阅：针对功能主治各药粗提物、部位、成分的研究现有制剂中工艺参考（五味子—醇提物—醇提工艺路线）–依据：新药类别、剂型、给药途径、处方及成分性质等（1类－成分－90％以上－硅胶柱－真空干燥）–考察：各步骤合理性、成分转移率、纯化物含测及制订依据（工艺中含测，特别是新指标、新方法，应进行方法学考察，原料－半成品－成品、工艺筛选指标测定，如牛蒡苷元）36例：牛蒡苷元的含测方法学验证–线性关系考察：A=1*107C-52628，R=0.9998–稳定性考察：12h内稳定–重现性、重复性：良好–加样回收：100.6%–有效部位含量测定：4.2%~5.5%37–不同制剂，考虑不同有效成分或有效部位制剂，应根据其性质设计提取路线（复方丹参脂溶性、水溶性-水醇法）复方制剂工艺路线设计的基础：临床剂型需要，处方君臣佐使、功能主治，药味传统用法、药物性质，成分与药效，单提混合、合提与分组提，混合物、部位与纯品。黄芩—黄芩苷38合提分组提单提经济性******成分针对性******精制难度******成分沉淀影响******39–不同提取方法均有其特点与使用范围，应根据成分理化性质（状态、极性、溶解性），或药效研究结果（青蒿鳖甲汤－青蒿素－有机溶剂提取或萃取）–根据目标提取物的性质选择分离方法和条件（人参皂苷－皂苷型大孔吸附树脂）–根据无效或有害组分性质选择纯化方法和条件（无效蛋白质和多糖－醇沉）40–设计多条路线，通过预试验加以选择–选择合适的溶媒：有效成分提取率高、安全、环保、价廉、易去除等。水和乙醇基本满足这些条件。尽量避免使用一、二类有机溶剂41《中国药典》二部附录VIIIP残留溶剂测定法表格有第一、二、三、四类溶剂分类苯等5种第一类溶剂“应该避免使用”氯仿等27种第二类溶剂“应该限制使用”醋酸、丙酮等27种第三类溶剂“药品GMP或其他质量要求限制使用”石油醚等10中第四类溶剂“尚无足够毒理学资料”42•醇提法：全方饮片70％乙醇回流3次，滤过，离心，回收乙醇并浓缩溶剂至1∶1（生药g/体积mL），得供试液B，备用。•水提法：全方饮片浸泡、水煎煮3次，滤过，离心，浓缩至1∶1（生药g/体积mL），得供试液A，备用。•水提醇沉法：全方饮片按水提法得1∶1（生药g/体积mL）浓缩液，再加乙醇至含醇量为70％，0～4℃冷藏过夜，滤过，回收乙醇并浓缩至1∶1（生药g/体积mL），得供试液C，备用。•醇水双提法：全方饮片用70％醇回流1次，滤过，离心，回收乙醇至无醇味，备用；药渣加水煎煮2次，滤过，离心，加入醇提浓缩液，浓缩至1∶1（生药g/体积mL），得供试液D，备用例：复黄片工艺路线选择43组别出血时间凝血时间血小板/µL空白组肾上腺色腙组痔宁片组ABCD33.95±16.082.49±0.63572.5±164.645.58±2.80**1.58±0.78*879.88±257.81*11.35±7.95**1.42±0.57**792.8±252.45*27.42±3.752.18±1.00702.25±250.3114.50±4.58**1.67±0.81*878.88±242.25*12.00±5.10**1.71±0.71*914.63±314.77*12.33±4.85**1.83±0.64*934.89±281.20*44例：清热解毒口服液工艺路线处方：黄连15g黄芩10g大黄10g工艺路线：浸泡透心水煎煮放冷，滤过黄连、黄芩、大黄水煎液浓缩辅料灌装质检药液浓缩液药液成品45实例问题分析1.黄芩的炮制问题：蒸、燀、沸水投料2.混合水煎问题：产生沉淀3.放冷过滤问题：黄芩苷大量损失4.剂型：液体制剂久置易产生黄芩苷沉淀，有效成分含量低46例：挥发油取舍问题1、取其疗效：柴胡挥发油解热疏肝解郁当归挥发油：补血、活血、止痛、润肠2、舍其毒性：肉豆蔻挥发油（肉豆蔻醚）有肝脏毒性，未见心血管方面活性报道，因此，某复方制剂用于冠心病，提取肉豆蔻挥发油入药则欠妥。473、含量：挥发油含量较多者，如《中国药典》有挥发油限量规定的，丁香、小茴香、姜黄、莪术等，需提取。含量较少者，大生产根本无法收集到者，或仅能收集芳香水者，可考虑不提取，如人参挥发油、大黄挥发油等。对于除挥发油外，其他成分也是有效成分，且挥发油热不稳定者，可考虑不提取挥发油，只提取其他成分入药，白芷等。484、剂型：对于液体剂型，一般需提挥发油或者芳香水，经浓缩或在成型配液时加入，如酒剂、酊剂、醑剂、口服液、注射剂。对于固体剂型，