第六章芳酸及其酯类药物的分析

RNH2胺NH2芳胺芳伯氨基2RCOOH羧酸COOH芳酸3第六章芳酸及其酯类药物的分析4常见的芳酸及其酯类药物水杨酸类COOHOH水杨酸（pKa2.98）COOOH水杨酸二乙胺(C2H5)2NH2+5COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）COONaOHNH2对氨基水杨酸钠6双水杨酯COOHOOOH7贝诺酯OCOCH3COONHCOCH38苯甲酸类苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸钠COONa9CH2H2NCOOH氨甲苯酸HOCOOC2H5羟苯乙酯10COOHSO2(CH3CH2CH2)2N丙磺舒（pKa3.4）NH(CH2)3CH3H2NO2SCOOHO布美他尼11其他芳酸类药物ClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯12SO3HOHHOHNC2H5C2H5·酚磺乙胺13第一节结构与性质一、结构分析包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐共同点：苯环、羧基不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）14二、性质（一）物理性质（1）固体：具有一定的熔点（2）溶解性：游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。15（二）化学性质1.芳酸具有游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸。-X、-NO2、-OH、-COOH等吸电子取代基存在使酸性增强16-CH3、-NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强172.芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱，所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。183.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。4.UV195.IR6.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具有芳伯氨基的药物可用重氮化--偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。7.色谱法----制剂分析20第二节鉴别试验一、FeCl3反应具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物紫堇色铁配位化合物～6pH43FeClOHArOHR21直接：水杨酸、对氨基水杨酸钠、双水杨酯、水杨酸二乙胺、酚磺乙胺、对乙酰氨基酚水杨酸ChP（2000）[鉴别]（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。22间接：阿司匹林、贝诺酯水杨酸阿司匹林阿司匹林ChP（2000）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。23赭色苯甲酸（钠）碱性或中性3FeCl米黄色钠盐丙磺舒～30.60.5FeClpHNaOH24二、重氮化----偶合反应芳香第一胺类鉴别反应具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄～猩红色b萘酚OH-NH2R25直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯26三、水解反应醋酸臭气）水杨酸（白色醋酸钠水杨酸钠阿司匹林硫酸CONa3227可溶于醋酸铵（测定熔点），水杨酸白色双水杨酯稀盐酸NaOH试纸变兰色且可使湿润的红色石蕊二乙胺臭气，酚磺乙胺NaOH281.分解产物的反应苯甲酸盐苯甲酸苯甲酸钠42SOH四、特殊反应292.与汞离子及茚三酮反应白色）（氨甲苯酸弱碱性2AcHg蓝紫色茚三酮氨甲苯酸30243SOHNO酚磺乙胺24HNO32SOSONaNaOH3丙磺舒3.氧化反应（含硫的药物）314.异羟肟酸铁反应紫色异羟肟酸铁弱酸性异羟肟酸盐盐酸羟胺氯贝丁酯3FeClNaOH六、IR五、UV32第三节特殊杂质检查一、阿司匹林中水杨酸的检查1.杂质来源原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）332.检查方法对照法反应原理三氯化铁反应限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）。34其他杂质：乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）35二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查1.杂质来源原料残存、脱羧产生2.检查方法ChP（2000）含量测定法（双相滴定法）。36利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚溶于乙醚的性质，使二者分离后，在乙醚中加水适量，用盐酸滴定，控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚限量。USP（24）离子对HPLC法（内标法）37三、双水杨酯中有关物质的检查BP（1998）TLC水杨酸：杂质对照品法有关物质：高低浓度对比法381.杂质对照品法方法：供试品→供试品溶液杂质对照品→对照品溶液39供试品对照品40判断：•供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点。优点：•同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强。缺点：•需要杂质对照品。412.高低浓度对比法方法：对照溶液一定量供试品溶液供试品溶液稀释溶剂溶解S42供试品对照品43判断：①控制杂质斑点个数，控制杂质种类②供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）44•优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液；•缺点：不同物质，不同Rf值比较，准确度差、直观性差。45四、羟苯乙酯中有关物质的检查BP（1998）反相TLC高低浓度对比法46五、酚磺乙胺中氢醌的检查ChP（2000）HPLC法六、氯贝丁酯中对氯酚及挥发性杂质的检查（GC）47第四节含量测定一、中和法1.直接滴定法pKa3～6终点滴定酚酞中性乙醇NaOHsolS48阿司匹林ChP（2000）取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O449COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O50（1）测定方法及计算Ka=3.27×10-4反应摩尔比为1∶1（2）讨论①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言51②优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）③适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定522.水解后剩余滴定法酯的一般含量测定方法阿司匹林53USP（24）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。54COOHOCOCH3+2NaOHCOONaOH+CH3COONa2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：55反应摩尔比为1∶2优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰羟苯乙酯含量测定亦可用此法563.两步滴定法阿司匹林片、阿司匹林肠溶片氯贝丁酯如阿司匹林片的测定：57取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。58COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第一步中和酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH钠盐+H2O59第二步水解后剩余滴定水解：反应摩尔比为1∶1COONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量过量）602NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰剩余滴定：氯贝丁酯：消除供试品中共存的酸性杂质61片剂含量测定结果的计算%100/%100%片）标示量（）平均片重（）供试品重（）测得量（标示量每片含量标示量gggg62剩余滴定法%100%0标示量平均片重）（标示量smFVVT634.双相滴定法芳酸碱金属盐如苯甲酸钠ChP(2000)COONa+HClCOOH+NaCl水—乙醚溶剂：水——乙醚64取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。65乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底，滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。优点：消除了反应产物的干扰665.非水碱量法芳酸碱金属盐冰醋酸作溶剂高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂结晶紫作指示剂指示终点或电位法指示终点676.缩合后酸碱滴定法氨甲苯酸加入甲醛使与氨甲苯酸作用，生成Schiff碱后，用碱液滴定H2O+CH2NH2CCOOHHCHO++H3NCH2COO-68氨甲苯酸取本品约0.3g，精密称定，加水30ml，加热使溶解，放冷，加甲醛与甲酚红指示液，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定至溶液显淡紫色，并将滴定结果用空白试液校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于15.12mg的C8H9NO2。69二、亚硝酸钠滴定法具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物Cl-+22+2+++ArNH2NaNO2HClArNNNaClH2O70三、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法酚磺乙胺注射液ChP（2000）71精密量取本品适量（约相当于酚磺乙胺0.25g），置200ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2m1，置100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。在1cm吸收池中，以溶剂为空白，于305nm的波长处测定吸收度，按C10H17NO5S的吸收系数（）为159计算含量。%11cmE72注射液含量测定结果的计算%100cc%标示实测标示量紫外分光光度法吸收系数法%100100%%11标示标示量cnlEAcm732.过滤后的紫外分光光度法（丙磺舒片）取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200m1量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9→100）4m1，置70℃水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→100）2m1，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（）为338计算。%11cmE74紫外分光光度法吸收系数法%100100%%11标示量平均片重标示量scmmVnlEA753.柱分配色谱--紫外分光光度法USP（24）阿司匹林胶囊可同时定量测定阿司匹林和水杨酸（1）水杨酸的限量测定固定相：FeCl3，SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量（2）含量测定固定相：NaHCO3，AAS、SA保留，冰醋酸洗脱，280nm测总量764