生物制药资料

韶关学院2012—2013学年第二学期期末考试试卷《生物技术制药》（A卷）一．名词解析1、蛋白质药物化学修饰：凡是通过化学基团的引入或除去，而使蛋白质药物分子的共价结构发生改变，都可称为蛋白质药物的化学修饰。有的情况下化学结构的改变并不影响蛋白质的生物学活性(称非必需部分的修饰)；但大多情况下将导致生物活性的改变甚至丧失。2、固定化酶：不溶于水的酶。是用物理的或化学的方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在水不溶性凝胶或半透膜的微囊体中制成的。酶固定化后一般稳定性增加，易从反应系统中分离，且易于控制，能反复多次使用。便于运输和贮存，有利于自动化生产。3、亚单位疫苗：利用微生物的某种表面结构成分（抗原）制成不含有核酸、能诱发机体产生抗体的疫苗。4、人-鼠嵌合抗体：嵌合抗体是最早制备成功的基因工程抗体。它是由鼠源性抗体的V区基因与人抗体的C区基因拼接为嵌合基因，然后插入载体，转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。因其减少了鼠源成分，从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应，并有助于提高疗效。5、生物技术制药：生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液等，综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法进行药物制造的技术。二．单选1、酶的主要来源是A、生物体中分离纯化B、化学合成C、微生物生产D、动/植物细胞与组织培养2、所谓“第三代生物技术”是指A、海洋生物技术B、细胞融合技术C、单克隆技术D、干细胞技术3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：A、大于B、等于C、小于D、无关4、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化5、目前基因治疗最常用的载体是：A、腺病毒B、反转录病毒C、腺相关病毒D、痘苗病毒E、疱疹病毒6、cDNA第一链合成所需的引物是：A、PolyAB、PolyCC、PolyGD、PolyTE、发夹结构7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：订线A、表达产物的功能B、表达产物的产量C.表达产物的稳定性D.表达产物分离纯化的难易9、基因工程药物的化学本质属于：A.糖类B.脂类C.蛋白质和多肽类D.氨基酸类10、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：A、PEG的相对分子量大，促进融合率高B、PEG的浓度高，促进融合率高C、PEG的相对分子量小，促进融合率高D、PEG的最佳相对分子量为400011、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：A、表达产物为糖基化蛋白质B、表达产物存在的部位是在菌体内C、容易培养，产物提纯简单D、表达产物为天然产物12、人类第一个基因工程药物是：A、人胰岛素B、重组链激酶C、促红细胞生成素D、乙型肝炎疫苗13、下列不属于加工改造后的抗体是：A、人-鼠嵌合抗体B、单链抗体C、鼠源性单克隆抗体D、单域抗体14、动物细胞培养的条件中，不正确的是：A.最适pH为7.2-7.4B.最适温度为37±0.50CC.最理想的渗透压为290-300mOsm/kgD.氧浓度为100%15、第三代抗体是指：A、B淋巴细胞合成和分泌的球蛋白B、多发性骨髓瘤细胞产生的免疫球蛋白C、融合细胞产生的单克隆抗体D、利用基因工程技术制备的基因工程抗体16、现代生物技术的标志是：A、DNA互补双螺旋结构模型的提出B、DNA测序技术的诞生C、第一只克隆羊“多莉”的诞生D、人类基因组草图的完成17、获得目的基因最常用的方法是：A、化学合成法B、PCR技术C、逆转录法D、DNA探针技术18、所谓“第二代基因工程”是指A、蛋白质工程B、细胞工程C、酶工程D、抗体工程19、酶和细胞固定化最常用、最有效的方法是：A、载体结合法B、交联法C、包埋法D、选择性热变性法20、真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式表达，下列错误的是：A、基因操作简便B、只能作抗原用C、容易实现高效表达D、易被细菌酶类水解21、目前应用最广泛的产酶菌是：A.大肠杆菌B.枯草杆菌C.青霉菌D.链霉菌22、大肠杆菌的基因表达系统为A、pBV220/pETB、YEp/YRpC、pUC/λgt11D、pBR322/λgt1023、用于生产α-干扰素的动物细胞是A、NamalumNamalwaB、VeroC、WI-38D、MIRC-524、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是A.糖基化B.产量高C.性质稳定D.疗效可靠25、基因表达最常用的宿主菌是A.大肠杆菌B.枯草芽孢杆菌C.链霉菌D.酵母26、筛选杂交瘤细胞（脾-瘤融合细胞）选用的培养基是A、HTB、HATC、RMP1640D、BME27、采用凝胶过滤法分离单克隆抗体，最高峰属于A、IgGB、IgMC、IgAD、IgE28、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是A、降低相对分子量B、增加组织通透性C、降低免疫源性D、延长半衰期29、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体，常用的是A、单域抗体B、单链抗体C、Fab片段抗体D、最小识别单位30、cDNA法获得目的基因的优点是：A.成功率高B.不含内含子C.操作简便D.表达产物可以分泌E.能纠正密码子的偏爱性三、配对选择题（每题只有一个正确答案，备选答案可多次被选，也可不选，1分×10=10分）题[1—4]A、基因工程B、细胞工程C、酶工程D、发酵工程E、生化工程1、生物技术的核心与关键是A2、生物技术的基础是E3、生物技术的条件是B4、生物技术获得最终产物的手段是D题[5—8]菌种选育方式与所得到的菌种类型A、自然选育B、定向培育C、诱变育种5、抗性菌株B6、野生型菌株A7、突变株C8、营养缺陷型菌株C题[9—10]真核基因在大肠杆菌中表达的形式A、非融合蛋白B、融合蛋白C、分泌型表达蛋白D、糖基化蛋白9、只能作抗原用B10、易被蛋白酶水解A四、多项选择题（每题不只一个正确答案，2×10=20分）1、为了提高质粒稳定性，采用的措施有A、选择合适的宿主菌B、采用二阶段培养培养法C、选择合适的载体D、控制培养条件，在培养基中加入选择性压力2、建立最佳的基因表达体系应考虑A.目的基因的表达产量B.表达产物的生物学活性C.表达产物的稳定性D.表达产物分离纯化的难易3、基因工程菌生产发酵的方式有A、分批发酵B、补料－分批发酵C、半连续发酵D、连续发酵4、动物细胞培养时常在培养基中加入小牛血清，其目的是A、提供生长因子和激素B、提供结合蛋白C、提供贴附因子和伸展因子D、提供合适的pH缓冲系统E、提供必要的脂肪酸和微量元素5、酶在医药领域的应用包括A.诊断B.治疗C.药物生产D.分析检测6、提高基因表达产物稳定性的方法有A.组建融合基因产生融合蛋白B.利用大肠杆菌信号肽将产物转移到胞浆周质中C.采用位点特异突变方法改变真核蛋白S-S位置D.采用蛋白酶缺陷型大肠杆菌E.优化基因工程菌培养条件7、影响外源基因在大肠杆菌中表达效率的因素有A、启动子的强弱B、核糖体结合位点的有效性C、SD序列和起始密码的距离D、密码子的组成E、外源基因的拷贝数量8、蛋白质药物化学修饰后的主要特点是：A.循环半衰期延长B.免疫原性降低或消失C、毒副作用降低D、理化稳定性降低E、生物稳定性增强9、菌种的选育方式包括A、自然选育B、诱变育种C、杂交育种D、原生质体融合E、基因重组10、基因载体导入动物细胞常用的方法有A、细胞融合法B、磷酸钙沉淀法C、电穿孔法D、显微注射法E、重组逆转录病毒介导法五、问答题（4题，共25分）1、简述生物药物与生物技术药物的内涵。（5分）生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法，利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。生物药物，包括生物技术药物和原生物制药。生物技术药物：是指采用DNA重组技术或其他创新生物技术生产的治疗药物。细胞因子类药物、激素类药物、酶与辅酶类药物、疫苗、单克隆抗体药物、反义核酸药物、RNA干扰(RNAi)药物、基因治疗药物。生物技术药物学：近代药物学的一个重要分枝，是研究生物技术药物，尤其是基因工程药物和基因药物的一门新型综合学科。主要内容包括生物技术药物的临床前研究与临床评价、生物技术药物的生产工艺与生产管理、生物技术药物的质量控制与安全性评价、各类生物技术药物的来源、结构、性质、作用与用途，比较系统地介绍生物技术药物在疾病防治、诊断有关的基础理论及其临床应用知识。2、简述单克隆抗体的制备。（5分）一．对动物注射特定的抗原蛋白，使其产生免疫反应；提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。二．应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性。三．对杂交瘤细胞进行细胞培养，用特定的选择培养基选出所需要的细胞群，体外或体内培养，从培养液或动物腹水中提取单克隆抗体。3、比较基因工程疫苗与传统疫苗？（5分）传统疫苗是用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂或用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制剂。传统疫苗受制作工艺的限制，其保存、使用和接种副反应等方面都容易出现一些问题。基因工程疫苗指使用重组DNA技术克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原产物，或重组体本身制成的疫苗。基因工程亚单位疫苗优点：①纯度高；产量高，可进行大规模生产。②易制备，可用于病原体难于培养或有潜在致癌性、免疫病理作用的疫苗研究。③安全性好，不具感染性，接种后不会发生急性、持续或潜伏感染。④这种疫苗稳定性好，免疫期长，便于保存和运输；这些疫苗减少或消除了常规活疫苗或死疫苗难以避免的热原、变应原、免疫抑制原和其它有害的反应原。4、如何控制基因工程药物的质量？（10分）①原材料：主要检查目的基因、表达载体及宿主细胞（如细菌、酵母、人和动物的细胞），防止其产生我们不想要的遗传变异。②培养过程：无论是发酵还是细胞生产，关键是保证基因的稳定性和不被污染。主要控制生产用的细胞库、有限代次的生产、连续培养过程。③纯化工艺过程：要求能保证去除微量DNA、糖类、残余宿主蛋白质、纯化过程带入的有害化学物质、致热原，或者将这类杂质减少至允许量。④最终产品：主要表现在生物学效价测定、蛋白质纯度检查、蛋白质的比活性、蛋白质的性质鉴定几个方面。⑤杂质检测：蛋白类，由于降解、聚合或者错误折叠而造成的目的蛋白变构体在体内往往会导致抗体的产生；非蛋白类，主要有细菌、病毒、热原质和DNA几种类型，往往在极低的水平就可产生严重的危害作用。⑥安全性试验：其中的无菌试验、热原试验、安全性和毒性试验按我国新颁布的《中国生物制品规程》进行。1.什么是生物技术?以生命科学为基础，利用生物体（或生物组织、细胞及其组分）的特性和功能，设计构建具有预期性状的新物种或新品系，并与工程相结合进行加工生产，为社会提供商品和服务的综合性技术体系。1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型；基因重组技术、单克隆技术、动/植物细胞培养技术等；是正在发展中的以DNA重组技术为核心的高技术综合体系，是当今国际优先发展的高技术领域之一。1953年Watson&Crick提出DNA双螺旋结构1973年建立DNA重组技术1975年建立单克隆抗体技术1978年大肠杆菌表达出胰岛素1988年PCR方法1997年英国克隆