2016届高三一轮总复习高中生物选修一课件专题2微生物的培养与应用-课题1.ppt

服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践自主学习·基础知识合作探究·重难疑点课时作业课题1微生物的实验室培养服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践[学习目标]1.了解并掌握培养基的制备方法，简述有关培养基的基础知识。2.说出消毒和灭菌的概念，简述常用的消毒与灭菌方法。(重点)3.掌握实验室灭菌方法及无菌技术。(重点)4.进行微生物的培养与纯化。(难点)服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践一、培养基1．概念人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。营养物质生长繁殖服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践2．种类根据物理状态液体培养基：配制成的状态的基质加入凝固剂，如固体培养基概念：配制成的状态的基质用途：实验室中最常用的培养基之一。微生物在表面生长可形成肉眼可见的液体琼脂固体菌落服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践3．营养要素：各种培养基一般都含有水、、和，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及的要求。碳源氮源无机盐氧气服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践二、无菌技术1．关键防止的入侵。2．具体操作(1)对实验操作的、操作者的衣着和手，进行清洁和。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行。外来杂菌空间消毒灭菌服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。酒精灯火焰周围的物品服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践3．消毒和灭菌消毒灭菌概念使用较为的物理或化学方法杀死物体或内部的部分微生物(不包括)使用的理化因素杀死物体内外的微生物(包括芽孢和孢子)常用方法消毒法、巴氏消毒法、消毒法、紫外线消毒法灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌适用对象操作空间、操作者双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等温和表面芽孢和孢子强烈所有煮沸化学药剂灼烧服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践1．无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？【提示】无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)最常用的细菌培养基：固体培养基配制步骤：计算→→→→倒平板(2)培养基应采用高压蒸汽灭菌；倒平板时要待培养基冷却至左右时，在附近进行，等平板冷凝后将平板。牛肉膏蛋白胨称量溶化灭菌50℃酒精灯火焰倒置服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践2．纯化大肠杆菌(1)纯化培养方法：在牛肉膏蛋白胨培养基上纯化大肠杆菌，最常用的方法有法和法。(2)纯化培养的原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的，即获得较纯的菌种。平板划线稀释涂布平板菌落服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践(3)平板划线法：通过在琼脂固体培养基表面连续的操作，将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。其具体操作是：①将放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。②在火焰旁冷却，并打开棉塞。③将试管口通过。④将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液。⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。接种环划线稀释接种环接种环酒精灯火焰服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将蘸有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。⑦灼烧，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。⑧将平板放入培养箱中培养。平行接种环倒置服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践(4)稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度，然后将不同稀释度的菌液分别到琼脂固体培养基的表面，进行培养。其操作步骤是：①系列稀释(梯度稀释)操作：稀释涂布服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践②涂布平板操作：a．将涂布器浸在盛有的烧杯中。b．取少量菌液，滴加到培养基。c．将沾有少量的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10s。d．用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。酒精表面酒精服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践2．接种操作的每次划线接种前与接种后都要灼烧接种环或接种针，其目的分别是什么？【提示】(1)划线前灼烧是为了杀死上次划线结束后残留的菌种。(2)划线结束后灼烧，能及时杀死接种环或接种针上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践3．在倒平板时为何要在酒精灯的火焰旁进行？【提示】酒精灯的火焰旁是无菌区域，在酒精灯的火焰旁操作，可以避免周围环境中微生物的污染。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践四、菌种的保藏临时保藏法甘油管藏法适用对象使用的菌种保存的菌种培养基类型固体斜面培养基液体培养基温度4℃－20℃方法菌落长成后放入冰箱中保存，以后每3～6个月将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上将培养的菌液与等体积灭菌后的混合均匀后放在冷冻箱内保存缺点菌种易被或.频繁长期甘油污染产生变异服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践1．液体培养基含有水，而固体培养基不含水。(×)【提示】液体培养基与固体培养基都含有水，它们的区别是是否添加凝固剂。2．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。(√)3．日常生活中所用的84消毒液，其消毒方法属于巴氏消毒法。(×)【提示】消毒液消毒属于化学药剂消毒法。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践4．平板划线法和稀释涂布平板法都是为了得到由单个细胞繁殖而来的菌落。(√)5．微生物实验结束后，将使用过的培养基丢弃即可。(×)【提示】使用过的培养基应经过灭菌之后再丢弃。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中问题1问题2问题3问题4服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践学生分组探究一培养基的成分及分类第1步探究——问题引入，诱思导学情景材料：在当前国家农业结构调整过程中，政府鼓励农民依靠科技致富。食用菌的栽培是其中一项热门技术。首先对食用菌栽培室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。培养蘑菇时常使用的原料为棉籽壳、花生粉饼、朽木等，再喷洒适量的水，加入一定量的尿素等。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践1．按物理性质分类，该培养基属于哪类？【提示】固体培养基。2．该培养基含有的营养成分有哪些？【提示】碳源、氮源、生长因子、水和无机盐。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践第2步提炼——要点归纳，整合提升1．配制原则(1)目的明确：不同微生物需求不同，根据培养目的进行配制。(2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。(3)pH要适宜：为维持pH的相对恒定，可在培养基中加入缓冲剂，常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践2．培养基的成分及功能营养要素含义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质①无机化合物：CO2、NaHCO3②有机化合物：糖类、脂肪酸、花生饼粉、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物①无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐②有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践生长因子(特殊营养物质)生长必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定培养基、大气、代谢产物等无机盐为微生物提供除碳、氮元素以外的各种重要元素，包括某些大量元素细胞内的组成成分，生理调节物质；某些化能自养菌的能源，酶的激活剂培养基、大气等环境服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践3.培养基的种类分类标准培养基种类培养基特点作用物理性质固体培养基外观固态微生物的分离、计数等半固体培养基容器放倒不致流出，剧烈震动则破散观察微生物的运动、鉴定菌种等液体培养基呈液态常用于工业生产服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践1．在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源，新陈代谢同化作用类型的划分也是根据是否能合成含碳有机物为依据，能合成含碳有机物的是自养型，反之则为异养型。2．对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。3．微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。4．一些天然物质如酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等可为微生物提供生长因子。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践第3步例证——典例印证，思维深化下表是某微生物培养基成分，请据此回答：编号成分含量①粉状硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100mL服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践(1)上表培养基可培养的微生物类型是________。(2)若不慎将过量NaCl加入培养基中，如不想浪费此培养基，可再加入________，用于培养____________。(3)若除去成分②，加入(CH2O)，该培养基可用于培养________________。(4)表中营养成分共有________类。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践(5)不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是________________。(6)上表中各成分质量确定的原则是____________________________________________________________________。(7)若上表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是_____。【思路点拨】服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践【解析】题表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可判断培养的微生物是自养型微生物。该培养基中加入了过量食盐，就可以培养耐盐的金黄色葡萄球菌，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培养基还需要加入有机碳源。该培养基若加入(CH2O)，培养基中就有了碳源，但除去成分②，却使培养基中没有了氮源，这时就只能用于培养固氮微生物了。服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践微生物生长需要一定的pH，所以培养基装瓶前需要调节pH。表中各成分含量要根据微生物的生长需要来确定。对于菌种鉴定，往往用的是固体培养基，而表中没有凝固剂，故需要加入常见的凝固剂——琼脂。【答案】(1)自养型微生物(2)含碳有机物金黄色葡萄球菌(3)固氮微生物(4)3(5)调节pH(6)依微生物的生长需要确定(7)琼脂(或凝固剂)服/务/教/师免/费/馈/赠返回菜单新课标生物·选修1生物技术实践第4步巧练——精选习题，落实强化1．下列有关微生物营养物质的叙述中，正确的是()A．是碳源的物质不可能同时是氮源B．凡碳