溶出度方法的选择及验证..

溶出度概念与适用范围溶出度方法的建立影响溶出度的因素溶出度的比较问题溶出度概念：指制剂（片剂、胶囊剂或颗粒剂等固体制剂）中有效成分在规定介质中溶出的速度与程度。是反映制剂生物有效性的体外测定方法。适用范围溶解度在微溶以下的药物溶解度虽在略溶以上，但处方与工艺造成阻溶的制剂治疗剂量与中毒剂量接近的制剂缓释制剂、控释制剂、肠溶制剂、透皮贴剂等易溶于水或极易溶于水的药物，也应考察溶出度标准中未列溶出度项：如果全部企业样品均在15分钟内溶出85％以上，则可以不将溶出度列入标准标准中已列溶出度项：不要轻易删除溶出度项体内外相关性溶出度—体外药物指标成分的溶出方法生物利用度—体内血药浓度，尿药浓度法固体制剂固体制剂概念和适用范围溶出度方法的建立影响溶出度的因素溶出度的比较问题中、美、英、日四国药典收录情况药典测定方法中国转篮法、桨法、小杯法美国转篮法、桨法、流池法、往复筒法、圆筒法、桨碟法、往复架法英国欧洲转篮法、桨法、桨碟法、流池法日本转篮法、桨法、流池法凡检查溶出度的制剂，不再进行崩解时限的检查。第一法转篮法第二法搅拌桨法（浆法）第三法小杯搅拌桨法（小杯法）第一法转篮法除另有规定外，量取经脱气处理的溶剂900ml，注入每个操作容器内,加温使溶剂温度保持在37℃±0.5℃，调整转速使其稳定。取供试品6片(个),分别投入6个转篮内，将转篮降入容器中，立即开始计时，除另有规定外，至45分钟时，在规定取样点吸取溶液适量，立即经不大于0.8μm微孔滤膜滤过，自取样至滤过应在30秒钟内完成。取滤液，照各药品项下规定的方法测定，算出每片(个)的溶出量。转篮分篮体与篮轴两部分，均为不锈钢金属材料制成。转篮旋转时，摆动幅度不得超过±1.0mm。适用范围胶囊、丸剂、片剂漂浮的制剂转篮与转轴：不锈钢或其他隋性材料溶出杯：硬质玻璃或其他隋性材料先降转篮，再开电机优点应用广泛装置简单、成熟缺点制剂在篮中的位置对测定有影响篮下流体力学死区逸出气体对测定有影响粘性物质易堵塞网孔自动化比较困难第二法搅拌桨法溶剂处理同第一法。取供试品6片(个),分别投入6个操作容器内，立即启动旋转并开始计时，其它同第一法测定。用于胶囊剂测定时，如胶囊上浮，可用一小段耐腐蚀的金属线轻绕于胶囊外壳或装入沉降篮(呈圆柱形，内径为12mm，长25mm，由10根不锈钢丝(丝径为1mm±0.1mm)焊接而成。周围以间隔为3.5mm的不锈钢丝螺旋缠绕，上下两端以2根不锈钢丝十字形固定，一端可开关。首选方法先降浆，再投药，后开电机适用范围片剂、胶囊、丸剂优点广泛应用，适用性强易于自动化缺点流体动力学复杂，制剂在杯中的位置（下沉或漂浮）影响药物溶出桨底易形成“锥形堆积”漂浮制剂不适用对搅拌桨和溶出杯几何尺寸的精度要求较高，搅拌轴方向的微小改变会引起溶出结果的明显偏离由不锈钢金属材料制成。旋转时摆动幅度A、B不得超过±0.5mm。第三法小杯搅拌桨法除另有规定外，量取经脱气处理的溶剂100～250ml注入每个操作容器内，以下操作同第二法。适用范围小剂量的片剂、胶囊、丸剂仅供UV—VIS测定HPLC测定应采用篮法或桨法流池法桨碟法方法建立过程1、明确溶出度的目的2、主药和辅料性质3、溶出介质的选择4、溶出仪器的选择5、转速的选择6、方法学的验证7、溶出曲线的绘制1、确定测定溶出度的目的仿制：与被仿药物一致创制：明确期望的溶出速率急救药：数分钟内迅速溶出，如：硝酸甘油片抗生素：根据抗生素后效应，采用脉冲给药，快速溶出，使血药浓度迅速达MIC或MBC，减少不良反应，减少微生物变异；如：β-内酰胺类、大环内酯类、氟喹诺酮类抗生素一般不推荐缓释剂型普通降血压、降糖制剂：先快速，后中低速治疗慢性病的药物：慢速、恒速缓释剂型：先快速，后恒速1、确定测定溶出度的目的确定溶出条件仿制：与被仿药物标准一致创制：研究选择方法溶出条件、介质、含量测定方法……结果分析仿制：溶出曲线比较创制：确定取样点数、取样时间与溶出限度，进行体内外相关研究2、主药和辅料性质一是药物在不同pH条件下的溶解度，或在不同介质中的溶解度，二是药物在溶液状态下的药物的稳定性2、主药和辅料性质漏槽条件漏槽条件是指药物所处释放介质的浓度远小于其饱和浓度，一般释放介质的体积为药物饱和溶液所需介质体积的3～7倍。漏槽条件即做溶出的最佳条件3、溶出介质的选择溶出介质的选择部分是根据药物溶解度和制剂规格确定的，以保证符合漏槽条件溶出介质首选水，其次是0.1mol/L盐酸、缓冲液（pH值3～8）、人工胃液或人工肠液；若介质中加适量有机溶剂如异丙醇、乙醇或加分散助溶剂如十二烷基硫酸钠（0.5%以下）等，应有文献依据，并尽量选用低浓度。3、溶出介质的选择对于普通口服制剂的溶出行为考察需在pH1.2~6.8范围内进行。在方法的建立阶段，尚有必要对溶出前后的pH是否发生变化进行检查。对于药物可以在胃部快速溶解和通透性高的，胃排空时间可能是吸收的限速步骤，对于这类药物，溶出度检查主要是证明药物在胃液条件下可以快速溶出。对于药物主要在肠道溶出的，如难溶性药物、弱酸，选择较高的pH范围（如pH6.8的人工肠液）可能是适宜的介质。水——最常用，良好脱气水的pH值为5.0～7.0适用于溶解度对pH值不敏感的药物盐酸溶液——模拟酸性胃液的介质适用于酸中稳定的药物浓度一般为0.1～0.01mol/L，pH值一般为1.0～2.2醋酸盐缓冲液——模拟中等酸性胃液的介质浓度一般为0.05mol/L，pH值一般为3.4～6.0醋酸易挥发，导致pH值变化，溶出速率变化、测定时间长的药物不宜采用醋酸盐缓冲液作介质磷酸盐缓冲液(PBS)——模拟中等酸性至弱碱性胃液或肠液的介质浓度一般为0.05mol/L，pH值一般为4.5～7.6介质的pH值原则：根据体内吸收部位的pH值环境药物溶解度对pH值的敏感性药物的稳定性来选择介质的pH值胃的pH值范围：1.2～7.6十二指肠为3.1～6.8小肠为5.2～6.0胃内快速溶解并快速吸收的药物，选择低pH值，如盐酸溶液肠道溶出的药物，一般选择较高pH值，如pH值6.8的PBS介质的pH值介质的pH值一般不超过7.6如需使用更高pH值的介质，则应进行验证，证明其体内外溶出的相关性肠溶制剂：建议先用酸性介质，然后添加适宜温度的缓冲溶液，再用酸或碱调节至所需的pH值该法的优点是操作简便、易于自动化，但应注意调节pH值时产生热对介质温度的影响表面活性剂不建议添加表面活性剂必须加时：一般应≤0.5％常用的表面活性剂：聚山梨酯20～80、十二烷基硫酸钠等推荐：聚山梨酯20～80，表面活性类似胃液日本：表面活性剂只允许使用吐温，不得用有机溶剂3、溶出介质的选择大杯法（第一、二法）常用体积为500～1000ml小杯法（第三法）常用体积为100～250ml4、溶出仪器的选择转篮法常用于胶囊，也可用于片剂；桨法常用于片剂，也可用于胶囊；对于小规格制剂的溶出度检查，可考虑选用小杯法，介质体积可选择200ml；对于片剂或胶囊溶出过程中转篮筛网被堵塞的，溶出度检查建议改为桨法；漂浮的制剂选转篮法。5、转速的选择各国药典中收载的溶出度测定方法中的转速，大部分在50～100转/分。转篮法以100转/分为主；桨法以50转/分为主，小杯法以35转/分为主。转篮法100转/分≌桨法50转/分≌小杯法35转/分6、方法学验证内容溶出度测定常同含量测定，采用HPLC、UV方法。以下情况需重新方法学验证测定所用的溶剂（溶出介质）不一致测定浓度与不一致测定制剂为胶囊剂或需去除糖衣、薄膜衣后测定含量的片剂，则均需重新进行溶出度测定方法验证。6、方法学验证内容回收率精密度专属性（辅料、胶囊壳等的干扰试验）线性耐用性6、方法学验证内容回收率（范围不同于含量测定法）高、中、低常设为50％、限度浓度、100％6、方法学验证内容专属性——胶囊壳干扰UV法，如空胶囊干扰大于标示量的25%，实验无效，如干扰不大于标示量的2%,可忽略不计。取6粒空白胶囊壳进行试验，工作量大，且由于干扰不一，会给测定结果带来误差。故空胶囊干扰较大时，采用HPLC法测定。7、溶出曲线的绘制均一性试验（考察同一批样品的溶出曲线）重现性试验（考察至少3批样品的溶出曲线）可间隔15分钟取样，或间隔5或10分钟取样，以产生足够的样本量，直至药物溶出85%以上或达到溶出平台，得到完整的溶出曲线溶出曲线02040608010012001020304050时间（min）溶出度（%）系列1系列2系列3系列4系列5系列6溶出曲线010203040506070809010001020304050时间（min）溶出度（%）水0.1NHClpH=4.5缓冲液pH=6.8缓冲液7、溶出曲线的绘制对于溶出度检查10min或更靠前的时间点的各溶出数据的RSD大于20％，以及在其后的时间点的溶出数据RSD大于10％，溶出结果就可以被认为具有高度变异性。溶出结果的高度变异性使得处方、工艺等变化对制剂质量的影响无法进行测定和评估。产生这种变异的原因可能有两种，一是制剂处方自身的原因，二是与溶出度检查方法有关的原因，如直接崩解后形成堆积物或片剂黏附于容器壁上等。释放度缓释制剂、控释制剂——第一法3个取样点取样后补充相同体积液体释放度因为人体整个胃肠道系统pH值的复杂多变性，故对一种缓释产品或两种缓释产品进行体外释放行为的评价时,需采用三种以上不同pH值介质，常选用的pH介质为pH1.0、pH5.4、pH6.0和pH7.4。硝酸异山梨酯缓释胶囊的限度本品每粒在0.5小时、2小时和8小时时的释放量应分别为标示量的30%以下、30%~65%和70%以上。释放度肠溶制剂——第二法酸中释放量缓冲液中释放量有些需测耐酸力概念和适用范围溶出度方法的建立影响溶出度的因素溶出度的比较问题影响溶出度测定的因素1.仪器因素1.1仪器的工作环境环境温度、气流、强光处理方法：置无强光照射、气流稳定的位置振动振动的能量使样品溶出速率增加振动频率50～100Hz时，影响较大当仪器振动位移为0.025毫米时，溶出增加5～10％处理方法：远离振动源、底脚加减振海绵或橡胶隔垫影响溶出度测定的因素1.仪器因素转轴的晃动篮法：晃动在2.0～5.0mm时，水杨酸和泼尼松校正片溶出比晃动在2.0mm时增加5％桨法：晃动在1.0～2.0mm时，水杨酸和泼尼松校正片溶出比晃动在0.5mm时增加8％和5％处理方法：检测转轴杆的准直度转轴杆实行双点固定转轴杆应垂直挂放，不得横放，防止变形影响溶出度测定的因素1.仪器因素仪器的水平度、转杆的垂直度杯边高1mm，溶出量增加约3%转杆倾斜2～5°，溶出量增大2～25%处理方法：用水平尺调正杯板水平；用直角尺验证转杆与杯板垂直度转杆与溶出杯中心度中心偏离1mm，溶出量约增加3%偏离2mm，约增加8%处理方法：用中心盘调正转杆与溶出杯的中心影响溶出度测定的因素1.仪器因素搅拌速度速度快——溶出快允差±4％转杆、桨叶、网篮的溶出干扰桨杆、叶、篮在介质中溶出，带来低波长（200-230nm）处的吸收干扰处理方法：镀钛，316L不锈钢，涂膜影响溶出度测定的因素1.仪器因素篮轴盘排气孔无法排气，使溶出量大幅下降处理方法：确保篮轴盘小孔通畅；转篮旋转着进入溶出介质；清洗篮轴盘：用10%稀硝酸煮沸或超声10分钟左右，再改用水或乙醇煮沸（应在水浴中）10～15分钟左右转篮干湿的影响湿的篮体会使供试品提前接触到溶出介质，可能使溶出增加处理方法：2005年版药典专门增加规定：用干燥的转篮，这在连续测定多批样品时应引起注意影响溶出度测定的因素2.介质的影响介质的pH值影响药物的溶出度影响药物的吸收系数影