第九章第二节吩噻嗪类药物-ThemeGalleryP

第九章杂环类药物的分析AnalyticalofHeterocyclicdrugs第二节吩噻嗪类药物NSRR'12345679108吩噻嗪类药物为苯并噻嗪的衍生物，分子结构中均含有硫氮杂蒽母核，基本结构如下：R’:-H、-Cl、-CF3、-COCH3、-SCH2CH3R:具有2～3碳链的二甲或二乙胺基，或含氮杂环如哌嗪和哌啶的衍生物一、主要性质与鉴别1.UV硫氮杂蒽母核为共轭三环的π系统，紫外区三个吸收峰值，约205nm、254nm、300nm，最强多在254nm附近，根据2位、10位取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。当母核的二价硫被氧化为砜或亚砜，则呈现四个峰值。药物溶剂C(μg/ml)λmax(nm)A盐酸氯丙嗪盐酸(9→1000)52540.46306－盐酸异丙嗪盐酸(0.1mol/L)6249－奋乃静无水乙醇72580.65盐酸氟奋乃静盐酸(9→1000)10255－盐酸三氟拉嗪盐酸(1→20)10256－盐酸硫利达嗪乙醇8264与315－2.IR3.氧化呈色硫氮杂蒽母核中的二价硫易氧化，母核易被不同的氧化剂氧化成亚砜、砜等不同的产物，随取代基的不同，呈现不同的颜色。药物硫酸硝酸过氧化氢盐酸氯丙嗪－显红色，渐变为淡黄色－盐酸异丙嗪显樱桃红色，放置后颜色渐变深生成红色沉淀，加热即溶解，溶液由红色转变为橙黄色－奋乃静－－显深红色，放置后红色渐褪去盐酸氟奋乃静显淡红色，温热后变成红褐色－－盐酸三氟拉嗪－生成微带红色的白色沉淀；放置后，红色变深，加热后变黄色－盐酸硫利达嗪显蓝色－－4.金属离子络合显色未氧化的硫可与金属钯离子形成配位化合物，而氧化产物亚砜、砜则不能，可用于鉴别和含有测定，具有专属性。pH2PdCl2R'RNS2Cl-SSPd2+取本品约50mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化钯溶液3ml，既有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。1-二甲氨基-2-氯丙烷5.分解产物特性（如氟奋乃静等含氟有机药物）26rFZ酸性茜素锆试液氟化物二、有关物质鉴别1.盐酸异丙嗪H3CHCCH2O(CH3)2NHH3CHCOHCH2N(CH3)2SOCl2H3CHCClCH2N(CH3)2(Ⅰ)(Ⅱ)H3CHCClCH2N(CH3)2+SHN+CH3SNCH3NH3CCH3SNCH3NH3CCH3,HClNaOHHCl,CH3COCH3H3CHCClCH2N(CH3)2H3CHCCH2N+H3CCH3H3CHCCH+N(CH3)2H2OH3CHCCH2OHN(CH3)2SNH3CNCH3H3C此异构体在丙酮中溶解度大，精制也不易除去。异丙嗪不太稳定，易氧化，贮藏过程可能分解。方法——TLC法以自身高低浓度对照法控制其限量。硅胶GF254展开剂：环已烷-丙酮-二乙胺在紫外灯下检视。注射剂的检查中：采用二个限量的对照溶液规定：供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个；其杂质斑点与对照溶液(2)的主斑点比较，不得更深；如有一个超过，应不深于对照溶液(1)的主斑点。第三节苯并二氮杂卓类药物NNClH3CO1234567892’地西泮(diazepam)七元亚胺内酰胺环NNNNClH3C奥普唑仑HNNOClOH奥沙西泮(Oxazepam)氯氮卓(Chlordiazepoxide)一、鉴别试验(一)化学鉴别试验1.沉淀反应氯氮卓橙红色沉淀阿普唑仑＋KBiI4盐酸氟西泮生成橙红色沉淀氯硝西泮放置后，沉淀颜色变深，因此可以相互区别。阿普唑仑+遇硅钨酸白色沉淀，药典中也用于鉴别。2.水解后呈芳伯胺反应氯氮卓和奥沙西泮的盐酸溶液(1→2)，缓缓加热煮沸，放冷，加亚硝酸钠和碱性β-萘酚试液，生成橙红色沉淀，后者放置后颜色变暗。NNClOHNCH3H+△ONH2ClOHNaNO2ONClNHO3.分解产物的反应有机氯化合物，氧瓶燃烧法破坏，生成HCl，以5%氢氧化钠溶液吸收，硝酸酸化，显氯化物反应。4.硫酸－荧光反应：苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸/稀硫酸在紫外光(365nm)下显不同的颜色。药物硫酸稀硫酸地西泮黄绿色黄色氯氮卓黄色紫色艾司唑仑亮绿色天蓝色硝西泮淡蓝色蓝绿色(二)UV药物溶剂C(μg/ml)λmax(nm)A地西泮0.5%硫酸甲醇溶液5242约0.51282约0.23366－氯氮卓盐酸(9→1000)7245、3080.65阿普唑仑盐酸(9→1000)12264－盐酸氟西泮硫酸甲醇(1→36)10239±2、284±2比值1.95~2.50362±2－氯硝西泮0.5%硫酸甲醇溶液10239±2，307±2－奥沙西泮乙醇10229，315±2(较弱)(三)TLC硅胶G薄层板，苯－丙酮(3:2)为展开剂，稀硫酸喷雾，105℃干燥30min，紫外灯下检视荧光斑点药物Rf值斑点颜色*单一点样混合点样自然光254nm365nm地西泮0.800.78无色黄色(m)黄色(m)氯氮卓0.340.34无色蓝紫色(s)蓝紫色(w)艾司唑仑0.220.20无色灰紫色(m)蓝紫色(m)硝西泮0.720.72黄色紫色(w)紫色(w)奥沙西泮0.490.52黄色亮灰蓝色(s)亮灰蓝色(s)*s,m,w分别表示荧光的强、中、弱二、有关物质检查TLCHPLCGC第六节含量测定•非水溶液滴定法•氧化还原滴定法•酸性染料比色法•紫外分光光度法•气相色谱法•高效液相色谱法•液质联用法溶剂种类使用范围常用溶剂酸性有机弱碱冰醋酸碱性有机弱酸二甲基甲酰胺两性酸/碱甲醇惰性酸/碱甲苯、氯仿、丙酮一、非水溶液滴定法当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml结果HClO4滴定空白试验校正指示剂碱性溶液pKb10，冰醋酸中滴定突跃不明显，需加入醋酐，使碱性增强，突跃更明显问题讨论1.适用范围主要用于Kb＜10-8的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为8～13的弱碱性药物采用本法滴定。Kb为10-8～10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；Kb为10-10～10-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液；Kb＜10-12时，应用醋酐作为溶剂。冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大。咖啡因(pKb=14.2)2.酸根的影响高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2量不足终点不明显，结果偏低。2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2过量(1～3倍)不影响测定结果01010011.01ttNN3.滴定剂的稳定性4.终点指示方法常用电位法和指示剂法应用实例游离弱碱性药物：地西泮、尼克刹米或氯氮卓，基于氮原子的弱碱性可以结晶紫为指示剂，非水溶液直接滴定，终点颜色绿色～蓝绿色～蓝色不等。氢卤酸盐类药物：加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成难电离的卤化汞，再用高氯酸滴定，可用结晶紫、橙黄Ⅳ作为指示剂，或用电位法指示终点。硫酸盐类药物：硫酸为二元酸，但在非水介质中只显示一元酸解离为HSO4-硝酸盐类：滴定反应完全，硝酸破坏指示剂，使用电位滴定法指示终点。磷酸盐类：冰醋酸中酸性极弱，直接滴定。A.硫酸阿托品测定(BH+)2·SO42-+HClO4→(BH+)·ClO4-+(BH+)·HSO4-一元强碱直接滴定冰醋酸、醋酐混合溶剂结晶紫B.硫酸奎宁测定NNH3COHHHCH=CH2HONNH3COHHHCH=CH2HOSO42-+HClO43H+H+NNH3COHHHCH=CH2HONNH3COHHHCH=CH2HO+H+++H+HSO4-ClO4-ClO4-ClO4-二、氧化还原滴定法1.铈量法吩噻嗪类药物－自身颜色的变化NSRNSRNSR-e滴定开始Ce4++++邻二氮菲指示剂(邻二氮菲亚铁盐溶液)Fe(C12H8N2)32+Fe(C12H8N2)33+(还原型)红色(氧化型)浅蓝色电位法、永停法+2Ce(SO4)2OCH3CH3H3COCO2CH3NO2NHNNO2CO2CH3H3COCH3CH3O+6HClO4+2Ce(ClO4)3+4H2SO4硝苯地平2.溴酸钾法OHKBrNKBrO223323323＋＋异烟酸＋异烟肼＋甲基橙三、酸性染料比色法有机相·(BH+In-)水相·(BH+In-)+HInH+In-+BH+BH+UV应用示例氢溴酸东莨菪碱片的含量测定精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液4ml，振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得。影响因素水性最佳pH值：使得BH+和In-最多酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想水分的影响：影响结果，脱水剂或滤纸除去水分酸性染料里面的有色杂质四、UV1.直接紫外测定奥沙西泮原料的测定——229nm采用标准对照法测定。盐酸异丙嗪片的测定——249nm测定A。盐酸异丙嗪注射液的测定——299nm测定A2.萃取后紫外测定碱化，有机溶剂萃取游离型碱，使其与制剂辅料分离，再用分光光度法测定3.萃取-双波长分光光度法碱化，有机溶剂萃取，在254nm、277nm波长处测定吸收，用吸收度之差计算含量，以消除抗氧剂的干扰。4.二阶导数分光光度法5.钯离子比色法吩噻嗪类药物Pd2+pH2.0红色配合物500nm通过空白试验对照法，可选择性地消除吩噻嗪类药物中氧化物的干扰，准确测定未被氧化的吩噻嗪药物的含量。五、GC分离效能好、灵敏度高、选择性好、用量少、分析速度快有机碱或其盐类均可直接GC分析，但盐解离的酸对色谱柱和检测器会损害，因此一般将生物碱盐的水溶液先碱化，用有机溶剂提取游离碱后再分析。六、HPLC固定相：十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）流动相：水－甲醇或水－乙腈系统，极性较强极性较强的组分在分离时先流出柱子，极性较弱的组分后流出柱子，适合于共存组分极性差异较大样品的分析。杂环类药物分析一般加入扫尾剂二乙胺或三乙胺。Ion-PairHPLC测定杂环类药物中吡啶类、喹啉类等药物时，主要采用烷基磺酸盐（如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠）或其他盐类。pH3.5[BH+C7H15SO2O-]BH++C7H15SO2O-影响条件：流动相一般呈酸性，以利于生物碱的离解；离子对试剂的非极性部分越大，形成的离子对分配系数越大，保留时间越长（十二烷基磺酸钠＞庚烷磺酸钠＞戊烷磺酸钠）。