化学药物技术指导原则的要求和常见问题

2019/8/161化学药药学研究指导原则的技术要求及常见问题国家食品药品监督管理局药品审评中心原副主任、研究员孔英梅2019/8/162化学药药学部分技术指导原则1．原料药制备和结构确准研究技术指导原则；2．制剂研究基本指导原则；*3．质量控制分析方法验证技术指导原则；*4．杂质研究技术指导原则；*5．有机溶剂残留量研究技术指导原则；*6．质量标准建立的规范化过程技术指导原则；7．稳定性研究技术指导原则。（本部分内容为带*的技术指导原则）幻灯片12019/8/163化学药物质量控制分析方法、验证及常见问题验证目的：1．判断采用分析方法是否科学、合理，是否有效控制产品的内在质量。2．质量研究和质量控制的组成部分，确定质量标准基础。幻灯片22019/8/164质量控制分析方法验证的一般原则1．每个控制项目采用的分析方法，均需进行方法验证。2．不同的检测项目采用同一分析方法，验证要求重点不同。（实测分析）幻灯片32019/8/165方法验证的三个要素1．检测项目；2．分析方法；3．验证内容。幻灯片42019/8/166检测项目•鉴别•杂质检查（限度试验、定量试验）；•定量测定（含量测定、溶出度、释放度等）；•其它特定检查项目：粒经分布、旋光度、分子量分布等。幻灯片52019/8/167分析方法•化学分析方法和仪器分析方法原理。•仪器及仪器参数•试剂•系统适用性试验，供试品制备，对照品溶液制备、测定、计算、试验结果报告。幻灯片62019/8/168验证内容专属性、线性、范围、准确度、精密度、检测限、定量限、耐用性和系统适用性。幻灯片72019/8/169专属性专属性系指在其他成分（如杂质、降介物、辅料等）可能存在下采用的分析方法能够准确测定被分析物质的特性的能力测定项目：鉴别反应、杂测检查、含量测定。有机溶媒残留量检查。幻灯片82019/8/1610线性线性系指在设计的范围内，检测结果与试样中被分析物的浓度（量）直接呈线性比例关系的能力，即制备一系列被检测物质浓度系列（至少5个浓度）进测测定，以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，考察是否线性，用最小二乘法进行线性回归。测定项目：杂质量测定、含量测定。溶出度测定、有机溶媒残留量检查。幻灯片92019/8/1611范围范围系指能够达到一定准确度、精密度和线性，测试方法适用的试样中被分析物的高低限浓度或量的区间。测定的项目：1．含量测定：范围应为测试浓度的80%-100%或更宽2．制剂含量均匀度；范围应为测试浓度的70%—130%3．溶出度或释放度：溶出度应为规定限度范围±20%，释放度规定限度范围，从1小时后为20%至24小时后为90%，验证范围0—110%4．杂质：拟定出规定限度的±20%幻灯片102019/8/1612准确度（真实度）准确度系指采用分析方法测定的结果与真实值或认可的参照值之间接近的程度，一般以回收率（%）表示。准确度试验设计需考证在规定范围内制备3个不同浓度的样品，各测定3次（共测定9次）。报告已知加入量的回收率（%）或测定结果平均值与真实值之差及其可性限。检测项目：1．含量测定，原料药可用已知纯度对照品或样品进行测定，制剂可用含已知量被测物的各组份混合物进行测定。若全部组份测得困难，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，必要时，与另一个已建立准确度的方法比较结果。幻灯片112019/8/16132．杂质定量试验①加入已知杂质进行测定；②本法测量结果，与另一个成熟方法比较，如药典方法或已经验证过的方法。③已测定杂质或降解物的相关数据如采用二极管陈列检测器测定紫外光谱，当杂质的光谱与主成份光谱相似，可用原料药的响应因子近似计算杂质含量（自身对照法），应明确作单个杂质与杂质总量相当于主成份重量的比（%）或面积比。幻灯片122019/8/1614精密度精密度系指在规定的测试条件下，同一均质样品，经多次（至少6次）取样，进行一系列检测所得结果之间的接近程度（离散程度），精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。精密度可以从三个角度考察：重复性、中间精离度、重现性。1.重复性：是指在同样的操作条件下，在较短的时间间隔内，由一个分析人员测定所得的结果的精密度，重复性测定可在规定范围内制备3个不同浓度的样品各测定3次（共9次）结果进行评价，或采用同一批样品（把被测物质当作100%），用至少6次结果进行评价。幻灯片132019/8/16152．中间精密度：系指在同一个试验室，由于试验室内部条件改变（如：时间、分析人员、仪器设备）测定结果。3．重现性：指不同实验室之间，不同分析人员。测定结果，分析方法进入法定标准，需进行重现性试验。幻灯片142019/8/1616检测限（灵敏度）检测限系指试样中被分析物能够被检测到的最低量。1．直观法：通过一系列已知浓度及被分析物的样品进行分析并能准确地检测被分析物的最小量及最低浓度。2．信噪比法：用于能显示基线噪音的分析方法，一般以信噪比3：1或2：1时相应的浓度或注入仪器的量确定检测限。幻灯片152019/8/1617定量限定量限系指试样中的被分析物能够被定量测定的最低量，其测结果应具有一定准确度和精密度。通常3倍于检测限或以信噪比为10：1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定1．直观法：通过对一系列含有已知浓度及被测物的样品进行分析在准确度和精密度都符合要求的情况下来确定被测物被定量的最小量2．信噪比法：可接受信噪比是10：1幻灯片162019/8/1618耐用性耐用性是指测定条件发生细小变动时，测定结果保持不变影响的承受程度，能否通过设计的系统适用性试验，尤其测试条件要求苛刻，方法中性予以说明细小变动，HPLC中包括流动相组成或PH值，不用厂牌或不同批号的同类色谱柱，柱温流速等，GC中包括载气及流速，不同厂牌或批号色谱柱、固定相、担体、柱温、进样器和检测器温度等。幻灯片172019/8/1619系统适用性试验采用仪器测试方法进行验证时，将分析设备、电子仪器与实验操作，被测样品等一起完整的系统进行评估，系统适用性即为对整个系统进行评估的指标。所有色谱方法均应进行该指标验证，并将系统适用性作为分析方法的组成部分。具体验证参数和方法参照中国药典有关规定。幻灯片182019/8/1620方法再验证1．原料药合成方法改变，可能引入新杂质，杂质情况，含测专属性再验证。2．制剂处方改变，可能影响检测的专属性，溶出度含测的准确度。3．分析方法改变，如检测波长改变，须重新进行方法学研究。4．已有国家标准的药品质量研究基于1、2情况与已上市品比较无法一致性，因此需对分析方法再验证。幻灯片192019/8/1621方法验证注意问题1．方法验证内容选择和验证设计方案合理充分，验证过程规范严谨。2．方法验证整体性和系统性，验证内容相互关联，是一个整体，如鉴别项目要求专属性。一般采用二种以上方法体现鉴别项目的整体专属性。3．方法验证之间关联性、相互补充，如原料药含测采用容量滴定法，方法本身专属性差，杂质检测采用专属性较高色谱法，体现整体检测方法具有专属性。幻灯片202019/8/1622项目鉴别试验杂质限度试验杂质定量试验含量测定溶出度检查有机溶媒残留量检查准确度——++++精密度——++++专属性++++—+检测限—+————定量限——+——+线性——++++范围——++++质量控制分析方法检测项目幻灯片212019/8/1623常见主要问题：1．验证内容不全；2．验证重点不突出，如对有关物质检查重点为专属性和灵敏度；3．验证方法不科学，如破坏性试验，条件太激烈或无效。幻灯片222019/8/1624化学药物的杂质研究一、研究的意义二、杂质的来源三、杂质的分类四、分析方法学研究五、数据积累六、限度确定幻灯片232019/8/1625一、杂质研究的意义•控制产品纯度，保证安全有效•促进生产工艺、制剂处方工艺、包装的优化•为药品贮藏条件及有效期的预测提供依据幻灯片242019/8/1626二、杂质来源（一）工艺杂质（二）降解物（三）反应物及试剂中混入杂质（外源性杂质）幻灯片252019/8/1627（一）工艺杂质1.原料药在合成过程中产生（实例分析）2.制剂在不合理处方和制备工艺过程中产生（实例分析）3．溶剂、试剂、中间体残留4．痕迹量的催化剂如Ag、Hg的使用,Pd-C的使用。5．无机杂质，硫酸盐，卤化物。幻灯片262019/8/1628（二）降解产物降解产物的产生与药物本身的结构、理化特性和稳定性有密切关系。如酯类结构药物：阿司达林O-C=OOHCH3+H2O+CH3COOHCOOHCOOH如酰胺类结构药物·青霉素类抗生素SCH3R-CONH-CH-CHACCH3C—NCH—COOHSH2OCH3R—CO—NH—CH—CHCCH3—CH—COOHCA环为内酰胺环OOH幻灯片27NHO2019/8/1629如甙类结构药物：氨氨糖甙类抗生素链霉素NHNHH2N—C—HN——NH—C—NH2链霉狐CHCHO链霉糖幻灯片28OHOHCCH3CHOOHCCHNHCH3HCOHHO-C-HCHCH2OHON-甲基葡萄糖HOOH本品二键断裂生成链霉胍、链霉糖、N-甲基葡萄糖2019/8/1630药物结构中易被氧化功能团：羟基、巯基、羰基、氨基、碳碳双键等1．羟基，主要酚羟基、醇羟基，如VCOOCCCOOHCOOH1/2o2H2O+VC脱氢VC二酮克洛糖酸二羟基丁酸草酸C-OHC-OHHCHO-CHCH2OHC=OC=OHCHOCHCH2OHOC=OC=OHOCHH-C-OHCH2OHHOCHHC-OHCH2OH幻灯片29OCOOHCOOH2019/8/16312．巯基脂肪性或芳香性巯基均易氧化，一般形成二硫化合物CH2—CH—COOHCH2—CH—COOHSNH2SCH2—CH—COOHNH2半胱氨酸胱氨酸幻灯片30SHNH22019/8/16323．羰基主要是醛类化合物如：中药中鱼醒草的有效成份癸酰乙醛（鱼醒草素）易氧化成癸酰二酸O[O]OCH3（CH2）8—CCH3（CH2）8—CCH2CH2COOH幻灯片31OCH2019/8/16334．氨基主要是芳香佰胺易氧化生成醌或偶氮化合物如：磺胺类药物NH2RHNSO2——N2[O]RHNSO2——NSO2NHR或RHNSO2——N=N——SO2NHRO幻灯片322019/8/16345．碳碳双键：典型的游离基链式反应。初始在日光热，或其他因素影响产生微量游离R·，此游离基又可使双键邻近的碳原子变成带有一个电子的游离基。R·+R1—CH2—CH=CH—R2R—H+R1—C·H—CH=CH—R2生成物与空气中氧结合形成过氧化物OO·R1—C·H—CH=CH—R2+O2R1—CH—CH=CH—R2幻灯片332019/8/1635此游离基再与其它分子反应OO·R1—C—CH=CH—R2+R1—CH2—CH=CH—R2OOHR—C—CH=CH—R2+R—CH—CH=CH—R2如此反复连续进行，而生成的过氧化物，再分解生成醛或酸类化合物（不饱和脂肪酸变质机制）其他如沙星类合成抗菌素遇光、光解反应，产生光解物质。幻灯片33(续)·2019/8/1636（三）反应物及试剂中混入杂质（外源性杂质）①起始原料带入•合成头孢氨苄时，终产物中的△异构体由起始原料△-7ACA中残留的△2异构体引入。•起始原料L-半胱氨酸，由于光学纯度未控制影响终产品质量•盐酸格拉司琼一采用关键中间体α—托品醇，其由托品酮还原托品醇，还原剂有立体选择性反应温度时间对托品醇质量影响极大，可能产生立体异构体β—托品醇，若α—托品醇质控差影响产物质量。•合成洛美利嗪，起始原料2、3、4三甲氧基苯甲醛，双（4—氟苯基）甲基呱嗪的合成使用甲苯，乙腈等二类以上有机溶剂，终产物须观察二类有机溶剂残留。•痕迹量的催化剂如Ag、Hg的使用，无机杂质硫酸盐，卤化物。幻灯片342019/8/1637三、杂质的分类按毒性和生物活性分：一般杂质、毒性杂质、有生物活性杂质。按化学类别和性质分：有机杂质、无机杂质、残甾溶剂。按结构分：几何异构体、光学异构体、聚合物，其他甾体，氨基