糖化血红蛋白测定标准化的进程和意义

糖化血红蛋白测定标准化的进程和意义糖尿病(DM)定义•Diabetes:多尿•Mellitus:多糖•糖尿病是一种常见的多系统累及疾病;影响糖类，蛋白质和类脂的代谢过程并引发多种退行性病变。•WHO:“一种通常由环境因素和遗传因素联合引发的慢性高血糖症。”•俗称:糖尿病糖尿病(DM)糖尿病治疗的最终目的在于降低糖尿病的发病率和死亡率DialysisTransplantationSource:IDF;DiabetesAtlas2000生活方式的西方化激化该病的流行糖尿病(DM)糖尿病–21世纪人类健康问题的一大挑战糖尿病(DM)糖尿病-至2025全球估计有3亿糖尿病患者糖尿病患者数量增长趋势图•糖尿病患者数量以每年4％－6％的速度在增长。•新确诊患者每年以8％速度在增长。•在发达国家，二型糖尿病患者的数量占发病总数的85％－95％。由于生活方式的改变，发展中国家的发病率也有显著上升的趋势。299239151200020102025DiabeticsSource:IDF;DiabetesAtlas2000血红蛋白血红蛋白主要有三种主要功能结构•血红蛋白的分子由4个多肽单位和4个亚铁血红素构成•在每个亚铁血红素的中心是二价铁离子，血红蛋白由6％的血红素和94％的球蛋白构成。•血红蛋白呈椭圆型外观，大约为5.5x5.5x7.0nm.•正常成人的血色素HbA的分子量是66000道尔顿，成人的血红蛋白分子由4个多肽片断构成，HbA由二条链和二条链以四面体的构造组成。•运输氧气•运输二氧化碳•机体缓冲液功能糖化血红蛋白/HbA1c构成葡萄糖进入红细胞并与血红蛋白发生反应红血球破碎后才可释放出血红蛋白血红蛋白血红蛋白可分为糖化和未糖化二种正常成人体内的血红蛋白HbHbA0HbA1HbA1aHbA1bHbA1cHbA(ßß)HbA2()HbF()97%0.5%2.5%成人Hb胎儿Hb未糖化糖化当ß地中海贫血时HbA1c含量下降可检测GHb含量6%94%-主要的糖化血红蛋白-已经由20年以上的研究历史5%A1a和A1b含量极低HbA1c血红蛋白可在不同的位置进行糖化糖化优先的顺序Gluc1ß-chainVal...1ß-chainLys...66...3...-chainVal...15-chain2Lys...16...ß-chainLys...174...GlucGlucGlucGluc首选结合位置HbA1c定义HbAoHbA1cValHisLeuThrProGluGlucValHisLeuThrProGluGluLysSer....GluLysSer....HbA1c是在ß链的N端发生糖化的血红蛋白只有第一个氨基酸被糖化ß-链HbA1c定义HbAo-多肽HbA1c-多肽ValHisLeuThrProGluGlucValHisLeuThrProGluGluLysSer....GluLysSer....ß-链的酶解IFCC参考系统选用该多肽为一级参考物质HbA1cHbA1c由蛋白的非酶法糖化形成不稳定HbA1c可逆快速稳定的HbA1c不可逆慢速离子交换HPLC分离HIAs无干扰,只检测HbA1c常用方法HbA1c的检测方法适用于日常检测的方法很少依据电荷携带的不同琼脂电泳琼脂糖电泳离子交换层析/HPLC根据结构的不同亲和层析/HPLC免疫分析根据化学特性的不同在过去的二十年间，依据糖化和非糖化血红蛋白之间的理化性质不同，发展了许多检测方法常见的方法：50年代后期:柱式阳离子交换树脂长柱状耗时数天可重复使用1971:离子交换柱法0.055mmol/L磷酸缓冲液冲洗HbA1c和HbA1(a+b)分离HbA0和HbA2由0.15mmol/L磷酸缓冲液分离70年代后期:微柱法测定HbA1(a+b+c)例如:Bio-Rex70再现性差温度与pH难稳定血脂干扰1981:亲和层析法发表HbA1c的检测方法发展史HbA1c的检测方法发展史Source:JohnG,ClinChemLabMed2003;41(9)1983:BioRad开发柱式HbA1c法1988:DAKO开发免疫法(EIAMTP)1993:BoehringerMannheim开发常用HIA1999:Roche诊断推介测定全血法首此实现HbA1c测试于综合工作平台，并实现机上融血2002:IFCC批准首个HbA1c的国际参考系统2002:Roche诊断发布IFCC标准化的HbA1c