心血管活动的神经体液调节

心血管活动的神经体液调节实验中心机能实验室张福梅[实验目的]1．学习直接测定家兔动脉血压的急性实验方法。2．观察神经、体液因素对心血管活动的影响。[实验动物]家兔［实验器材]兔手术台、常用兔手术器械、铁支架、气管插管、动脉插管、三通管、动脉夹、ＢL-420F生物机能采集系统、压力传感器、保护电极、纱布、棉球、注射器(1ml、5ml、20m1)[实验药品]生理盐水、25%乌拉坦、肝素(500U／ml)、肾上腺素(1：10000)、乙酰胆碱(1：10000)。[实验方法与步骤]1.动物的准备1)麻醉动物取家兔一只，仰卧位固定，颈正中备皮，25%乌拉坦（4mL/kg）全醉。2）手术剪去颈前部兔毛，于颈部正中切开皮肤约7cm。用止血钳分离皮下组织，暴露胸骨舌骨肌。沿正中线分开肌肉可暴露出气管，并继续沿气管两侧分离结缔组织使气管游离。然后用拇指和食指捏住气管上的肌肉和皮肤外翻，用另外三个手指在皮外将外翻的组织抬起。此时，可在气管外侧见到神经血管丛。丛内包含颈总动脉、迷走神经、交感神经、减压神经。在外翻而抬起的组织上可以仔细区别三根神经的粗细：迷走神经最粗、交感神经次之、减压神经最细。在分离的气管、颈总动脉及神经下方各穿一不同颜色的线备用。并在神经表面滴37℃液体石蜡，以防止神经干燥，并起到绝缘效果。3）气管插管4）颈动脉插管尽可能长地分离一侧颈总动脉，在其下方穿两根丝线，其中一根在远心端结扎动脉，用动脉夹夹住动脉的近心端，在结扎线与动脉夹之间的动脉长度越长越好，一般至少有3cm左右。将另一条丝线置于此段动脉下方以备插管插入后结扎用。用锐利的眼科剪刀在尽可能靠远心端结扎处作一斜形切口，约切开管径的一半，然后将动脉插管向心脏方向插入血管，用已穿好的丝线结扎牢固，并用此丝线在插管的突起上缚紧固定，以防插管从动脉切口滑出。2．实验仪器的准备1）减压神经下放置刺激电极；通过三通管将压力传感器及动脉插管中充满500U／ml的肝素溶液。2）打开BL-420F生物机能采集系统，接通压力传感器，从显示器的“实验项目”中选择“循环实验”中“动脉血压调节”。3.实验项目的观察1）观察正常血压曲线调节扫描速度与增益，可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化，心搏为一级波，呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢，观察正常血压曲线。2）夹闭颈总动脉用动脉夹夹闭对侧颈总动脉10-15s，记录血压的变化，当出现一段明显变化后，突然放开动脉夹，血压有何变化。3)牵拉颈总动脉手持左侧颈总动脉上的远心端结扎线,向心脏方向快速牵拉3s,观察血压的变化。持续牵拉，观察血压的变化。4）静脉注射乙酰胆碱待血压基本稳定后，由耳缘静脉注射1：10,000乙酰胆碱0.2ml，观察血压的变化。5)静脉注射肾上腺素待血压基本稳定后，由耳缘静脉注射1：10,000肾上腺素0.2ml，观察血压的变化。6）刺激迷走/交感神经刺激交感神经，记录血压变化后。用同样的方法刺激迷走神经，观察血压下降曲线与2)有何不同(如果血压下降很快、很低，应立即停止刺激)。7）刺激迷走外周端结扎对侧迷走神经后剪断，电刺激迷走外周端，观察血压有何变化。血压出现明显变化时立即停止刺激。8）刺激减压神经待血压基本稳定后，双重结扎减压神经，并在两线间间断减压神经，分别用中等强度电流刺激减压神经的中枢端和外周端，观察血压变化，待血压出现较明显变化后，停止刺激。9）失血待血压基本稳定后，调节三通管与50ml注射器（内留肝素约0.1ml）相通，放血30ml→5min记录血压变化，再放血10-20ml→5min记录血压变化，当血压维持在40mmHg以下时，立即回输血，观察血压变化。实验完毕，结束实验，进行资料反演、剪辑并打印结果。[注意事项]1.每观察一个项目，必须待血压恢复正常后，才能进行下一个项目。2.每次静脉注射完药物后应立即输约5ml的生理盐水，以防止药液残留在针头内及局部静脉中而影响下一种药物的效应。3.实验结束后，必须结扎颈总动脉近心端后再拔除动脉插管。心血管系统的调节1.支配心脏的传出神经为心交感神经和心迷走神经心交感节后神经元末梢释放的递质为去甲肾上腺素，与心肌细胞膜上的β型肾上腺素能受体结合，可导致心率加快，房室交界的传导加快，心房肌和心室肌的收缩能力加强。这些效应分别称为正性变时作用、正性变传导作用和正性变力作用。心迷走神经节后纤维末梢释放的乙酰胆碱作用于心肌细胞膜的M型胆碱能受体，可导致心率减慢，心房肌收缩能力减弱，心房肌不应期缩短，房室传导速度减慢，即具有负性变时、变力和变传导作用。2.心血管系统的反射调节减压反射：动脉血压升高时，压力感受器传入冲动增多，通过中枢机制，使心迷走紧张加强，心交感紧张和交感缩血管紧张减弱，其效应为心率减慢，心输出量减少，外周血管阻力降低，故动脉血压下降。反之，当动脉血压降低时，压力感受器传入冲动减少，使迷走紧张减弱，交感紧张加强，于是心率加快，心输出量增加，外周血管阻力增高，血压回升。3.心血管活动的体液调节肾上腺素可与α和β两类肾上腺素能受体结合。在心脏，肾上腺素与β肾上腺素能受体结合，产生正性变时和变力作用，使心输出量增加。在血管，肾上腺素的作用取决于血管平滑肌上α和β肾上腺素能受体分布的情况。在皮肤、肾、胃肠、血管平滑肌上α肾上腺素能受体在数量上占优势，肾上腺素的作用是使这些器官的血管收缩；在骨骼肌和肝的血管，β肾上腺素能受体占优势，小剂量的肾上腺素常以兴奋β肾上腺素能受体的效应为主，引起血管舒张，大剂量时也兴奋α肾上腺素能受体，引起血管收缩。去甲肾上腺素主要与α肾上腺素能受体结合，也可与心肌的β1肾上腺素能受体结合，但和血管平滑肌的β2肾上腺素能受体结合的能力较弱。静脉注射去甲肾上腺素，可使全身血管广泛收缩，动脉血压升高；血压升高又使压力感受性反射活动加强，压力感受性反射对心脏的效应超过去甲肾上腺素对心脏的直接效应，故心率减慢。