明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则-XXXX0430-2

海南省药品检验所2012年05月04日背景资料背景资料背景资料背景资料检测方法检测方法检测方法检测方法方法学验证方法学验证方法学验证方法学验证注意事项注意事项注意事项注意事项发布发布发布发布《《《《明胶药用空心胶囊铬检测明胶药用空心胶囊铬检测明胶药用空心胶囊铬检测明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则方法指导原则方法指导原则方法指导原则》》》》的通知的通知的通知的通知各省、自治区、直辖市(食品)药品检验所（院）：根据国家食品药品监督管理局的要求，为指导明胶药用空心胶囊中铬检测，保证检验质量，我院依据《中国药典》2010年版（二部）的标准，结合前期工作经验，组织制定了《明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则》（见附件），供各单位检测时参考。附件：明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则明胶药用空心胶囊铬检测方法指导原则((((://://://))))二○一二年四月二十一日胶胶胶胶囊囊囊囊壳壳壳壳分分分分类类类类硬胶囊硬胶囊硬胶囊硬胶囊软胶囊软胶囊软胶囊软胶囊::::成膜材料和内容物同时加工成产品成膜材料和内容物同时加工成产品成膜材料和内容物同时加工成产品成膜材料和内容物同时加工成产品((((海藻酸盐、海藻酸盐、海藻酸盐、海藻酸盐、明胶明胶明胶明胶))))明胶空心胶囊明胶空心胶囊明胶空心胶囊明胶空心胶囊植物来源：主要是植物纤维素植物来源：主要是植物纤维素植物来源：主要是植物纤维素植物来源：主要是植物纤维素动物来源动物来源动物来源动物来源::::�明胶空心胶囊（VacantCapsules）系由胶囊用明胶加辅料制成的空心硬胶囊。由帽、体两节胶囊壳组成，可容纳各种药粉、液体、半固体和药片。可掩饰药物的异味，易于吞服，具良好的崩解能力，较长的保质期等优点。�规格尺寸：从大到小依次为000#、00#、0#、1#、2#、3#、4#、5#等8种型号。�主要原材料：由明胶、甘油、水以及其它的药用材料明胶、甘油、水以及其它的药用材料明胶、甘油、水以及其它的药用材料明胶、甘油、水以及其它的药用材料(TiO(TiO(TiO(TiO2222))))组成组成组成组成。明胶约占所有原辅料的90%以上。�明胶是从动物（牛、马、猪、鱼、驴）的皮、骨、腱、鳞等含胶原蛋白的组织，经过酸、碱或酶水解处理以后降解生成的非均匀多肽混合物，由多种氨基酸所组成。�明胶成分：85～90%蛋白质，0.3%～0.2%矿物质，9%～12%水分。�外观近于无色或者呈淡黄色，为透明、无特殊臭味的固体，分子量为1.75-45万。�根据用途分为三类：药用明胶，食用明胶和工业明胶(照相明胶)。�有关标准�药用明胶空心胶囊：《中国药典》2010年版（二部）（Cr:2mg/kgCr:2mg/kgCr:2mg/kgCr:2mg/kg）�Gelatin：•EP7.0/BP2010（Cr:10ppmCr:10ppmCr:10ppmCr:10ppm）•USP34（Cr:Cr:Cr:Cr:没有规定）•JP16（Cr:Cr:Cr:Cr:没有规定）�药用明胶：QB2354-2005（Cr:Cr:Cr:Cr:2.0mg/kg）(QBQBQBQB:轻工行业标准)�食品添加剂明胶：GB6783-94GB6783-94GB6783-94GB6783-94（AAAA级：级：级：级：1.0mg/kg1.0mg/kg1.0mg/kg1.0mg/kg，，，，BBBB级：级：级：级：2.0mg/kg2.0mg/kg2.0mg/kg2.0mg/kg）�食用明胶：QB/T4087-2010（Cr:2.0mg/kgCr:2.0mg/kgCr:2.0mg/kgCr:2.0mg/kg）�工业明胶：QB/T1995-2005（Cr:Cr:Cr:Cr:没有规定。用途用途用途用途：1，火柴的起火剂；2，粘合剂；3，电解工业；4，纺织工业；5，感光耐蚀膜；）微波消解技术简介微波消解技术简介1.微波：是一种为频率300MHz—300GHz的电磁波，目前工业、科学研究、医学及家用等民用微波的频率为2450土50MHz。�2、微波消解原理及其特点：当微波通过试样时，极性分子随微波频率快速变换取向，产生每秒钟变换方向2.45×109次的震动，分子相互碰撞摩擦，分子总能量增加，使试样温度急剧上升；同时，试液中的带电粒子（离子、水合离子等）在交变的电磁场中，受电场力的作用而来回迁移运动，也会与临近分子撞击，使得试样温度升高，极大地提高化学反应的速度。（1111）体加热：微波加热直接作用到物质内部，加热更快速、均匀，速率非常快。（2222）过热现象：微波加热还会出现过热现象（即比沸点温度还高），更高的反应温度，利于试样的消化。（3333）搅拌作用：交变的电磁场相当于2.45×109次/s的高速搅拌器，使试剂与试样的表面不断更新，不断接触新的试剂，促使化学反应加速进行。密闭或开放式的对比0501001502002503000510152025Time,minTemperature,酸的沸点消解罐的工作温度上限openclosed经验规律:“温度升高10度，反应速度提高1倍密闭消解罐中的反应Organicmaterial有机材料反应式(CH2)n+2HNO3+∆T→CO2↑+2NO↑+2H2OMetals金属反应式6H++3Me+2HNO3+∆T→3Me2++2NO↑+4H2OGeologicalsamples地质样品反应式SiO2+4HF+∆T→SiF4↑+2H2O样品越多�气体产物越多�压力越高风险：爆管！《中国药典》2010年版（二部）明胶空心胶囊项下铬检查项（P1204）�取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸5~10101010ml，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波消解炉内，进行消解。消解完全后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸汽挥尽并近干，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并用2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；同法制备试剂空白溶液；另取铬单元素标准溶液，用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0μg的铬标准贮备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬0~80ng的对照品溶液。�取供试品溶液与对照溶液，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（附录IVD第一法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。含铬不得过百万分之二（2mg/kg）。�仪器�原子吸收分光光度计（含石墨炉原子化装置）�电子天平�微波消解仪�电热板或其他赶酸设备，如：恒温消解仪、赶酸器等。�试剂�硝酸（优级纯,国药集团）�铬单元素标准溶液（1000µg/ml，国家标准物质）�检验样品：�胶囊剂（由明胶空心胶囊壳装载的胶囊）�检验项目：�明胶空心胶囊中的铬�空心胶囊壳的制备：�参考附录IE胶囊剂装量差异项（附录8）�具体制备方法：倾出胶囊剂的内容物，胶囊壳用棉棒或小刷试净（不得损坏囊壳不得损坏囊壳不得损坏囊壳不得损坏囊壳），放置，待用。�胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬的测定方法：1.1.1.1.铬标准贮备液的制备铬标准贮备液的制备铬标准贮备液的制备铬标准贮备液的制备：取铬单元素标准溶液（1000µg/ml），用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0μg的铬标准贮备液(不得超过一个月不得超过一个月不得超过一个月不得超过一个月)。2.2.2.2.标准溶液的制备标准溶液的制备标准溶液的制备标准溶液的制备：分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬0~80ng的对照品溶液。临用时临用时临用时临用时现配现配现配现配。�胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬测定方法((((过夜过夜过夜过夜))))：3.3.3.3.供试品溶液的制备供试品溶液的制备供试品溶液的制备供试品溶液的制备：精密称取本品0.5g(胶囊整体称重，如胶囊整体称重，如胶囊整体称重，如胶囊整体称重，如1111号胶囊约号胶囊约号胶囊约号胶囊约7777个，精密称定个，精密称定个，精密称定个，精密称定)，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸5~10101010ml，混匀，浸泡过浸泡过浸泡过浸泡过夜夜夜夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波炉内消解。消解完全后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸汽挥尽并近干(1~2mL1~2mL1~2mL1~2mL)，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液供试品溶液供试品溶液供试品溶液；同法制备试剂空白溶液，作为空白校正。4.4.4.4.测定法测定法测定法测定法：取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（《中国药典》2010年版（二部）附录IVD第一法，标准曲线法标准曲线法标准曲线法标准曲线法），在357.9nm357.9nm357.9nm357.9nm的波长处测定，计算，即得。�胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬新测定方法新测定方法新测定方法新测定方法((((不过夜不过夜不过夜不过夜))))：取样品0.5g0.5g0.5g0.5g，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸硝酸硝酸硝酸5ml5ml5ml5ml，100100100100℃℃℃℃30303030分钟分钟分钟分钟使溶解，补加硝酸补加硝酸补加硝酸补加硝酸2ml2ml2ml2ml，加水1mL，待冷却至室温，加加加加0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml氢氟酸氢氟酸氢氟酸氢氟酸，进行第一次微波消第一次微波消第一次微波消第一次微波消解解解解（参考程序为10min升温至120℃，保持5min，10min升温至140140140140℃℃℃℃，保持15min）。冷却放气冷却放气冷却放气冷却放气（无需完全打开消解罐盖，只需扭松即可）。随后进行第二第二第二第二次消解次消解次消解次消解（参考程序为10min升温至150℃，保持5min，10min升温至185185185185℃℃℃℃，保持15min）。冷却后，加热赶酸至加热赶酸至加热赶酸至加热赶酸至1~2ml1~2ml1~2ml1~2ml，，，，2%2%2%2%硝酸溶液至硝酸溶液至硝酸溶液至硝酸溶液至50ml50ml50ml50ml，作为供试品溶供试品溶供试品溶供试品溶液液液液。同法制备试剂空白溶液同法制备试剂空白溶液同法制备试剂空白溶液同法制备试剂空白溶液；另取铬单元标准溶液，用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0ug的铬标准储备液，临用时临用时临用时临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬0~80ng的对照品溶液。测定法测定法测定法测定法：取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（《中国药典》2010年版（二部）附录IVD第一法，标准曲线法），在357.9nm357.9nm357.9nm357.9nm的波长处测定，计算，即得。�线性：�制备含铬的对照品溶液至少5份，浓度依次递增，最高浓度吸收值应在0.8以下，保证具有较好的线性范围，相关相关相关相关系数（系数（系数（系数（rrrr））））≥≥≥≥0.990.990.990.99。检测波长：357.9nm。�准确性：�应进行整个实验过程的（包括前处理）方法学回收率验证，暂定回收率应为80%-120%80%-120%80%-120%80%-120%的范围内。每波次测定需进行随行回收试验，每10个样品加一个质控样品。2ppm2ppm2ppm2ppmLOQ:0.5ppmLOQ:0.5ppmLOQ:0.5ppmLOQ:0.5ppm�重复性�取限度浓度的标准品溶液重复测定5次，吸收度（测定值）的变化范围（RSD）不得过不得过不得过不得过5%5%5%5%。�定量限（LOQ）�本方法定量限应不低于0.5mg/kg。1.消解：�样品前处理是试