血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义

血细胞分析仪原理及散点图临床应用一、血细胞各通道分析原理及散点图分析二、散点图案例分析一、血细胞各通道分析原理及散点图分析血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究参数，如直方图，DIFF散点图，NRBC散点图等。实验人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注的,进行涂片复检确认，提高工作效率，减少漏诊率。DIFFWBC/BASONRBC半导体激光荧光染色（聚次甲基+噁嗪）主要原理FSC前向散射光：细胞大小SSC侧向散射光：复杂程度（细胞的颗粒和细胞核等内含物的信息）SFL侧向荧光：核酸含量（DNA、RNA)DIFF通道分析原理4DL(阴离子表面活性剂）完全溶解RBCPLT在WBC膜上打孔溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在SSC显示复杂程度是最大的。4DS对核酸染色纵坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂程度化学粘附大分子有机酸与嗜酸粒细胞中的碱性颗粒发生化学粘附嗜酸粒细胞大分子有机酸RNA/DNA荧光染色原理成熟白细胞：高荧光特性网织红细胞：弱荧光特性血小板：成熟RBC：原始细胞：幼稚细胞：微弱荧光特性无荧光特性极高荧光特性极高荧光特性荧光染色WBC分类的优势检测异常细胞提供幼稚粒细胞信息（IG）提供原始细胞信息（Other）10S–FB溶血剂（酸性，低渗）溶解RBCPLT除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成裸核形态Baso保持原状纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂程度嗜碱其它有核细胞嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液，Baso内的蛋白为酸性蛋白，因此在该溶液中受到保护，而其他有核细胞则被溶解成裸核WBC/BASO通道分析原理NRBC通道分析原理NR溶血剂完全溶解RBC，PLTWBC保持原状NRBC溶解为裸核NR染液对核酸染色纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小横坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量NRBC%=NRBC#/NRBC_WBC#出现有核红时WBC的修正红系增生活跃时，外周血易见较多的NRBC，在WBC计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。WBC增多对RBC计数的干扰RBC：阻抗法RBC值含WBCWBC100*109/L时，需校正红系统参数贫血越严重，对RBC影响越大血红蛋白通道光电比色法SLS（十二烷基磺酸钠）：无氰无毒二、散点图案例分析嗜碱性粒细胞增多症在BASO散点图上，嗜碱区域出现大量散点，另外DIFF散点图上，中性区域的左下方也为嗜碱区域，也出现了大量的散点。BASO%：仪器13.4%镜检13.5%AML-M1(例1)不可信DIFF散点图显示淋巴与单核之间融合，有分类结果，但不可信。IMI散点图也提示大量原始细胞。镜检发现有77.5%的原始细胞。细胞表面标志CD13和CD33阳性，CD36阴性；为急性髓细胞性白血病。AML-M2DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分类。IMI散点图显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现有90%的原始细胞、3%的早幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞。流式细胞仪检测结果显示细胞表面标志CD13和CD33阳性，为髓细胞性白血病。AML-M3DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分类。IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现3%的原始细胞，91%的早幼粒细胞、3.5%的中幼粒细胞，0.5%晚幼粒细胞。AML-M4DIFF散点图，白细胞区域出现大量灰白色散点，完全融合，不分类。大致分成两群，一群为原始细胞，一群为幼稚粒细胞。IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。AML-M5bDIFF散点图淋巴与单核融为一体，不分类，IMI散点图显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。镜检发现59%的原始细胞，0.5%的早幼粒细胞，单核细胞24.5%。慢粒危象DIFF散点图OTHER区域出现大量散点，中性粒细胞上方也有少量散点，IMI散点图也出现大量红色散点，仪器报警提示有大量原始细胞和幼稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现38.5%的原始细胞，幼稚粒细胞和幼稚的单核细胞。酯酶染色阴性或弱阳性，可被氟化钠抑制。这是一例慢粒急单变。MDSDIFF：淋巴细胞和单核细胞之间界限不清，提示出现原始细胞。中性粒细胞散点向左下方延伸到嗜碱区域。IMI：少量红点NRBC：幼红镜检：原始：1%，BASO：5%，NRBC：2.5/100WBC范**，女，67y。2016.11，诊断为MDS伴原始细胞增多（10%）DIFF散点图淋巴与单核区域融合，提示出现原始细胞报警提示异常淋巴细胞/原始细胞，异淋？镜检：47%原始淋巴细胞，未见异淋。血片POX（-）。2018.4.MDS急淋变MDS急淋变急性T淋巴细胞白血病DIFF散点图淋巴与单核完全融合，IMI散点图几乎没有红色散点，仪器提示异常淋巴/原始淋巴细胞。镜检发现有59.5%的异常淋巴细胞。本例被诊为ATL。CLL淋巴与单核区域分界不清，仪器提示淋巴细胞增多/原始淋巴。镜检：L：86.5%，幼淋2.0%异型淋巴细胞异型淋巴细胞增高与多种病毒感染及变态反应有关。常见有：传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、病毒性肝炎、肾综合征出血热等病毒性感染。特点：胞体增大，胞质增多、嗜碱性增强，细胞核母细胞化，荧光强度最强。散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。原因：疟原虫裂殖体破裂，疟色素从感染的血细胞中释放出来，继而被白细胞吞噬，吞噬了疟色素的白细胞侧向散射光强度改变，显示在散点图靠近中性粒细胞一侧，但也被仪器以Eo特有的红色标示出来。张时民等.血细胞分析仪测定疟原虫感染患者特征二例.中华临床医师杂志，2011,5（2）:633-635疟原虫感染的散点图（一）从仪器报警EO增高或无EO分类结果的1501份标本中发现有9份疟原虫标本，6份散点图表现为EO与NEG之间间距缩小(图1)，3份报警白细胞散点图异常,且散点图显示EO与NEG之间无间距(图2)。其他1492份散点图基本正常。因为是真性EO增多，表现在散点图上是EO数量增加，为正常分类散点图(图3)。戴燕，万海英等.XE-2100血细胞分析仪嗜酸粒细胞异常散点图报警筛选疟原虫感染的研究.中华检验医学杂志，2008,31（7）:763-766疟原虫感染的散点图（二）谢谢