化验员基础培训

化验员基础知识培训主讲：李明清第十三章红外光谱分析法第一节光学分析方法概况及基本原理第二节比色法与分光光度法第三节比色条件选择第四节分光光度法应用第一节光学分析方法概况及基本原理一、光学分析仪器的基本组成比色法与紫外可见分光光度法信号发生器检测系统信号处理系统信号读出系统计算机控制系统1、信号发生器：将被测物质的某一物理或化学性质转变为分析信号；2、检测系统：对产生的分析信号进行检测，并将其转变为易于测量的信号；3、信号处理系统：将信号放大、平滑、滤波、加和差减、调频、调幅等；4、信号读出系统：将信号处理系统输出的信号，记录或显示出来；5、计算机控制系统：控制、监测与校正、采集和处理、数据储存与分析等。比色法与紫外可见分光光度法•无论物质有无颜色，当光线通过其溶液时，会有选择地吸收一定波长的光；•溶液浓度越大，对特定波长的光的吸收程度也越大；•根据溶液对光的吸收程度确定溶液的浓度，进而确定被测组分的含量比色法与紫外可见分光光度法二、物质的吸光光度法（分光光度法）四、光的吸收定律比色法与紫外可见分光光度法•当一束单色光通过均匀溶液时，其溶液的吸光度与溶液中吸光物质的浓度和液层厚度的乘积成正比，即：A＝lg＝lg＝kbc式中：k－比例常数；I0，I－入射光的强度，透过光的强度；b－液层厚度；c－溶液浓度；T－透光率（度），T＝I/I0；A－溶液的吸光度。0IIT1五、光吸收定律的适用要求：1、光吸收定律只适用单色光；2、光吸收定律有其适用的浓度范围；3、被测溶液必须是均匀的。比色法与紫外可见分光光度法第二节比色法与分光光度法比色法与紫外可见分光光度法一、比色法•以显色反应为基础，通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量。•显色反应的基本要求是：反应具有较高的灵敏度和选择性，生成的有色化合物组成恒定且较稳定，与显色剂的颜色差别较大。显色测定比色法与紫外可见分光光度法二、分光光度法比色法与紫外可见分光光度法分光光度计的基本结构：光源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录。721型分光光度计示意图比色法与紫外可见分光光度法三、分光光度计实验室基本要求•室温：20±2℃；•温度：45%～65%，不超过85%；•防震和防电磁干扰；•防腐性。比色法与紫外可见分光光度法四、分光光度计的保养和维护•光源部件：不工作不开灯、及时更换，并调好光路上的透镜和反射镜位置；•单色器不宜拆开，注意防潮；•吸收池用后冲洗干净；•光电器件应避免强光照射或受潮积尘；•保持光源及检测系统的电压稳定性。比色法与紫外可见分光光度法第三节比色条件的选择比色法与紫外可见分光光度法一、入射光波长的选择•“最大吸收原则”和“吸收较大，干扰较小原则”。二、测定狭缝宽度的选择•不减小吸光度时的最大狭缝宽度。三、参比溶液的选择溶剂空白、试样空白、试剂空白、褪色空白。四、吸光度读数范围的选择•最好在0.2～0.7之间；•调节溶液的浓度；•改变液槽厚度。比色法与紫外可见分光光度法五、显色剂的选择•显色反应灵敏度高；•显色剂选择性好；•显色剂对照性高；•反应产物的组成恒定；•显色的产物稳定；•显色反应条件易控制。比色法与紫外可见分光光度法六、显色反应条件的选择•显色剂的浓度及用量；•溶液的酸度；•显色温度、显色时间、显色溶剂；•溶液中共存物的干扰及其消除。七、溶剂的选择•低极性溶液、稳定性、无明显吸收。比色法与紫外可见分光光度法第四节分光光度法的应用比色法与紫外可见分光光度法定性分析纯度检查未知物鉴定功能团推测同分异构体判别定量分析单组分多组分比色法与紫外可见分光光度法常见无机元素分光光度法条件及参数元素显色剂最大波长/nm测定范围Μg/mL条件Al二甲酚橙5360.1－1pH＝3.4铬天青S567.50.04－1.4pH=4-6Ca钙色素5200.1－4pH12Cl铬酸银4055－80pH=6－7，间接滴定Fe邻二氮菲5080.25－2.5pH=2－9，盐酸羟胺、柠檬酸Li钍试剂4800.1－10.4%氢氧化钾、丙酮存在比色法与紫外可见分光光度法【例】GB/T11064.7－2013《碳酸锂、单水氢氧化锂、氯化锂化学分析方法第7部分：铁量的测定邻二氮杂菲分光光度法》•1、方法提要试样以盐酸分解。用抗坏血酸使铁（Ⅲ）还原成铁（Ⅱ），在pH3.5乙酸盐缓冲介质中，铁（Ⅱ）与邻二氮杂菲形成橙红色络合物。于分光光度计波长510nm处测量其吸光度比色法与紫外可见分光光度法•2、试剂2.1盐酸（1+1），优级纯。氢氧化钾。2.2盐酸（1+7），优级纯。无水乙醇。2.3盐酸（2+1），优级纯。2.4氨水（1+1），优级纯。2.5抗坏血酸溶液（25g/L）：用时配制。氢氧化铵（1+1）。2.6邻二氮杂菲溶液（2g/L）：称取0.2g邻二氮杂菲，溶于100mL乙醇溶液（1+1）中。2.7乙酸－乙酸钠缓冲溶液（pH3.5）：称取16g无水乙酸钠，于500mL烧杯中，用水溶解，加入170mL冰乙酸，移入1000mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。2.8对硝基酚指示液（2g/L）：用乙醇配制。比色法与紫外可见分光光度法2.9铁标准贮存溶液：称取0.1430g预先在105℃～110℃烘2h并冷却至室温的三氧化二铁[ω（Fe2O3）≥99.9%]，置于200mL烧杯中。加入20mL盐酸（2.1），低温加热至完全溶解，冷至，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液1mL含100μg铁。2.10铁标准溶液：移取50.00mL铁标准贮存溶液（2.9），置于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液1mL含10μg三氧化二铁。比色法与紫外可见分光光度法•3、仪器分光光度计。•4、试样4.1碳酸锂、氯化锂预先在250℃～260℃烘2h，置于干燥器中冷至室温。4.2单水氢氧化锂试样应装满于塑料器具中，密封贮存。比色法与紫外可见分光光度法•5、分析步骤5.1试料：称取5.00g试样，精确到0.0001g。5.2测定数量：独立地进行两次测定，取其平均值。5.3空白试验：随同试料做空白试验，加入与分解试样等量的酸，在低温下蒸发至近干。5.4测定5.4.1将试料（5.1）置于200mL烧杯中，用少量水润湿，盖上表面皿。碳酸锂试料缓慢加入18mL盐酸（2.3），单水氢氧化锂试料加入16mL盐酸（2.3），氯化锂试料加入少量水和1mL盐酸（2.3），低温加热至微沸使完全溶解，冷却至室温，按表1移入容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。静置澄清。比色法与紫外可见分光光度法5.4.2按表1分取上层清液（5.4.1），置于25mL容量瓶中，以水稀释至约10mL，加2滴盐酸（2.1）。铁的质量分数/%容量瓶/mL分取试液（5.3.1）体积/mL0.0003～0.0025010.000.002～0.005505.000.005～0.0101005.000.010～0.0302505.00表1比色法与紫外可见分光光度法5.4.3加入1mL抗坏血酸溶液（2.5），摇匀。加入1滴对硝基酚指示剂（2.8），以氨水（2.4）中和至试液呈黄色，再以盐酸（2.2）中和至黄色刚好消失，加入2.5mL缓冲液（2.7），混匀。加入1.5mL邻二氮杂菲溶液（2.6），以水稀释至刻度，摇匀，放置15min。5.4.4将部分溶液（5.4.3）移入3cm比色皿中，以水做参比，于分光光度计波长510nm处测量其吸光度。5.4.5减去随同试料的空白溶液吸光度，从工作曲线上查出相应的铁量。比色法与紫外可见分光光度法5.5工作曲线的绘制5.5.1移取0mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL铁标准溶液（2.10），分别置于一组25mL容量瓶中，以水稀释至10mL，加入2滴盐酸（2.1），以下按5.4.3进行。5.5.2将部分溶液（5.5.1）移入3cm比色皿中，以水为参比，于分光光度计波长510nm处测量其吸光度。减去试剂空白的吸光度后，以铁量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制工作曲线。比色法与紫外可见分光光度法•6、分析结果的计算铁的含量以质量分数ω（Fe）计，数值以%表示，按下式计算：ω（Fe）＝×100式中：m1―从工作曲线上查得的试液中的铁量，（μg）；m0―从工作曲线上查得空白溶液中的铁量，（μg）；m―试料的质量，（g）；V0―试液的总体积，（mL）；V1―移取试液的体积，（mL）。所得结果应表示至两位小数，小于0.1%时表示至三位小数，小于0.01%时表示至四位小数。1600110)(mVVmm谢谢！