8第八章--对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析解析

第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析目的要求1.掌握对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的结构和性质；2.掌握代表性药物的鉴别、检查方法和含量测定的亚硝酸钠滴定法；3.熟悉对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的杂质结构、危害、检查方法和含量限度；4.了解影响对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物稳定性的主要因素。局麻药物：改变神经膜对钠离子的通透性，防止膜去极化产生可逆的神经传导阻滞。可卡因三部分结构芳香环、中间链（酯、酰胺）、氨基团决定代谢、消除方式。第一节对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构与性质酯键（对氨基苯甲酸酯类药物）酰胺键（酰苯胺类药物）中间链一、对氨基苯甲酸酯类药物COOR2NR1HH芳伯氨基酯键,易水解取代基代表性药物H2NCOOC2H5H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HClHClCH3(CH2)3NHCOOCH2CH2N(C2H5)2盐酸普鲁卡因Procainehydrochloride苯佐卡因benzocaine盐酸丁卡因TetracainehydrochlorideNH2CONHCH2CH2N(C2H5)2HCl盐酸普鲁卡因胺H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HCl芳伯氨基酯键,易水解脂烃胺Cl－反应盐酸普鲁卡因R1HNCOOR2化学性质(Feature)2.水解：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因→BABA，其余药物→PABA3.弱碱性：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂滴定4.溶解性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。OCH2CH2N(C2H5)2NHCH2CH2N(C2H5)2()1.芳伯氨基：重氮化－偶合反应；与芳醛缩合成Schiff碱；易氧化变色等二、酰苯胺类药物NHCR2OR1R3R4潜在芳伯氨基酰胺键，易水解取代基代表性药物CH3NHCOCH2N(C2H5)2CH3HClH2OCH3NHCOCH3NC4H9HCl盐酸利多卡因Lidocainehydrochloride盐酸布比卡因bupivacainehydrochlorideCH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HCl盐酸利多卡因脂烃胺空间位阻Cl－反应1.水解→芳伯胺基？2.水解产物(醋酸)+乙醇/硫酸→醋酸乙酯3.弱碱性：叔胺氮原子＋生物沉淀剂→沉淀4.酰胺氮原子与金属离子络合显色化学性质(Feature)NH2COOCH2CH2N(C2H5)2HClNH2COOCH2CH3盐酸普鲁卡因苯佐卡因一、重氮化-偶合反应直接反应第二节、鉴别试验H2NCOOC2H5+NaNO2+2HClN2ClCOOC2H5N2ClCOOC2H5+OH+NaOHN=NCOOC2H5HO橙黄色-猩红色-萘酚重氮盐HClCOOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NHNaNO2HClCOOCH2CH2N(CH3)2CH3(CH2)3NNO乳白色盐酸丁卡因N-亚硝基化合物无重氮化反应CH3NHCOCH3NC4H9HClNHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3HCl盐酸利多卡因，盐酸布比卡因在酰氨基邻位有两个甲基，因空间位阻影响，较难水解，故重氮化-偶合反应较难。直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因ChP（2005）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯对乙酰氨基酚ChP（2005）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。对氨基酚对乙酰氨基酚、HCl（乳白色）盐酸丁卡因H2NaNO与Cu2+，Co2+，Hg2+的反应盐酸利多卡因在碳酸钠溶液中与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，转溶入氯仿，显黄色。盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。盐酸利多卡因在硝酸性溶液中与硝酸汞反应，显黄色。二、与重金属离子反应NHCOCH2NCH3CH3C2H5C2H5CuSO4+Na2CO3NCOCH2NCH3CH3C2H5C2H5C2H5CuNCOCH2NCH3CH3C2H52在同样条件下，盐酸普鲁卡因、丁卡因、苯佐卡因等不显Cu2+反应。对氨基苯甲酸酯类药物在同样条件下与Hg2+反应显红色或橙黄色（盐酸利多卡因显黄色）。与其他有关药物的区别羟肟酸铁盐酸普鲁卡因胺具芳酰胺结构，可被H2O2氧化，生成羟肟酸，再与FeCl3反应生成羟肟酸铁而显紫红色→暗棕色至棕黑色。羟肟酸铁盐反应NH2CONHCH2CH2N(C2H5)2H2O2NH2CON(OH)CH2CH2N(C2H5)2FeCl3NH2CONOCH2CH2N(C2H5)23Fe++3+3HCl具有酯键结构的药物易在碱性溶液中水解，可利用其水解产物进行鉴别。NH2COOC2H5+NaOHNH2COONa+C2H5OHC2H5OH+I2+NaOHCHI3三、水解产物反应黄色苯佐卡因盐酸普鲁卡因NH2COOCH2CH2N(C2H5)2NaOHHClNH2COOCH2CH2N(C2H5)2HClNH2COOHNH2COOHNH2COONaHOCH2CH2N(C2H5)2NaOHHClHCl白色二乙氨基乙醇白色沉淀溶解石蕊试纸石蕊试纸PABA）对氨基苯甲酸（白色对氨基苯甲酸钠纸变兰色）（使湿润的红色石蕊试二乙氨基乙醇对氨基苯甲酸钠油状物普鲁卡因盐酸普鲁卡因HClNaOH四、其他鉴别试验方法实例内容与现象测定衍生物mp三硝基苯酚衍生物；硫氰酸盐衍生物盐酸利多卡因228-232C，盐酸布比卡因194C；盐酸丁卡因131C。紫外吸收特征苯佐卡因；盐酸丁卡因;盐酸普鲁卡因胺;氯仿，278，与对照品一致；磷酸缓冲液,310,与对照品一致水,max=280nm;红外吸收特征盐酸普鲁卡因;盐酸普鲁卡因胺C=O1692,C-O1200,N+-H2585;N+-H2645,N-H1550,C-N1280,酰胺I带,酰胺II带两者区别第三节特殊杂质与检查一、盐酸普鲁卡因(对氨基苯甲酸)杂质来源：水解产生对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇结果导致注射液变黄、疗效下降、毒性增加原料药及注射用灭菌粉末中杂质限量：0.5%注射液中杂质限量：1.2%-CO2H2NCOOH[O]OOH2N检查方法：HPLC杂质对照品法固定相：十八烷基硅烷键合硅胶流动相：0.1%庚烷磺酸钠的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至3.0)-甲醇(68∶32)检测波长：279系统适用性试验：理论板数按对氨基苯甲酸峰计算不低于2000盐酸普鲁卡因峰和对氨基苯甲酸峰的分离度应大于2.0外标法以峰面积计算第四节含量测定容量分析方法(volumetricanalysis)分光光度法(spectrometry)色谱法(chrometography)亚硝酸钠滴定法(sodiumnitritemethod)非水溶液滴定法(non-aqueoustitrimetry)NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2OAr-NH2+NOClAr-NH-OH（慢）Ar-N=N-OH（快）Ar-N2Cl（快）•一、亚硝酸钠滴定法1.原理：Ar-NH2+NaNO2+2HCl→Ar-N2ClNHCOR+H2ONH2+RCOOHH+△NO2+6[H]NH2+2H2O1)加入适量KBr——以加速反应KBr+HCl→HBr+KClHNO2+HBr→NOBr+H2O（1）HNO2+HCl→NOCl+H2O（2）2.测定主要条件因（1）式平衡常数比（2）式约大300倍，生成的NOBr量多，使溶液中NO+浓度大大增加，从而加速反应进行。酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO32)加过量盐酸胺类药物在盐酸中溶解度大，反应速度也快，其实际用量较理论量多，一般胺：酸的比例以1：2.5～6为宜。这是因为过量酸有利于：①重氮化反应加快；②重氮盐在酸中稳定；③可防止生成偶氮氨基化合物。NH2Cl+NNN=NNH++HCl3)滴定温度将滴定管尖端插入液面下，一次将大部分滴定液在搅拌下加入，然后将滴定管尖端提出液面，缓缓滴定至终点。温高反应快，但重氮盐易分解；温低反应慢，故室温10～30C为宜，15C以下较准确。4)滴定方法与滴定速度3.指示终点的方法NOH2OHNO2He+HNO2He+++++NOH2O+阳极阴极永停滴定法ChP（2010）、BP（2000）电极：两个相同的铂电极（需活化，用加有1-2滴FeCl3试液的硝酸温热浸泡）终点时：电位法USP（24）原理：NaNO2+KI+HCl→NO+I2I2+淀粉→蓝色影响因素：溶液体积多次外试，供试品的损失指示剂需新配外指示剂法——碘化钾-淀粉糊剂内指示剂法常用的有：中性红橙黄IV–亚甲蓝等二、非水滴定法盐酸丁卡因、盐酸布比卡因具有烃胺，可用非水滴定法测定含量。溶剂：冰醋酸指示剂：结晶紫滴定剂：高氯酸（0.1mol/L)注意盐酸丁卡因、盐酸布比卡因含有盐酸，滴定前需加醋酸汞处理，以消除盐酸干扰。三、分光光度法比色法利用本类药物结构中的酚羟基或芳伯氨基具有三氯化铁反应或重氮化偶合反应，采用比色法测定含量。Anm处测定棕红色化合物，磺酸钠萘醌，盐酸普鲁卡因482421max94pH（四）、HPLC法盐酸普鲁卡因注射液ChP（2005）可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸离子抑制色谱法内标法定量(五)、体内药物分析HPCE研究人血浆中的普鲁卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因1．盐酸普鲁卡因常用的鉴别反应有A.重氮化—偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应2．采用亚硝酸钠法测定含量的药物有A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C.苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素3．下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因4.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是A.添加BrB.生成NO+·BrC．生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行5．中国药典（2010年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法6．亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法7.ChP（2010）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法8.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸A.盐酸普鲁卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.注射用盐酸普鲁卡因D.盐酸普鲁卡因胺片E.盐酸普鲁卡因注射液9.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点