利用免疫学进行防治和诊断方法

第九章免疫学应用第一节免疫学防治一、免疫学预防二、免疫学治疗第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测二、体内免疫学检测第一节免疫学防治一、免疫学预防（一）人工自动免疫：是给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，剌激机体产生特异性免疫力。1、死疫苗：用物理或化学的方法将病原微生物杀死制备而成的制剂。又称灭活疫苗。2、活疫苗：用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂。又称减毒活疫苗。3、类毒素：用0.3-0.4%甲醛处理外毒素，使其失去毒性，保留抗原性的物质。4、新型疫苗：亚单位疫苗、合成疫苗、基因工程疫苗第一节免疫学防治死疫苗和活疫苗的比较区别点死疫苗活疫苗制剂特点死、强毒株活、弱毒或无毒接种剂量及次数较多，2-3次较少，1次副作用较大较小保存及有效期易保存，1年不易保存4℃数周免疫效果较差，维持数月至2年较好，维持3-5年或更长第一节免疫学防治一、免疫学预防（二）人工自动免疫的注意事项1、接种对象：免疫力差、流行地区的易感者等；2、接种剂量、次数和间隔时间：死疫苗2-3次，间隔7-10天；活疫苗1次；类毒素2次，间隔4-6周。3、接种途径：死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮内注射、皮上划痕或以自然感染途径接种。4、接种后反应：接种24小时左右局部出现红肿、疼痛、淋巴结肿大；短暂发热、头痛、恶心等，一般症状轻微，数天恢复正常。5、禁忌症：高热、严重心、肝、肾疾病、传染病、恶性肿瘤、孕妇等。第一节免疫学防治我国推行的儿童基础免疫程序年龄疫苗年龄疫苗出生时卡介苗、乙肝疫苗8个月麻疹疫苗2个月三价脊髓灰质炎疫苗11.5-2岁百白破43个月三价脊髓灰质炎疫苗2，百白破14岁三价脊髓灰质炎疫苗44个月三价脊髓灰质炎疫苗3，百白破27岁卡介苗、麻疹疫苗、白破二联疫苗5个月百白破312岁卡介苗（农村）第一节免疫学防治二、免疫学治疗（一）人工被动免疫：是给机体输入抗体，使机体获得特异性免疫力。可立即获得，但免疫维持时间短，2-3周，多用于治疗或紧急预防。1、抗毒素：是抗细菌外毒素的抗体。多为马血清制剂，具有抗体性和免疫原性。2、人丙种球蛋白：从正常人血浆或健康产妇胎盘中提取制成。3、人特异性免疫球蛋白：来源于恢复期病人及含高价特异性抗体供血者血浆，或接受类毒素和疫苗免疫者的血浆。第一节免疫学防治人工自动免疫和人工被动免疫的特点项目人工自动免疫人工被动免疫输入物质抗原抗体产生免疫力时间慢（2-3周）快（输注即生效）免疫力维持时间数月至数年2-3周主要用途预防治疗或紧急预防第一节免疫学防治二、免疫学治疗（二）免疫增强剂（IPA）：是增强、促进和调节机体免疫功能的生物或非生物制剂。主要用于恶性肿瘤、免疫缺陷病和传染病的辅助治疗。免疫增强剂分类分类举例细胞因子制剂IL-2、TNF、IFN微生物制剂卡介苗、短小棒状杆菌、脂磷壁酸化学药物左旋咪唑、西咪替丁多糖类制剂茯苓多糖、人参多糖第一节免疫学防治（三）过继免疫：是将供者的淋巴细胞或淋巴因子转移给受者，以增强其细胞免疫功能。（四）免疫抑制剂：是一类抑制机体免疫功能的生物或非生物制剂。常见免疫抑制剂种类分类举例抗生素环孢霉素A、FK-506单克隆抗体制剂抗TC及亚群、抗MHC、抗IL和IL受体激素肾上腺皮质类固醇烷化剂环磷酰胺抗代谢药硫唑嘌呤、5-氟尿嘧啶第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测（一）体液免疫检测（血清学反应）1、抗原抗体反应的特点：特异性可逆性比例性阶段性第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测1、抗原抗体反应的特点：抗体过剩比例适当抗原过剩抗原抗体的比例与其形成免疫复合物大小的关系第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测2、常见的体液免疫检测法：（1）凝集反应：间接凝集和间接凝集抑制试验第二节免疫学诊断（2）沉淀反应：单向琼脂扩散试验第二节免疫学诊断（2）沉淀反应：双向琼脂扩散试验第二节免疫学诊断（2）沉淀反应：对流免疫电泳-+第二节免疫学诊断（3）补体结合反应：补体结合反应第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测3、免疫标记技术：——免疫荧光技术免疫荧光直接法免疫荧光间接法第二节免疫学诊断3、免疫标记技术：——免疫酶技术1、包被抗体洗2、加抗原洗3、加酶标抗体洗4、加底物显色1、包被抗原洗2、加抗体洗3、加酶标抗球蛋白洗4、加底物显色ELISA双抗体夹心法ELISA间接法第二节免疫学诊断3、免疫标记技术：——放射免疫测定法（RIA）放射免疫测定法（RIA）是将放射性核素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫标记技术。3、免疫标记技术：——金免疫技术金免疫技术是一处以胶体金作为标记物的免疫标记技术。是目前应用广泛、简便、快速的检验方法。第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测（二）细胞免疫检测——T细胞总数测定（1）E花环试验：正常情况下，外周血淋巴细胞中能形成花环的细胞（即T细胞）约70%-80%。第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测（二）细胞免疫检测——T细胞总数测定（2）荧光抗体染色从外周血分离单个核细胞（PBM）后，用鼠抗人CD3的单克隆抗作第一抗体与PBM结合，再用荧光素（FITC）标记的兔抗鼠IgG抗体作第二抗体进行间接荧光染色。第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测（二）细胞免疫检测——T细胞亚群测定用间接荧光法检测CD4和CD8T细胞CD4/CD8正常比值为1.7-2.0左右。第二节免疫学诊断一、体外免疫学检测（二）细胞免疫检测——淋巴细胞转化试验第二节免疫学诊断二、体内免疫学检测（一）体液免疫检测1、I型超敏反应皮肤试验用常见变应原作皮内注射或划痕后，在20分钟内引起红斑及丘疹。如超过1cm或无红肿但注射处有痒感，或全身有不适反应者均为阳性，反之为阴性。2、中和反应皮肤试验将微量外毒素注射于受试者前臂屈侧皮内，24-48小时局部出现皮肤红肿者为阳性反应，表示无免疫力。阴性反应为有免疫力。第二节免疫学诊断二、体内免疫学检测（二）细胞免疫检测以特异性抗原或有丝分裂原注入皮内，剌激体内致敏T细胞分化增殖，释放淋巴因子，引起局部皮肤的IV型超敏反应。1、特异性抗原皮肤试验：在受试者前臂内侧皮内注入少量可溶性抗原，24-48小时后，观察局部皮肤红肿硬结的大小。大于1cm即为阳性，表示有细胞免疫力。2、植物血凝素（PHA）皮试：将PHA注射于受试者前臂屈侧皮内，6-12小时后局部出现红斑硬结，24-48小时达高峰，即为阳性反应，常用于检测细胞免疫水平。