淋巴瘤分子诊断临床应用

51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential1新一代分子诊断技术在淋巴瘤诊断中的应用上海源奇生物医药科技有限公司张文晶51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential2为什么淋巴瘤很复杂?来源于不同分化阶段细胞形成的恶性克隆性疾病，异质性大新的淋巴瘤分类将不同特点的淋巴瘤定义为不同疾病淋巴瘤细胞51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential3淋巴瘤的诊断及分类历史早期，淋巴瘤的诊断及分类主要根据组织形态学和自然病程的发展过程1994年，“REAL”(TheRevisedEuropeanAmericanLymphomaClassification)分类将形态学、免疫表型、分子遗传及临床特点结合起来，从而把淋巴瘤分类为不同的亚型，并通过临床验证2008年，WHO根据细胞免疫学的研究和分子学特征性标志的发现，将分类作了进一步的修订2016年，进一步进行了修订351,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential4WHO淋巴组织肿瘤分类(2016)•慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤（CLL/SLL)•单克隆B淋巴细胞增多(MBL)•B细胞前淋巴细胞白血病•脾边缘区淋巴瘤•毛细胞白血病•脾B细胞淋巴瘤/白血病，未分类•淋巴浆细胞淋巴瘤(LPL)•意义未明的单克隆丙种球蛋白病（MGUS），IgM•Mu重链病•Alpha重链病•Gamma重链病•意义未明的单克隆丙种球蛋白病（MGUS），IgG/A•浆细胞骨髓瘤•孤立性骨浆细胞瘤•髓外浆细胞瘤•单克隆免疫球蛋白沉积病•粘膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤(MALT淋巴瘤)•结内边缘区淋巴瘤（NMZL）•滤泡性淋巴瘤（FL）•儿童型滤泡性淋巴瘤•伴有IRF4重组的大B淋巴瘤•原发于皮肤的滤泡中心淋巴瘤•套细胞淋巴瘤•弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL），NOS•T细胞/组织细胞丰富的大B细胞淋巴瘤•原发于中枢神经系统的DLBCL•原发于皮肤的DLBCL，腿型•EBV阳性的DLBCL，NOS•EBV阳性的粘膜皮肤溃疡•与慢性炎症相关的DLBCL•淋巴样肉芽肿病•原发于纵隔（胸腺）的大B细胞淋巴瘤•血管内大B细胞淋巴瘤•ALK阳性的大B细胞淋巴瘤•浆母细胞性淋巴瘤•原发性渗出性淋巴瘤•HHV8阳性的DLBCL，NOS•伯基特淋巴瘤•伴有11q异常的伯基特样淋巴瘤•高级别B细胞淋巴瘤，伴有MYC和BCL2和/或BCL6重组•高级别B细胞淋巴瘤，NOS•B细胞淋巴瘤，不能分类型，具有介于弥漫大B细胞淋巴瘤与典型霍奇金病之间的成熟B细胞淋巴瘤*T细胞前淋巴细胞性白血病*T细胞大颗淋巴细胞性白血病*NK细胞性慢性淋巴细胞增殖性疾病*侵袭性NK细胞白血病*儿童系统性EB病毒阳性的T细胞淋巴瘤*种痘水疱病样淋巴组织增殖性疾病*成人T细胞白血病/淋巴瘤*结外NK/T细胞淋巴瘤，鼻型*肠道病相关性T细胞淋巴瘤*单型性亲上皮肠道T细胞淋巴瘤（原EATLII型）*胃肠道惰性T细胞淋巴组织增殖性疾病*肝脾T细胞淋巴瘤*皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤*蕈样真菌病*Sézary综合征*原发于皮肤的CD30阳性的T细胞增殖性疾病*原发于皮肤的gamma-delta-T细胞淋巴瘤*原发于皮肤的CD8阳性侵袭性嗜表皮的细胞毒性T细胞淋巴瘤*原发于皮肤的肢端CD8阳性T细胞淋巴瘤*原发于皮肤的CD4阳性小/中间T细胞增殖性疾病*外周T细胞淋巴瘤，NOS*血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤*滤泡性T细胞淋巴瘤*伴有TFH表型的淋巴结外周T细胞淋巴瘤*间变性大细胞性淋巴瘤，ALK阳性*间变性大细胞性淋巴瘤，ALK阴性*隆胸相关间变性大细胞性淋巴瘤*霍奇金淋巴瘤*结节淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤*典型霍奇金淋巴瘤*结节硬化型典型霍奇金淋巴瘤*富含淋巴细胞的典型霍奇金淋巴瘤*混合细胞性典型霍奇金淋巴瘤*淋巴细胞消减型典型霍奇金淋巴瘤*移植后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)*浆细胞增生*传染性单核细胞增多样PTLD*旺炽型滤泡增生型*多形性PTLD*单一形态的PTLD(B-及T/NK-细胞型)*典型霍奇金淋巴瘤类型PTLD成熟T/NK细胞HL和PTLD51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential5分子生物学检测在淋巴瘤诊断和治疗中的意义成熟B成熟T/NKHL/PTLD患者化疗靶向治疗免疫治疗HSCT巩固治疗疗效评价预后分析复发监测微小残留病检测（MRD)准确、特异、敏感、快速、经济适用鉴别诊断危险度分层靶向药物选择疗效评价预后分析复发监测微小残留病检测（MRD)51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential6检测项目基因基因区域试剂盒B淋巴瘤(IGgenes)IGH:(HA,HB,HC,HD,HE)VH-JH和DH-JHIGH：IGHIGK:(KA,KB)V-JIGK：IGIGL:(IGL)V-JIGL:IGT淋巴瘤(TCRgenes)TCRB:(BA,BB,BC)V-J和D-JTCRB：TCRTCRG:(GA,GB)V-JTCRG：TCRTCRD:(TCRD)V-J,D-D,D-J,和V-DTCRD:TCR淋巴瘤检测基因51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential77NHL的各亚型：按发生频率排列（全球9个医学中心，1400例)弥漫性大细胞型（DLBCL）滤泡性淋巴瘤（FL）边缘带，结外（MALT）周围性T细胞型（PTCL）小淋巴细胞（SLL）套细胞型（MCL）原发纵隔大B细胞Burkitt-likeB细胞边缘带NodalT细胞淋巴母细胞型淋巴浆细胞型Burkitt型及其他31%22%8%7%7%6%2%2%2%2%1%2%51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential8DLBCL的发生干细胞前B细胞B1细胞活化的淋巴样母细胞免疫母细胞浆细胞边缘带细胞生发中心淋巴结抗原刺激滤泡母细胞中心母细胞中心细胞生发中心DLBCL非生发中心DLBCL51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential9SeminHematol.2015April;52(2):67–76ClinCancerRes.2016Jan27.DLBCL不同亚型存在不同突变基因51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential10MYD88和CD79B与DLBCL在DLBCL患者中，MYD88基因和CD79B基因突变大部分出现在ABC型的患者伴有该基因突变的DLCBL患者其发病年龄明显高于未突变者，这与ABC型DLBCL患者随着年龄增加该突变发生频率升高一致。BloodCancerJ.2013Sep;3(9):e139.51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential11MYD88L256P可作为WM/LPL的鉴别诊断标志MYD88是一种接头蛋白，在TOLL样受体受到刺激后能够激活NF-KB和JAK-STAT信号通路淋巴浆细胞淋巴瘤(LPL)是具有浆细胞样分化特征的小B细胞淋巴瘤，通常累及骨髓，淋巴结和脾常伴有单克隆丙种球蛋白血症，多数为IgM型，少数为IgG和IgA，其中95%的LPL累及骨髓，同时伴有IgM型单克隆丙种球蛋白血症，被称为华氏巨球蛋白血症（WM）。90％以上的WM患者中存在MYD88L256P位点突变，而其他淋巴增殖性疾病患者以及健康供者中极少出现该突变，因此MYD88-L256P突变有利于WM/LPL与其他Ｂ淋巴细胞疾病相鉴别NEnglJMed.2012;367(9):826-83351,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential12HCL-V占10%的HCL在WHO2016年分类中，归类于脾B细胞淋巴瘤/白血病，未分类与HCL不同之处：高血细胞计数Annex-1，CD25阴性BRAF基因野生型约50%的患者出现MAP2K1突变对PA方案容易产生耐药，恶性程度高NatGenet.2014;46(1):8-10中国B细胞慢性淋巴增殖性疾病诊断专家共识(2014年版)MAP2K1突变位点BRAF、MAP2K1可作为HCL-V的鉴别诊断标志51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential13ClinCancerRes.2014;20(20):5240-54T细胞淋巴瘤所累及的基因改变51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential14中国人群NK/T淋巴瘤常见突变NatGenet.2015Sep;47(9):1061-651,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential15儿童T-ALL相关突变基因JHematolOncol.2015Apr24;8:4251,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential16分子生物学检测在淋巴瘤诊断和治疗中的意义成熟B成熟T/NKHL/PTLD患者化疗靶向治疗免疫治疗HSCT巩固治疗疗效评价预后分析复发监测微小残留病检测（MRD)准确、特异、敏感、快速、经济适用鉴别诊断危险度分层靶向药物选择疗效评价预后分析复发监测微小残留病检测（MRD)51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential17突变基因与DLBCL预后的关系SeminHematol.2015April;52(2):67–76ClinCancerRes.2016Jan27.51,102,153221,221,221153,204,255124,176,170221,210,181255,153,51Confidential18滤泡淋巴瘤淋巴瘤国际预后指数（FLIPI）年龄≥60岁AnnArborⅢ～Ⅳ期；Hb120g/L；乳酸脱氢酶(LDH)＞正常上限；受累淋巴结≥５枚。每个特征一分，根据得到的总分，将患者分为低危（０～１分）、中危（２分）和高危组（３～５分）7个基因的突变状态和临床风险因素的整合可改善接受一线免疫化疗法的滤泡淋巴瘤患者的预后，并且是一种鉴定治疗失败高危风险亚组的有效方法。相关的工具：(9):1111-112251,102,15