肿瘤标志物3

流式细胞仪(Flowcytometer，FCM)能快速、精确地测量通过检测区液流中的各种粒子。这些粒子可以是细胞、大分子、乳胶滴或其他粒子。流式细胞术是对单细胞定量分析和分选的新技术。通常是应用一个激光和有关的光学检测系统来收集这些信号以供分析。其检测速度之快，统计学精度之高，是其他方法无法比拟的。它可以研究一个细胞从新生到死亡，从细胞膜到脑浆和核内物质及染色体，还可以探讨不同物质之间的关系。它在免疫学、肿瘤学、细胞遗传学、病理学、放射生物学等学科中已形成了独立的学科分支使用程序免疫磁性微粒分离与纯化技术磁性微粒(magneticmicrospheres,MMS)是80年代初，用高分子材料和金属离子为原料，聚合而成的一种以金属离子为核心，外层均匀地包裹高分子聚合体的固相微粒。在液相中，受外加磁场的吸引作用，MMS可快速沉降而自行分离，无需进行离心沉淀。因此，将MMS应用于免疫检测，可使操作过程大为简化。经过特异性抗体包被制成免疫MMS，与检样中的抗原结合形成免疫MMS-靶分子(或靶细胞)复合体，通过外加磁场的作用即可与其他成分分离开来。再以适当方式使复合体解离，在磁场吸引下除去游离的免疫MMS，即可获得纯化的靶分子或细胞放射免疫技术是利用放射性核素可探测的灵敏度、精确度和抗原抗体反应特异性相结合的一种免疫技术。灵敏度高、特异性强、重复性好、样品及试剂用量小是其优点；但核素的放射性，对工作人员和环境易造成危害和污染，是其缺点放射免疫分析【RIA】是标记抗原（Ag*）和非标记抗原（Ag）对有限量的特异性抗体竞争性结合反应Ag*Ag＋AbAg*Ab＋Ag*Ag＋Ab第二Ab法聚乙二醇沉淀法PR法活性炭吸附法分离免疫放射分析【IRMA】是非竞争性免疫结合反应，用过量的放射性核素标记抗体（Ab*）与待测抗原反应，待充分反应后，除去游离的Ab*，AgAb*＋Ab*结合物的放射性强度与待测抗原呈正比关系Ag＋Ab*=AgAb*＋Ab*Ag双点位IRMA单点位IRMAAg固相抗原Ag放射免疫分析【RIA】模式放射免疫分析广义还包括放射受体分析及放射配体结合分析放射免疫分析常用的放射性核素有125I、130I、3H、14C等基因芯片技术基因芯片（GeneChip）通常指DNA芯片，其基本原理是将指大量寡核苷酸分子固定于支持物上，然后与标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的数量蛋白芯片技术蛋白芯片是将大量蛋白质分子按预先设置的排列固定于一种载体表面行成微阵列，根据蛋白质分子间特异性结合的原理，构建微流体生物化学分析系统，以实现对生物分子的准确、快速、大信息量的检测6050403020100肿瘤患者%7.07.04.27.07.4临界值(ng/ml)5033282722在实体肿瘤患者中,CEA特异性为95%时的敏感性参考值范围：＜3ng/ml在实体肿瘤患者中CEA表达状况10080604020(%)959127142293900＜1515~100100~10001000~10,00010,000~100,000原发性肝细胞癌肝转移癌AFP(ng/ml)原发性肝细胞癌和其他恶性肿瘤肝转移癌中AFP表达状况参考值范围：＜15ng/ml巨型快多结节型介入原发性肝细胞癌和肝转移癌AFP和CEA的表达100908070605040302010095992507213(%)AFP＞15ng/mlCEA＞3ng/mlCEA＞10ng/ml原发性肝细胞癌肝转移癌参考值范围：＜3ng/ml参考值范围：＜15ng/ml肺癌中肿瘤标志物的应用CYFRA21-1CEANSE治疗前治疗后复查组织类型不明确腺癌鳞状细胞癌小细胞肺癌大细胞肺癌胃癌单项或联合测定CEA、CA19-9及CA72-4的敏感性806040200敏感性（%）272966406672CEA（10.1）CA19-9（96）CA72-4（2.4）CA19-9（107）CEA（10.1）CA72-4（2.4）CA19-9（260）CA72-4（2.4）CEA（10.4）胃癌特异性95%时核医学用ROC曲线解读肺鳞状细胞癌TM的特异性1.00.80.60.40.201.00.80.60.40.20敏感性(%)特异性(%)CYFRA21-1CEASCCNSECYFRA21-1对于鳞状细胞肺癌的敏感性可达60%，高于SCC，也优于其他两种TM，是非小细胞肺癌的TM下面积越大，敏感性与特异性越好血清2-m浓度对于生存时间的影响1008060402000246810122-m＜3.0mg/L3.0＜2-m≤5mg/L2-m＞5mg/L生存率(%)第一次调查后的年数参考值范围：1.2~2.5mg/L各种类型肿瘤发生率(不考虑性别)1009080706050403020100271318751252124597073843475467肺乳腺结直肠胃前列腺卵巢胰腺膀胱宫颈发生率5年生存率数据来自theAmericanCancerSociety肿瘤标志物测定的频率首次治疗前(手术、放疗、化疗、激素治疗）各种治疗后，如术后2~10天（根据肿瘤生物周期而定）首次治疗后1~2年3个月检查一次首次治疗后3~5年6个月检查一次任何治疗前怀疑有复发或转移重新分期肿瘤标志物明显增高后4~6周影响肿瘤标志物浓度的因素肝肾功能衰竭、胆道淤积，CA19-9浓度可达3000U/ml直肠指检、膀胱镜、留置尿管等可导致PSA、PAP值增高化疗药物作用使肿瘤标志物释放，影响TM检测浓度吸烟者血清CEA可高达10~20ng/ml储存不当可使碱磷酶水平下降放置时间超过1小时，NSE由于血小板释放明显增高溶血时红细胞可释放NSE；黄疸可使PSA假阳性增加唾液污染标本对SCC、CA19-9的影响大顺铂、丝裂霉素、雌二醇、VitC等导致PSA假性增高临床用于筛查和判断预后价值的TMAFP用于肝硬化患者的筛查降钙素用于可疑甲状腺髓样癌的筛查AFP和HCG用于可疑胚胎细胞肿瘤的筛查单克隆Ig及本周氏蛋白对可疑多发性骨髓瘤的筛查PSA对50岁以上有前列腺疾病患者的筛查CEA对大肠癌治疗跟踪AFP和HCG对胚胎细胞肿瘤的治疗跟踪2-M对多发性骨髓瘤的治疗跟踪科学应用杜绝浪费避免伤害正确分析、解释肿瘤标志物结果检查治疗效果根据TM变化可提早反映临床治疗是否有效监测疾病进程如CEA对大肠癌可提早6个月提示复发和转移鉴别残余肿瘤卵巢癌术后CA125持续或继发性增高早期发现肝硬化、前列腺癌、大肠多发性息肉等判断某些肿瘤预后如多发性骨髓瘤预后直接干预治疗方案结语正确使用肿瘤标志物对于患者帮助巨大，甚至可以降低费用，相反，若使用错误，则会给患者造成沉重的经济负担和心理创伤。不能正确地评价检测结果甚至会导致错误的治疗策略