结核感染T细胞检测

结核杆菌特异性T细胞应答体外检测实验焦作市第三人民医院感染五科孙建民15838982221结核病全球疫情：20亿人口曾受到结核分枝杆菌感染2010年新发和复发病例850-920万，死亡病例120-150万全球MDR-TB病例约44万中国和印度占全球病例的40%，中国第二我国疫情：2010年年发病例：100万活动性肺结核：500万涂阳肺结核：72万死亡年人数：5.4万年新发MDR-TB人数：10万涂阳肺结核占活动性肺结核14.4%，有85.6%（428万）活动性肺结核不能通过痰检得到明确诊断结核菌素实验：只有少部分活动性肺结核患者呈强阳性。由此推断至少有85.6/2(42.8%，219万)不能通过结核菌素实验或痰检明确诊断。结核菌培养耗时长，阳性率低，对初诊患者意义不大。核酸检测基层医院少有开展（焦作未开展）至少42.8%（以此推算我市约6064例）的活动性肺结核患者怎么明确诊断？结核感染T细胞检测结核感染r干扰素释放实验两种方法：酶联免疫吸附实验酶联免疫斑点实验1.3结核诊断传统结核诊断方法细菌培养•TB感染者血液中特异性T细胞再次接触到TB抗原，迅速产生IFN-γ•IFN-γ与TB有很好的量对应关系，呈正相关•TB-IGRA通过检测体外释放的IFN-γ的含量确定是否感染TB•未感染TB不产生IFN-γ结核感染T细胞检测原理结核感染T细胞检测原理通过比较基因组学发现卡介苗和结核分枝杆菌间存在RD区RD1区一般只存在于结核分枝杆菌，可能形成ESX-1分泌机制。该分泌系统中有两个重要蛋白，早期分泌抗原-6(ESAT-6)和培养基滤过蛋白-10(CFP-10)具有较强的Thl表位。ESAT-6和CFP-10作为体外刺激抗原来检测结核分枝杆菌越来越频繁，这种方法被定义为体外T细胞IFN-γ释放试验（IGRA）。NTP结核特异抗原ESAT-6、CFP-100刺激感染过结核的T淋巴细胞产生γ-干扰素PHA[植物血凝素]:刺激T淋巴细胞产生γ-干扰素一个人感染了结核产生γ-干扰素一个人未感染结核不会产生γ-干扰素结核感染T细胞检测流程检测管NTP22±2hNTP离心血浆6点定标夹心法γ-IFN2h2个工作日培养检测管：TB蛋白阳性管：PHA阴性管：无采血，分别加入阴、阳性对照管和检测管1ml37度封闭培养22小时收集上清ELISA定量检测上清中IFN-γ含量检测管阴性对照管阳性对照管培养液刺激抗原培养液无刺激原培养液PHA试剂盒的检测流程TST与IGRA2.3IGRA应用实例●IGRA对涂阴肺结核具有较好的辅助诊断作用与TST或痰涂片比较的优势敏感性和特异性均可达约90%不受BCG接种的影响不受非结核分枝杆菌感染的干扰不受免疫功能状态的影响临床意义阳性表示TB感染包括潜伏感染，活动性结核阴性表示无TB感染开展情况欧、美、日、韩等低流行国家和地区已作为常规诊断和筛查指标。国内早就认识到原有方法学的缺陷，列入国家“十一五”重大传染病专项重点研发试剂之一。国内很多大医院相继开展，我省少数医院开展。我院2014年开展，已较好地服务于临床。项目收费：2012年新增试行医疗服务项目和价格表250403914，结核感染T细胞检测，收费760元/次今后工作中遇到菌阴、结核菌素试验不能达强阳性的疑似肺结核，免疫功能低下、老年疑似肺结核，疑似肺外结核病的患者，均可以通过结核感染T细胞检测实验技术明确诊断或排除。焦卫〔2014〕185号文件2014年12月15日焦卫〔2014〕185号文件，其核心内容是进一步加强结核病归口管理工作。要求医疗机构严格按照卫生部《肺结核病人转诊和追踪实施办法》、《河南省结核病归口管理实施细则》，对肺结核病例或疑似病例，需要住院的患者必须转至市三医院，仅需门诊治疗的患者转至市或县疾控中心。要求各医疗保险统筹单位按正常转诊对待。市三医院作负责承担全市肺结核住院救治工作。医联体2015年1月22日，经上级批准，市疾防中心和三医院正式成立结核病防治医联体。这对进一步做好我市肺结核患者的发现、规范化治疗与管理工作，减少肺结核患者的耐药率，提高治愈率，有效控制疫情的扩散和蔓延，将会产生重大影响。市三医院负责承担全市肺结核患者的住院救治工作，全市需住院治疗的肺结核患者由各级疾控机构统一转至该院进行治疗；市疾防中心负责做好门诊诊疗和管理工作。焦作市第三人民医院感染五科孙建民15838982221让我们共同努力为焦作市结核病防治工作尽到自己的一份力量Thankyou！