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干化学原理•干化学定义•干片分类•比色速率法干片•免疫速率法干片•直接离子选择电极法干片•干化学的抗干扰能力主要内容MicroSlide-多涂层薄膜干片技术扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层标本MicroSlide多涂层薄膜干片技术:将所需试剂预固相在多层薄膜和邮票大小的透明支持基垫之上。当血浆,血清,尿液或脑脊液与这些已含化学物质的干式薄膜接触时发生反应并对反应信号进行测量。干片分类CM/RTPMIR干片(MicroSlide)钠钾氯地高辛苯巴比妥卡马西平苯妥因C反应蛋白胆固醇甘油三酯总蛋白白蛋白高密度酯蛋白脂肪酶尿蛋白脑脊液蛋白谷丙转氨酶谷氨酸转移酶碱性磷酸酶r谷氨酰转酞酶乳酸脱氢酶肌酸激酶肌酸激酶同工酶尿素氮肌酐尿酸乳酸铁、总铁结合力磷锂淀粉酶胆碱脂酶总胆红素结合/非结合胆红素血氨乙醇水杨酸茶碱醋氨酚镁二氧化碳比色/速率法干片免疫速率法干片电极法干片指示剂层支持层扩散层试剂层比色/速率法干片通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度指示剂层支持层•多孔结构,允许标本通过•均匀分布标本•过滤大分子(蛋白质,脂肪等)•去除干扰物质(溶血,黄疸等)•提供反射测定的背景扩散层试剂层扩散层比色/速率法干片结构试剂层扩散层试剂层指示剂层支持层•包含检测反应所需的酶,缓冲液,催化剂等•多层试剂,控制反应顺序比色/速率法干片结构葡萄糖干片指示剂层扩散层试剂层指示剂层支持层•试剂层产物与指示剂层中的染料结合时,形成有色复合物,其与分析物浓度成正比。比色/速率法干片结构支持层扩散层试剂层指示剂层支持层•提供反应支持基垫•允许光路自由通过比色/速率法干片结构均匀分布标本比色/速率法干片功能演示扩散层试剂层指示剂层支持层均匀分布标本标本进入扩散层均匀分布标本扩散层试剂层指示剂层支持层比色/速率法干片功能演示标本迅速向四周扩散均匀分布标本扩散层试剂层指示剂层支持层比色/速率法干片功能演示标本均匀向下层渗透扩散层试剂层指示剂层支持层比色/速率法干片功能演示标本与试剂反应扩散层试剂层指示剂层支持层比色/速率法干片功能演示反应物在指示剂层被固定扩散层试剂层指示剂层支持层比色/速率法干片功能演示反射光的测定干扰物质反光背景成色层生成纯净的反射光光源滤光片接收器比色/速率法干片功能演示接收器接收器透射与反射光线经过干扰物质光线不经过干扰物质受影响不受影响竞争性与非竞争性免疫速率反应模式需要液体反应底物地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、卡马西平免疫速率法干片免疫速率法干片酶抗体酶标抗原胶乳试剂扩散层受体层胶乳层聚酯支持层酶标抗原抗体胶乳试剂病人标本免疫速率法干片胶乳试剂酶标抗原+标本中抗原抗体免疫速率法干片竞争法结合结合抗原+游离抗原免疫速率法干片加入液体反应底物洗去未结合物质免疫速率法干片竞争法结果高浓度低浓度免疫速率法干片电极法干片离子选择电极技术直接法测定两电极间电势不同钾,钠,氯盐桥S2S1S3S4aIar离子载体膜M+ClAgClAg离子载体膜M+ClAgClAgaIarVV干片常规已知浓度液体(参比液)待测液体(标本)离子选择电极(ISE)盐桥ar电极法干片干片在接触点被穿透测量电压读数通过电压读数计算出分析物的浓度旗舰测试项目-K,Na,Cl——直接离子选择电极AqueousSolution(Serum)水相(血清)Non-aqueoussolution(Lipids,Proteins)非水相(血脂,蛋白质)以间接法检测的容量以直接法检测的容量间接法无法对血脂和蛋白质进行校正.组成成分原始体积水相9.3ul非水相0.7ul总样本体积10.0ul按照血清中,非水相占有的体积约为7%计算标本电解质排斥效应组成成分原始体积稀释液990.0ul水相9.3ul非水相0.7ul总样本体积1000.0ul稀释后的正常人标本(100倍稀释)稀释比率=最终体积/原始体积总的血清稀释比率=1000/10=100倍水相稀释比率=(990+9.3)/9.3=107.45倍电解质排斥效应正常人标本Na=140K=4.0稀释1:100检测计算Na=140K=4.0结果Na=130.3K=3.72单位:mmol/LNa=140/107.45×100=130.3mmol/LK=4/107.45×100=3.72mmol/L直接离子选择电极法检测间接离子选择电极法结果电解质排斥效应蛋白质增高•脱水•巨球蛋白血症•多发性骨髓瘤•高球蛋白血症•肉芽肿病•某些胶原病血脂增高•甲状腺机能减退•肾病综合症•糖原过多症•糖尿病•急性胰腺炎直接法vs.间接法ISE疾病状态对标本的影响•电极与电极膜重复使用•单一采样针、进样通道•大量蠕动泵、电磁阀•众多管道、多种液体•频繁定标与冲洗保养•有电解质排斥效应直接法vs.间接法ISE每个测试独立电极一次性Tip头无泵,无阀无管道定标周期长,环保没有电解质排斥效应优异的稳定性,杜绝交叉污染杜绝交叉污染维修保养简单无管道腐蚀老化,节约成本节约时间,环保,实现零污染结果准确可靠干化学(直接法)常规法(间接法)干化学的优势为什么间接ISE需要稀释?•减少了蛋白质在电极上的积累–使电极保持“清洁”•延长使用时间•减少电极保养–降低漂移/提高准确性–降低定标频率尿酸个性化的抗干扰能力•MicroSlide多层涂膜技术可以针对不同检测项目使用加以不同成份的薄膜以达到最佳的检测结果–某些干片中有清道夫层(如尿酸):去除维他命C和钙的干扰–某些干片试剂层下有半透膜层(如尿素氮):去除药物干扰半透膜尿素氮-溶血-血脂-胆红素能有效排除标本中对检测结果造成的影响VITROS干化学技术优势优异的抗干扰能力内源性干扰物的出现频率SamplePopulationrefn%溶血%黄疸%脂血Hospital111989900010202Hospital2219916737256Inpatients3198525999203Outpatients419932600218ED519912101099Cumulativen2114613422702891Overall%1006.312.84.2标本溶血引起的干扰情况200180160140120100806040201002003004005006007008009001000HEMOLYSATEADDED(ashemoglobinmg/dL)(FINAL/ORIGINAL)=RESULT×100%HITACHI747T.BILICPKMgALBPHOSUATRIGALTTPALKPGGTAMYL**CL*GLU*CHOL*GLOB*CREAT*D.BILI*BUN*CO2*NA*CA200180160140120100806040201002003004005006007008009001000HEMOLYSATEADDED(ashemoglobinmg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT×100%**ALKP*AMYL*ECO2*CAL*CK*CL*CREAT*NA*URCA*UREABILIPHOSPROTALBTRIGGLUCHOLMg标本溶血引起的干扰情况JNJV750血脂的干扰情况200180160140120100806040201002003004005006007008009001000LIPEMIA(INTRALIPIDAddedmg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT×100%CX5(7,4)*BILIURCAPHOSGLUPROTMgCHOLALBCACREATALKPAST##ALT*UREA*CK*CL*K*GGT*NA*CO2#LDH109%AT750MG/DL血脂的干扰情况200180160140120100806040201002003004005006007008009001000LIPEMIAADDED(ashemoglobinmg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT×100%*ALB*ALKP*ALT*AMYL*AST*ECO2*BILI*CA*CK*CL*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*MG*PHOS*PROT*URCA*UREAJNJV750胆红素引起的干扰200180160140120100806040201002003004005006007008009001000BILIRUBINADDED(mg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT×100%*CREATASTPHOS#LDH#ALKPCAPROTECO2##MgCHOLGLUALT*TRIG*NA*CL*UREA*CK*AMYL*ALB*URCA*FEDUPONTDIMENSION200180160140120100806040201002003004005006007008009001000BILIRUBINADDED(mg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT×100%PROT**ALB*ALKP*AMYL*AST*ECO2*CA*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*NA*CL*URCA*UREA*TRIG*CK胆红素引起的干扰JNJV750多层涂薄膜干片技术,针对不同检测项目的个性化优异的抗干扰能力稳定的定标曲线,可长达6个月无需上下水和管道只产生固体废物,经济环保中英文菜单,操作保养简便直接法离子选择电极检测离子独特的胆红素检测干化学技术特点可靠的结果优质的服务轻松的工作高效的管理•干化学定义•干片分类•比色速率法干片•免疫速率法干片•直接离子选择电极法干片•干化学的抗干扰能力小结ThankYou
本文标题:干化学原理.
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