植物病害的诊断

第三节植物病害诊断一、诊断的程序(1)症状的识别与描述；(2)调查询问病史与有关档案；田间观察症状诊断病原鉴定确定病害从症状入手，全面检查，仔细分析，下结论要有余地。(3)采样检查(镜检与剖检等)；(4)专项检测；(5)逐步排除法得出适当结论。诊断的程序一般包括：二、柯赫氏法则(Koch’sRule)•又称柯赫氏假设(Koch’spostulates)，通常是用来确定侵染性病害病原物的操作程序。•如发现一种不熟悉的或新的病害时，就应按柯赫氏法则的四步来完成诊断与鉴定。柯赫氏法则具体内容（1）在病植物上常伴随有一种病原生物存在；（2）该微生物可在离体的或人工培养基上分离纯化而得到纯培养物；（3）将纯培养物接种到相同品种的健株上，表现出相同症状的病害；（4）从接种发病的植物上再分离到其纯培养，性状与原来微生物记录相同。如果进行了上述四步鉴定工作，得到确实的证据，就可以确认该微生物即为其病原物。凭症推断分离病原(Isolationpathogen)回接试验（自身)InoculationTest健株病株再分离病株Re-isolationThesamepathogenastheinoculatedone柯赫氏法则同样也适用于对非侵染性病害的诊断。只是以某种怀疑因素来代替病原物的作用，例如当判断是缺乏某种元素引起病害时，可以补施某种元素来缓解或消除其症状．即可确认是某元素的作用。柯赫氏法则只是病害鉴定过程中的一个重要环节，通过柯赫氏法则只是确定了病原物，只有通过对病原物的形态学观察和生理学及分子生物学研究才能鉴定病原物和病害。三、植物病害诊断要点•植物病害的诊断，首先要区分是属于侵染性病害还是非侵染性病害。许多植物病害的症状有很明显的特点，一个有经验或观察仔细善于分析的植病工作者是不难区分的。在多数情况下，正确的诊断还需要作详细和系统的检查，而不仅仅是根据外表的症状。（一）侵染性病害病原生物侵染所致的病害特征：•病害有一个发生发展或传染的过程；•在特定的品种或环境条件下，病害轻重不一；•在病株的表面或内部可以发现其病原生物体存在(病征)，它们的症状也有一定的特征。（1）真菌病害•症状鉴别：真菌病害症状多为坏死、腐烂和萎蔫，大多数在病部有霉状物、粉状物、点状物、锈状物等病症。对一些真菌性的维管束病害，茎干的维管束变褐，保湿培养后从茎部切面长出菌丝。对于常见病害，通过这一步就可确定病害种类。•镜检验证：对于不能确定的病害，通过刮、切、压、挑等方法制片，观察孢子、子实体或营养体的形态、类型、颜色及着生情况等。镜检时，病症不明显的，进行保湿培养；保湿培养后仍没有病征的，可选用合适的培养基进行分离培养。（2）细菌病害•症状鉴别：多数植物细菌病害症状特点表现为坏死、萎蔫、腐烂和畸形（根肿、毛根）等，病症病部有菌脓、菌膜、菌痂。坏死病斑多受叶脉限制，为角斑或条斑，初期有水渍状或油渍状边缘，半透明，常有黄色晕圈。萎蔫性病害，病株茎基部横切面用手挤后可见菌脓，且维管组织变褐。腐烂组织的常伴有臭味，无菌丝。细菌病害•镜检验证：一般细菌病害简便而可靠的诊断技术是镜检病组织中有无喷菌现象(bacteriaexudation，BE)。检查时，选择典型、新鲜、早期的病组织用流水冲洗干净，吸干水分，在病健处用剪刀剪下0.5-1cm组织，放在载玻片的中央，滴一滴无菌水，用解剖针将组织撕破，加上盖玻片，静置10min进行镜检，观察到病组织周围有大量的细菌云雾逸出，可确定为细菌病害。少数瘤肿病组织中菌体较少，观察不到喷菌现象，可涂片观察。（3）植物病原体病害•症状鉴别：病害的特点是植株矮缩、丛枝、小叶、黄化，少数出现花变叶或花变绿，系统性侵染，无病症。•注射四环素后，初期病害的症状可以隐退、消失或减轻，但对青霉素不敏感。（4）病毒病害•症状鉴别：症状主要表现为以变色（花叶、斑驳、环斑、黄化等）、畸形（矮缩、蕨叶等）、坏死，无病症，多为系统性侵染，症状多从顶端开始表现，然后在其他部位陆续出现。•镜检验证：撕取表皮用光学显微镜镜检是否可见内含体；或进一步取病组织制作超薄切片，电镜下能否观察到病毒粒体和内含体；也可从病组织中挤出汁液，经负染后于电镜下能否观察到病毒的形态和大小。•经过镜检，必要时，再结合汁液摩擦、嫁接或蚜虫接种等方法进行传染性试验，就可以初步确定为病毒病。（5）线虫病害•症状鉴别：线虫病的病状有矮化、黄化、萎蔫、坏死、腐烂、畸形（根结、叶扭曲）等，病症有的在植物根表、根内、根际土壤、茎或籽粒(虫瘿)中可见到线虫。•镜检验证：对于病部产生肿瘤或虫瘿的线虫病，可以作切片用光学显微镜观察，为了观察更清楚，也可用碘液对切片进行染色，线虫可染成深褐色，植物组织呈淡黄色。•观察时要注意线虫是否有口针，以和腐生线虫区别；同时还要考虑线虫数量的的大小，因为某些线虫必须有足够的群体数量才能引起明显症状；另外有些线虫可引起二次侵染，要注意区分，必要时进行试验验证。•种类鉴定：根据观察到的线虫形态特征（体形、大小、口针、食道、肠、生殖器官、腺体、体段比例等），结合寄主、致病性的特点，与相关资料进行对照、比较和分析，然后确定其种类。•寄生性植物引起的病害在病植物体上或根际肉眼可以看到寄生物，如寄生藻、菟丝子、独脚金等。(二)非侵染性病害•病植物上无病征，也分离不到病原物•往往大面积同时发生同一症状的病害•没有逐步传染扩散的现象非侵染性病害诊断要点1．病害突然大面积同时发生，发病时间短，只有几天，大多是由于大气污染、三废污染或气候因素如冻害、干热风、日灼所致。2．病害只限于某一品种发生，多为生长不良或有系统性的一致症状，多为遗传性障碍所致。3．有明显的枯斑、灼伤，且多集中在某一部位的叶或芽上，无既往病史，大多是由于使用农药或化肥不当所致。4．明显的缺素症状，多见于老叶或顶部新叶。3.环境条件调查非侵染性病害（初步诊断）1.发生特点观察4.病原鉴定化学诊断法人工诱发法指示植物鉴定法排除病因法2.病株表现在病植物上看不到任何病征，诱发和分离也得不到病原物。在田间无发病中心，不表现由点到面，由发病中心向四周扩展的过程，一般成片，成条发生，较大面积均匀发生。1.发生特点观察2.病株表现除个别高温引起的日烧病和喷药、施肥不当产生药害一般都是全株性的，如缺素、涝害等。3.环境条件调查1）气象：冻害、灼烧、降雨、光照不适等2）土壤：涝害、旱害、盐碱害、营养不良3）肥料与毒物（农药）综合分析确定病因4.病原鉴定1）化学诊断法：分析病田土壤，测定其成分与正常值比较，从而查明过多过少的成分，确定病原（对缺素症，盐碱害的诊断较准确）2）指示植物鉴定法：适用缺素症的鉴定，即选择最容易缺乏该种元素，症状表现最明显、最稳定的植物，种植在怀疑为缺乏该元素的果树附近，观察其症状反应，从而确定病原。草本植物及其缺素症状：缺氮：花椰菜、甘蓝；缺磷：油菜；缺钾：马铃薯、蚕豆；缺钙：甘蓝、花椰菜；缺铁：甘蓝、马铃薯；缺硼：甜菜、油菜。3）人工诱发及排除病因的检验法：a人工诱发：人为提供类似发病的条件，如低温，缺某种元素，看植株是否发病。b排除病因：对病株喷洒，注射怀疑缺乏的元素，看是否可减轻或恢复病害的方法。第四节植物侵染性病害的发生与发展一、病原物的寄生性和致病性（一）病原物的寄生性1、定义：寄生性是指一种生物依附于其他生物[寄主]而生存的能力。主要是从寄主活细胞和组织中获得营养的能力。2、分类：按病原物寄生性的强弱，病原物可分为活体营养生物，半活体营养生物，死体营养生物。•（1）活体营养生物：寄生能力最强，只能从寄主的活细胞中吸取营养，大多不能人工培养。它们依赖寄主的活细胞而生存，因而寄主细胞组织的死亡，对它反而不利。如病毒、寄生性种子植物、锈菌、白粉菌、霜霉菌。•（2）半活体营养生物：这类病原物侵染寄主的活细胞组织后，可以从中吸收营养，但当寄主组织死亡后，还能继续发展形成孢子。如引起叶斑病的许多真菌。•（3）死体营养生物：这类病原物的寄生能力最弱。侵入寄主组织前先将细胞杀死，然后侵入在其中腐生。如丝核菌、镰刀菌、腐霉菌专性寄生物：只能在活体寄主上生活的寄生物。兼性寄生物：兼具寄生与腐生能力的寄生物，又称非专性寄生物。专性寄生物主要依靠抗病品种来防治，而对非专性寄生物一般通过改善栽培和环境条件提高植物的抗病能力防治。根据寄生能力的强弱寄生物可分为：（二）病原物的致病性•1、定义：致病性是指病原物对寄主植物的破坏和毒害，从而使寄主植物发生病害的能力。•2、致病机制：•（1）夺取寄主的营养物质和水分，供自己生长和繁殖。•（2）酶的作用；许多植物病原真菌和细菌都能产生一些水解酶，可以分解植物细胞壁，使组织腐烂。如果胶酶、脂肪酶、纤维素酶、蛋白酶、木质素酶等。2、致病机制：•（3）毒素的作用；有些病原物可以产生毒素。毒素是一种非常有效的致病毒物，很低的浓度即可让植物生病。•（4）生长调节物质；主要有吲哚乙酸、赤霉素、细胞激素和乙烯等。许多病原物可产生生长调节物质，使植物的正常生长受到干扰。如肿瘤和生长过度，都与植物体内的生长调节物质失调有关。二、寄主植物的抗病性•寄主的抗病性是指寄主植物抵抗病原物侵染的性能，是植物的一种属性。•具有一定的遗传稳定性，但也可以发生变异。（一）植物抗病性的表现类型•1、感病：植物易受病原物侵染而发病的特性称为感病。发病较重的为感病，发病很重的为高度感病。•2、抗病：寄主植物受病原物侵染后发病轻的称为中度抗病，发病很轻的称为高度抗病。•3、免疫：寄主植物受病原物的侵入，表现为完全不发病，无症状。与免疫有关的一个概念—过敏反应：指寄主在病原物侵染点的细胞迅速死亡，阻止专性寄生物的扩展蔓延。•4、耐病：植物的耐病性是植物忍受病害的性能。在外观上，植物表现感病，但植物体的恢复补偿能力比较高，病害对产量和品质的影响较小。•5、避病：寄主抓某种条件下避免发病或避免病害大发生的习性，寄主本身是感病的。（二）垂直抗性和水平抗性•1、垂直抗性：也称小种专化性抗性，是指植物的某个品种能高度抵抗病原物一个或几个生理小种。表现为高抗或免疫。但抗病性不稳定，不持久。会因田间小种变异而丧失抗性，从而表现为高度感病。在遗传学上，垂直抗性是由单基因控制的，表现为质量遗传。•2、水平抗性：是指植物的某个品种能抵抗病原物的许多生理小种，抗病力不强，一般表现为中等抗病。但抗病性稳定、持久。因它能抗多个小种，不会因某一生理小种变化而丧失抗病性。在遗传学上，水平抗性是由多基因控制的，表现为数量遗传。（三）植物的抗病机制1、抗侵入：指寄主植物的抗病性表现在形态解剖或生理机能上具有阻止病原物侵入的能力。2、抗扩展：表现为植物受病原物侵入以后，由于它内在的因素存在，能抑制病原物扩展开的能力。细胞壁的厚度和硬度与抗扩展有关。有些植物在病原物侵入后，可以产生一系列生理生化反应，阻止进一步扩展。如植物保卫素、甘薯酮、氯原酸、豌豆素等。•对植物预先接种某种微生物或进行某些化学、物理因子的处理后可以使植物产生抗病性。如病毒近缘株系间的“交互保护作用”，当寄主植物接种弱毒株系后，再感染强毒株系，寄主对强毒株系表现出抗性。三、植物病害的侵染过程•侵染循环是指病害从前一个生长季节开始发病，到下一个生长季节再度发病的全部过程。侵染过程是指从病原物同寄主植物接触开始，到寄主呈现症状的整个过程。也叫侵染程序，又叫病程。包括四个阶段，即接触期、侵入期、潜育期、发病期。这几个过程是连续进行的。（一）接触期•接触期是指病原物的繁殖单位和寄主植物的感病部位接触的时期。•病原物的繁殖单位，如真菌的孢子、细菌的细胞、病毒的粒体、线虫的幼虫，必须先和寄主植物的感病部位接触，才有可能侵入。因此。避免或减少病物与寄主植物接触的措施，是防病的重要手段。（二）侵入期•病原物接触植物后，从侵入植物到和寄主建立寄生关系为止的一段时间，称为侵入期。植物病原物除极少数是外寄生的以外，几乎都是内寄生的，所以病害的发生都是从侵入开始的。1、侵入途径•（1）直接侵入：是指病原物直接穿透寄主的角质层和细胞壁。•（2）自然孔口侵入：植物的许多自然孔口如气孔、排水孔、皮孔、