新生儿溶血病(HDN)的免疫血液学实验

新生儿溶血病(HDN)的免疫血液学实验第一部份要做好HDN的免疫血液学检查必须具备的相关知识一.HDN的故事(听故事,目的是引起对HDN的重视)辽宁台,08,12,31,9:20.PM,王钢讲故事:十九次怀孕的女人怀宁县,何X,90年,23岁,在当地医院:分娩女婴,次日发黄,紫,诊断不清,死亡产后第3天下身出血,刮宫,贫血,血型B,误输A型血880ml,浑身痛,抽槒状告县医院,获得1万元赔偿以后:反复怀孕19次,每次死胎,流产,出现畏寒,脱发,浑身痛,头疼当地医院看病,诊断不清;被折腾死去活来,倾家荡产最后走投无路,去上海瑞金医院,上海瑞金医院名不虚传,门诊医生几句问诊,就考虑新生儿溶血病(HDN),几项检查就确诊了进一步检查发现:畏寒、脱发、浑身痛、头疼,是产后出血导致垂体功能低下,即“席汉氏综合征”所致医生解释:如果刚开始及时诊断HDN,及时治疗,是可以怀孕生育的;刚患席汉氏综合征时,怀孕分娩,席汉氏综合征是可以治愈的由于错失良机,现在:不但垂体已萎缩,已丧失治疗席汉氏综合征的机会,必须终生每天吃药;而且,子宫萎缩,终身不育二、HDN的定义“新生儿溶血”与“新生儿溶血病”新生儿溶血:综合征，地贫，G6PD↓，遗传性球形RBC增多症…新生儿溶血病：特指母婴血型不合所致.意义：优生优育、妇幼保健.三.母婴血型不合RBC血型：32个系统，300多种Ag可以引起HDN者:常见：ABO（母O，儿非O），Rh（母D-，儿D+），少见：MN，Ss，kell，Duffy，kidd，Lewis……O（OO）RhD阴性（dd）A（AA，AO）IgG胎RhD阳性（DD，Dd)抗-A，母抗-D出血A(AO)，OD阳性(Dd)，D阴性母父儿了解随机婚配夫妻血型不合妻夫O1/3A1/3B1/3AB1/10O1/3A1/3B1/3AB1/10随机婚配夫妻ABO血型不合:2/9随机婚配夫妻Rh不合:RhD(-)3‰,妻如RhD(-),遇到夫也RhD(-),概率相当于买彩票中500万大奖夫妻Rh几乎100%不合四.发病过程1.胎母出血2.免疫产生的抗体是IgG,分子量小,可以通过胎盘3.O型人(妻)容易发病4.RhD致敏血量：5.注意RhD(-)女性“婚前”因人流,可能产生抗体“未婚”女性人流前查RhD，五.临床特点1.ABOHDN占85.3%;夫A（49.6%）＞夫B（35.7%）与胎次无关:①胎儿血型O？②儿RBCAg成熟？③分泌型血型物质中和？④IgG亚类？2.RhHDN占14.6%，常为D，其次E第二胎发病（注意输血，人流史），因Rh首次免疫常6个月到峰值，第一胎逃逸，一胎比一胎发病早，严重第二部份HDN的免疫血液学检查一.产前检查试验(一)对象：(二)时间：(三)实验：1、采血：2.妻,夫干管分离血清妻,夫抗凝血分离红细胞,洗3次,配为5%悬液3.检查项目(1)妻、夫:①ABO②RhD(2)妻血清IgGABOAb及效价2ME中和IgMABOAb：⑤中和血清100ul,加夫红细胞悬液50ul:作聚凝胺如果有凝集,妻中和血清倍比稀释,加夫红细胞悬液,作聚凝胺或AHG试验,测IgGABO抗体效价(四)注意:1.夫未来检查,或夫为AB型,怎么办?2.可用试管法,也可用HDN卡试验3.HDN产前检查不属急诊4.IgGABO抗体太高者,慎报!:(五)产前检查报告格式姓名——，胎次——，妊娠月——，采血时间——，送检单位——一、血型ABORh妻夫二、妻血清（含/无）免疫性ABO抗体，（抗-A/B）效价——三、妻血清抗体筛选（+/-）;抗（）效价——(六)产前检查结果分析1.试管法有IgGABOAb43.1%2.试管法IgGABOAb效价≤64占66.8%，≥512占5.6%,≤3264129/256512-1024＞1024HDN%2.610.421.338.942.93.Rh，抗-D＞32，便可能生成严重HDN3.与产前HDN检查有关的几个临床问题(1)妊期抗体突然猛升、猛降(2)ABO,Rh不合同时存在,ABO不合有”保护”作用,(3)“外祖母”效应,RhHDN可第一胎发病二.产后检查(一)采样:(二)实验1.ABO，Rh（D）检定2.直抗：3.游离抗体4.放散试验热放散注意:1.对临床,三项试验(直抗,游离,放散)只报告结果(阴/阳性),但要按上面格式记录存底2.三项试验(直抗,游离,放散)均可用卡操做,(三)三项试验:试管法结果分析1、HDN：直抗+88.5%游离+84.2%放散+64.7%三项全阳性35.3%2、直抗假阴性/假阳性（华通氏胶污染）3、儿如为A型(1)游离OC（+）：BC（+）：AC(+)AC（+）,BC（+）(2)放散：OC（+）；BC（+）：！AC（+）:AC（+）,BC（+注意：游离（+）：表明血浆中有Ab放散（+）：表明Ab粘上RBC，4.儿如为B型，同样方式分析结果.三项试验结果综合分析直抗游离放散+++有Ab，致敏儿RBC+--直抗假阳性?++-有Ab（可能Ag弱）未粘RBC-++直抗假阴性，有Ab，粘RBC，血清中残余--+直抗假阴性，Ab全粘RBC+-+有Ab,全粘RBC-+-有Ab,未粘RBC,(四)产后患儿诊断HDN的注意事项1.免疫血液学实验,只是为临床提供参考2.实验室技术员,对HDN,无论产前、或产后,只能是“看见什么,报告什么”,3.HDN是血型抗体引起,患儿体内的抗体是母亲给他的,4.如果临床只送来可疑患儿标本,一定要求送来母血标本第三部份HDN的其它相关问题一.HDN研究1.产前胎儿ABO，Rh血型检定2.夫RhD纯合子/杂合子检定3.妻免疫性抗体IgG亚类测定4.胎儿ABO分泌/非分泌型产前预测5.胎母出血状态及与HDN发病关系研究6.少数民族HDN研究:7.特别要指出的是:(1)ABOHDN预测率太低,(2)对HDN检测方法,或试剂的研究,不是要求提高灵敏度,8.关于HDN文章花团锦绣,实际并不代表国内HDN临床检测水平:新生儿血小板减少症母婴血小板抗原(HPA)不合,发病机制和HDN相同,产前/后静脉Ig疗效好国内空白,国外研究红火填补国内空白