基因工程考试试卷(十三)_基因工程

1基因工程考试试卷（十三）院系生命学院年级专业姓名学号考试课程基因工程题号一二三四五六七八总分(4)用DNA探针进行杂交反应非常敏感并具有选择性，可用来测定某一特定DNA序列在细胞基因组中的拷贝数。()(5)核酸杂交的原理是根据DNA分子间互补。()四、选择题(每题2分，共20分)(1)在长模板链的指导下引物延伸合成长的DNA互补链时应选用()(a)T4DNA聚合酶(b)Klenow酶(c)大肠杆菌DNA聚合酶I(d)T7DNA聚合酶(2)在DNA的酶切反应系统中，通常（）(a)用SSC缓冲液(b)加入Mg2+作辅助因子(c)加入BSA等保护剂(d)上述说法中，有两项是正确的(3)目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是()(a)质粒DNA(b)噬菌体DNA(c)病毒DNA(d)线粒体DNA(4)重组分子的不稳定性表现在()IDNA片段缺失或重排II外源基因整合入受体细胞染色体DNA上III重组质粒丢失(a)I(b)I+II(c)I+III(d)I+II+III(5)Ⅱ型限制性内切核酸酶:()(a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列(b)仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供(c)限制性识别非甲基化的核苷酸序列(d)有外切核酸酶和甲基化酶活性(e)仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供(6)用免疫化学法筛选重组体的原理是()(a)根据外源基因的表达(b)根据载体基因的表达(c)根据mRNA同DNA的杂交(d)根据DNA同DNA的杂交得分一、填空题：（每小题2分，共10分）1、cos位点2、启动子3、转导4、cDNA文库5、感受态细胞二、填空题（每空0.5分，共5分）(1)从细胞或组织中分离DNA时，常用蔗糖溶液，目的是____________________。(2)用碱变性法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以被除去，是因为__________________。(3)CsCl-EB密度梯度离心法纯化质粒DNA的原理是，_________可以较多地插入到___________中。(4)绝大多数质粒DNA是双链环形，具有3种不同的构型：____________________、________________________、________________________。(5)复制子由三部分组成：(1)____________(2)______________(3)________________。三、判断题(每题1分，共5分)(1)所谓引物就是同DNA互补的—小段RNA分子。()(2)最有效的制备纯RNA的方法是让其在细胞中超表达，然后提纯。()(3)外源基因(或DNA片段)插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。()得分：得分：得分：得分：2基因工程考试试卷（十三）院系生命学院年级专业姓名学号考试课程基因工程(7)基因工程中所用的质粒载体人多是改造过的，真正的天然质粒载体很少,在下列载体中只有()被视为用作基因工程载体的天然质粒载体(a)pBR322(b)pSCl01(c)pUBll0(d)pUCl8(8)Southern印迹是用DNA探针检测DNA片断，而Northern印迹则是：（）(a)用RNA探针检测DNA片断(b)用RNA探针检测RNA片断(c)用DNA探针检测RNA片断(d)用DNA探针检测蛋白质片断(9)下列筛选重组体的方法中，不属于遗传学的方法是：()(a)插入失活法(b)显色反应选择法(c)噬菌斑选择法(d)R环分析法(10)末端转移酶是合成酶类，()(a)作用时不需要模板(b)在Co2+的存在下，可以在突出的3'末端延长DNA链(c)在Co2+的存在下，可以在隐蔽的3'末端延长DNA链(d)上述说法有两种是正确的五、简答题(30分)(1)你在做Southern印迹分析，并且刚完成了凝胶电泳这一步，下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶，使DNA变性为单链。为了节省时间，你略过了这一步，直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白。试分析错在哪里?（5分）(2)一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRⅠ消化。消化物与酵母DNA连接后转化对两种抗生素都敏感的E.coli菌株。（1）利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞？（2分）（2）怎样区分接受了插入酵母DNA的质粒的克隆？（3分）(4)简述原核生物基因表达的特点？（6分）(5)列举理想的质粒载体应具备哪些条件？（4分）(3)简述PCR技术的原理及其技术特点？（10分）六、实验成绩(20分)七、平时成绩(10分)得分：得分：得分：