药物分析06第六章芳酸及其酯类药物的分析

中国药科大学药物分析教研室第六章芳酸及其酯类药物的分析AnalysisofAromaticcarboxylicacids&esters中国药科大学药物分析教研室Contents4Chemicalstructure&feature123IdentificationDetectionofspecificimpuritiesAssay中国药科大学药物分析教研室第一节水杨酸类1阿司匹林aspirin2对氨基水杨酸钠PAS-Na3双水杨酯salsalate4COOHOR贝诺酯benorilate水杨酸SAsalicylicacid中国药科大学药物分析教研室结构式阿司匹林aspirinCOOHOCOCH3对氨基水杨酸钠PAS-NaCOONaOHNH2双水杨酯salsalateCOOHOCOOH贝诺酯benorilateOCOCH3COONHCOCH3中国药科大学药物分析教研室1.苯甲酸钠sodiumbenzoate2.甲芬那酸mefenamicacid3.羟苯乙酯ethylparoben4.丙磺舒probenecid第二节苯甲酸类苯甲酸benzoicacidCOOHRR'中国药科大学药物分析教研室结构式HOCOOC2H5羟苯乙酯ethylparoben甲芬那酸mefenamicacidCOOHNHHCH3CH3COONa苯甲酸钠sodiumbenzoateCOOH(CH3CH2CH2)2NSO2丙磺舒probenecid中国药科大学药物分析教研室第三节其他芳酸类12氯贝丁酯clofibrate布洛芬ibuprofenCOOHR'R''R其他芳酸类中国药科大学药物分析教研室结构式ClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯clofibrate布洛芬ibuprofenCHCH2CHCH3CH3COOHCH3中国药科大学药物分析教研室特点1234均有苯环、羧酸或其酯水杨酸类和苯甲酸类结构中的羧基直接与苯环相连除了酸性基团外，各自具有本身的官能团分子中苯环、羧酸和取代基的相互影响，使芳酸的酸性强度各有不同中国药科大学药物分析教研室COO-COO-OHCOO-SO2N(C3H7)2OCOO23FeFe紫堇色COOOOCFe3(OH)26赭色↓COO(C3H7)2NSO23Fe米黄色↓pH5.0~6.0T.S.FeCl3pH4~6中性溶液三氯化铁反应鉴别中国药科大学药物分析教研室RCNOOHFe/3Fe3+紫色RCNOOHHH2NOHNNNHOCHNCNN(DCC)RCOHORCOOCNNNNH布洛芬NHCNOCRO中国药科大学药物分析教研室⊙重氮化偶合反应具体方法见芳香胺类药物的鉴别⊙氧化反应⊙异羟肟酸铁反应甲芬那酸＋H2SO4深蓝色(O)K2Cr2O7△黄色并产生绿色荧光中国药科大学药物分析教研室ClOCCH3CH3COOC2H5+NH2OHHCl+2KOHClOCCH3CH3CONHOK+C2H5OH+H2O+KClFe3+H+ClOCCH3CH3CONHOFe/3紫色中国药科大学药物分析教研室⊙水解产物的反应HOOCSO2N(CH2CH2CH3)2NaOHONa+CO2+Na2SO3+HNC3H7C3H7HNO3Na2SO4⊙分解产物的反应⊙UV特征吸收⊙IR吸收光谱中国药科大学药物分析教研室特殊杂质的由来与方法检查AcetylSalicylicAcidONaCO2加压，ONaCOONaOHCOOHH+OH-CO2副产物SACOOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,70~75C。ASA⊙Aspirin生产工艺中国药科大学药物分析教研室SA炽灼残渣苯酚易碳化物溶液的澄清度重金属Aspirin⊙Aspirin中国药科大学药物分析教研室⊙PAS-Na间氨基酚Ch.P样品3.0g用乙醚提取，加入H2O，用HCl滴定液（0.02mol/L)滴定，生成杂质·HCl（转溶入H2O相，甲基橙指示剂）。滴定液不得过0.30mlUSPHPLC法C18NaH2PO4(0.05mol/L)-Na2HPO4(0.05mol/L)-CH3OH(含氢氧化四丁基铵1.9g)(425：425：150)254nm检测内标：磺胺中国药科大学药物分析教研室供试品自身对照法BP（1998）反相TLC高低浓度对比法取羟苯乙酯丙酮液1.0%和0.01%，2ul，254nm查荧光，前一个任何第二个斑点的大小和强度不应超过后一个。⊙羟苯乙酯供试品对照品中国药科大学药物分析教研室⊙氯贝丁酯对氯酚（0.0025%）挥发性杂质（0.5%）GC法5%SE-302m160℃，N2FID杂质以归一化法求得中国药科大学药物分析教研室含量测定⊙酸碱滴定法Acid-basetitrationmethod以ASA及其制剂为例苯甲酸pKa4.20水杨酸pKa2.98酸性较强COHOHO羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性增加；并有氢键，更增加了其极性因此，可采取直接滴定法中国药科大学药物分析教研室直接滴定法pKa3~6的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定pKa6~9的药物要用非水溶液滴定法中性乙醇COOHOCOCH3NaOH20℃以下COONaOCOCH3H2O中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性，可消除滴定误差乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定过程易水解本法特点：简单注意点：若SA不合格，不宜采用本法Aspirin丙磺舒(Ch.P.BP.JP等)苯甲酸(Ch.P等)均采用本法中国药科大学药物分析教研室水解后剩余滴定法ResidualtitrationafterhydrolysisUSP23方法：取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOHH2SO4Na2SO42H2O中国药科大学药物分析教研室两步滴定法Two-steptitration用于Aspirin片测定片剂中有稳定剂水解产物水杨酸SAHAcHOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸橼酸CitricacidHOCHCOOHCHCOOHHO酒石酸Trataricacid为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴定法中国药科大学药物分析教研室第二步COONaOCOCH3NaOHCOONaOHNaAcH2O2NaOHH2SO4Na2SO42H2O第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc中国药科大学药物分析教研室⊙双相滴定法TitrimetryintwophasesCh.P2005用于苯甲酸钠的测定苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法HCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸钠)0.5mol/L25ml1.5g50ml2d甲基橙橙红色中国药科大学药物分析教研室⊙柱分配色谱-紫外分光光度法ColumnPartitionChromatogr.ASAcapsule等制剂除用上述两步滴定法外，最好用色谱法，可以分离酸性杂质和辅料以及稳定剂等，经分离后同时测定ASA与SA如USP用柱分配色谱-UV测定ASACapsule中国药科大学药物分析教研室ColumnPartitionChromatography,CPC200~300mm60mm4mm22mm层析柱玻棉压榨棒350mm21mm中国药科大学药物分析教研室阿司匹林栓Aspirinsuppositories测定法咖啡因乙醇溶液4mg/ml对照品溶液：ASA对照品(约0.15g)50.0ml内标5.0ml供试品溶液：取本品5粒，精密称定()，40~50℃微温熔融，不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量(ASA约0.15g)(W)W内标5.0ml50.0ml乙醇50.0ml2.0ml↓2.0ml乙醇50.0ml⊙HPLC中国药科大学药物分析教研室C18甲醇-水-正丁醇(30:20:1)237nm内标：苯甲酸色谱条件血清样品的处理HPLC图血清中ASA&SA的测定血清样品100μl→加入HClO4(30%)50μl、不同浓度ASA&SA对照品稀释液、内标(各浓度均为10μg/ml→混合2min→离心→进样10320.溶剂峰1.ASA2.内标物3.SA