硕士研究生毕业论文答辩

@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@石河子大学SHIHEZIUNIVERSITY2012届硕士研究生学位论文答辩研究生：@@@@指导教师：@@@@副教授2报告内容研究背景研究目的研究内容实验结果讨论结论致谢3研究背景细粒棘球蚴病(97%)多房棘球蚴病（3%）4研究背景细粒棘球蚴病细粒棘球中绦期幼虫中间宿主：羊、人、小鼠终末宿主：狗流行病学全球流行中国是高发地区Echinococcusgranulosus5研究背景治疗外科手术和药物治疗手术治疗是首选术式外膜内外囊完整摘除术优点：复发率低、对正常肝脏细胞损伤较小6研究背景开放式外膜内外囊摘除术原头节外溢20%高渗盐水肝脏细胞损伤7研究背景PD98059ERK特异性阻断剂抑制ERK的磷酸化，阻止ERK磷酸化活化恶性肿瘤、阿尔茨海默病的治疗8研究背景ERK（细胞外调节蛋白激酶）MAPK家族中的关键成员真核生物和原核生物高度保守激活机制：三级激酶激活模式细胞表面→细胞核内的关键分子9研究背景棘球蚴与MAPK关系Spiliotis：多房棘球绦虫中存在MAPK样信号通路关键成员；Gelmedin：应用ERK抑制剂PD184352可以抑制多房棘球蚴囊泡的生长；10研究背景棘球蚴与MAPK关系纪静：泡球蚴感染的小鼠肝脏组织ERK表达水平高于正常小鼠；吕国栋：细粒棘球蚴原头节扩增出EgERK1基因和EgRas基因；11研究背景MAPK泡状棘球蚴细粒棘球蚴原头节12研究目的通过应用ERK抑制剂PD98059作用于细粒棘球蚴原头节，探讨ERK抑制剂PD98059对细粒棘球蚴原头节的生长抑制作用。13研究内容体外培养细粒棘球蚴原头节；将不同浓度的PD98059体外作用于细粒棘球蚴原头节，光镜观察原头节形态特点和活力变化；将不同浓度的PD98059体外作用于细粒棘球蚴原头节，电镜观察原头节超微结构的变化；WesternBlot检测原头节p-ERK蛋白表达水平；14技术路线感染细粒棘球蚴病的绵羊羊肝原头节分离和培养空白对照组不同浓度PD98059组DMSO组光镜结构活力检测电镜结构p-ERK表达探讨PD98059体外对细粒棘球蚴原头节生长抑制作用15实验结果正常培养的原头节16实验结果正常培养的原头节17实验结果PD98059对原头节的伊红染色活力影响18实验结果不同浓度PD98059对原头节活力影响19实验结果SEM观察正常原头节形态20实验结果SEM观察PD98059对原头节表面皮层的影响21实验结果SEM观察PD98059对原头节表面皮层的影响22实验结果SEM观察PD98059对原头节表面皮层的影响23实验结果TEM观察PD98059对原头节内部结构的影响24实验结果24h原头节p-ERK的表达72h原头节p-ERK的表达25讨论PD98059对原头节生长的影响细粒棘球蚴原头节在体外具有很强的生存能力，在非培养条件下原头节在-10、0、10、20、30、40℃分别能存活3d、36d、28d、12d、4d、3d；能够抑制细粒棘球蚴原头节活性的药物很多，如20%高渗盐水作用原头节15min，通过0.1%的伊红染色观察，原头节100%红染，但对正常细胞损伤严重；讨论PD98059对原头节生长的影响100μMPD98059作用细粒棘球蚴原头节7d，原头节仅有12.4%未被红染；而此浓度对正常细胞几乎没有影响。27讨论PD98059对原头节电镜结构的影响合胞体带外侧的微毛可增加合胞体带与角质层的接触面积，有利于营养物质的吸收，故在棘球蚴无血液供应的情况下仍可较快的生长和不断形成育囊；应用ERK抑制剂PD98059后，原头节表面微毛出现缺损，甚至完全脱落，表明PD98059对原头节的生长有抑制作用；28讨论阿苯达唑、氟苯达唑和PZ作用于细粒棘球蚴原头节后在合胞体带出现空泡、顶突外翻、吸盘变形，认为这是原头节对不利条件的一种“应激反应”；应用ERK抑制剂PD98059后，原头节发生以上三种超微结构的变化与上述药物产生效果相同；29讨论PD98059对原头节p-ERK的水平表达在一些恶性肿瘤和泡状棘球蚴组织中ERK存在着过表达，应用ERK抑制剂可以抑制这些细胞内ERK的表达；本研究应用ERK抑制剂PD98059作用于细粒棘球蚴原头节，发现p-ERK的表达水平降低，说明PD98059能够抑制原头节内p-ERK蛋白表达水平30结论ERK抑制剂PD98059能够抑制原头节在体外培养的活性；ERK抑制剂PD98059能够抑制原头节p-ERK的蛋白表达水平；31在校期间发表的文章32致谢石河子大学SHIHEZIUNIVERSITY2012届硕士研究生学位论文答辩敬请各位专家批评指正！