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细胞迁移cellmigration2细胞迁移细胞迁移参与细胞迁移的分子活动机制生理过程检测简介3细胞迁移—简介细胞迁移(英文:cellmigration,中文也称细胞移行、细胞移动或细胞运动)指的是细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的浓度梯度后而产生的移动。过程中细胞不断重复着向前方伸出伪足,然后牵拉胞体的循环过程。细胞骨架和其结合蛋白是这一过程的物质基础,另外还有多种物质对之进行精密调节。4路标信号信号分子可能并不一定要形成浓度梯度才能为细胞指路,或者只要它做出连续的分布让细胞“顺瓜摸藤”即可,甚至是沿途的不迁移细胞,在自身胞膜表面表达一些蛋白质,做出“邀请”或是“排挤”的姿态。极化当细胞胞膜上的受体接触到周围环境里面的迁移信号分子之后,细胞内部与细胞迁移有关的物质会重新分布,细胞显出“前”和“后”两端,为迁移做准备。细胞迁移—活动机制化学趋向性细胞的化学趋向性是指细胞具有沿着外界某一物质的浓度朝向或是背离发放源运动,甚至形变的能力,这是一种基本的细胞反应。1.迁移方向的确定和极化5突出与底质粘着牵引尾部向前细胞迁移—活动机制2.迁移的四步骤细胞前端突出细胞体前移6细胞迁移—参与细胞迁移的分子细胞外(肽,代谢产物,细胞壁或是细胞膜的残片)细胞内(膜上受体Gprotein)信号分子微丝和其结合蛋白微管中间纤维细胞骨架其构象会随着与ATP和ADP的交替结合而改变,ATP水解的能量转化为机械能,引起马达形变,或者是它和与其结合的分子产生移动分子马达7细胞迁移—相关的生理过程脊椎动物的神经嵴细胞无脊椎动物如海胆的原肠胚形成过程胚胎发生致病源微生物对宿主细胞的入侵同样会造成微丝的动态改变。细菌感染再生纤维性修复损伤修复癌细胞的增殖与转移癌症转移白细胞的渗出是炎症反应最重要的特征白细胞渗出8Transwellinvasionassay细胞划痕检测方法细胞迁移—检测9细胞迁移—检测transwell将Transwell小室放入培养板中,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞。应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。10(1)共培养体系:小于3.0um孔径条件下,细胞不会迁徙通过,因此,若研究不涉及细胞运动能力,不需要细胞穿过聚碳酸酯膜,则应选择3.0µm以下孔径。将细胞A种于上室,细胞B种于下室,可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。Transwell11(2)肿瘤细胞迁移实验常用8.0、12.0µm膜,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑,计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。Transwell12(3)肿瘤细胞侵袭实验常用8.0、12.0µm膜,原理与肿瘤细胞迁移实验类似。上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑Transwell13基质胶再水化。1制备细胞悬液。2接种细胞。培养细胞3有基质胶的Transwell小室制备细胞计数。414Transwell—细胞计数荧光试剂检测MTT法①用棉签擦去基质胶和上室内的细胞②染色③细胞计数:我们使用的是LeicaDC300F正置显微镜进行观察和拍照,把Transwell小室反过来底朝上就可清楚看到小室底膜上下室侧附着的细胞。结晶紫检测谢谢!
本文标题:73细胞迁移
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