第三章药物的杂质检查(二)_药物分析与检验技术

三铁盐检查法第一法硫氰酸盐法(Ch.P,USP)1.原理：红色2.操作:供试品标准品溶液样品规定项下一定量比色管,加水至25ml稀HCl4ml过硫酸铵50mg加水至35ml加30%硫氰酸铵溶液3ml加水至50ml立即比色三铁盐检查法观察3．讨论(1)试剂的作用a.稀HCl---防止Fe3+水解---避免弱酸盐如醋酸盐,磷酸盐干扰。---以50ml加稀HCl4ml为宜，此时生成淡红色最显著。三铁盐检查法b.过硫酸铵（NH4）2S2O8作用—氧化剂---氧化供试品中Fe2+→Fe3+---可防止由于光线使硫氰酸铁还原或分解褪色三铁盐检查法(2)最适检出浓度---标准铁溶液10g/mlFe3+，由硫酸铁铵配制---最适检出浓度：10-50gFe3+/50ml三铁盐检查法(3)供试品管和对照管颜色不一致时---加正丁醇或异戊醇提取后再比色三铁盐检查法第二法巯基醋酸法(BP)原理：巯基醋酸(HSCH2COOH)还原Fe3+为Fe2+，在氨碱性溶液中作用生成红色配位离子，与一定量标准铁溶液经同法处理后产生的颜色比较。三铁盐检查法第二法巯基醋酸法(BP)特点：与硫氰酸盐法相比,灵敏度高,但试剂较贵.三铁盐检查法四重金属检查法1.重金属的概念工业上指比重在5以上的金属；重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属.如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等.四重金属检查法以Pb为代表.在药物生产中遇到铅的机会较多.铅易蓄积性中毒显色剂溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中产生沉淀的药物用硫化钠为显色剂.溶于水、稀酸、乙醇的药物以硫代乙酰胺为显色剂,pH为3.0~3.5.四重金属检查法第二法（炽灼后的硫代乙酰胺法）适用于含芳环,杂环及水,稀酸,乙醇中难溶的有机药物.第一法（硫代乙酰胺法）:适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物.是最常用的方法.四重金属检查法第三法（硫化钠法）:难溶于稀酸但能溶于碱性溶液,如巴比妥类、磺胺类等.第四法:又称微孔滤膜法.适用于含2-5g重金属杂质检查.四重金属检查法第一法硫代乙酰胺法适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物，要求在实验条件下溶液澄清、无色，对检查无干扰，或经处理后对检查无干扰.四重金属检查法1原理硫代乙酰胺在弱酸性（pH3.5醋酸盐缓冲液）条件下水解产生H2S,与重金属离子（Pb2+）生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液,与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较,判断供试品中重金属的限量.四重金属检查法四重金属检查法2操作方法样品管对照管四重金属检查法观察3．讨论①标准铅溶液用Pb(NO3)2先配制贮备液,为了防止铅盐的水解加入硝酸.临用前稀释成10g/ml.最适检测范围10-20gPb2+/27ml四重金属检查法②硫代乙酰胺试液H2S试液：恶臭和毒性;不稳定;易被空气氧化而析出硫;浓度难以控制.改用硫代乙酰胺为显色剂（95版起）硫代乙酰胺在实验条件下水解产生H2S,与重金属离子反应.四重金属检查法③溶液的pHpH在3.0~3.5时,呈色较完全.酸度增大,呈色变浅甚至不呈色.用pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液的pH.若供试品用强酸溶解，在加入硫代乙酰胺前，加氨水至中性.四重金属检查法④供试品溶液有颜色时的处理方法重金属检查时常用外消色法来消除供试品溶液颜色的影响.外消色法不能使供试品管颜色与对照品管颜色相同时,可使用内消色法.四重金属检查法a.外消色法ⅰ.在加硫代乙酰胺试液之前用稀焦糖溶液调节对照管颜色与样品管颜色一致.四重金属检查法ⅱ．用对测定不干扰的指示剂调节对照管颜色与样品管颜色一致.b内消色法（与氯化物检查时的处理方法类似）四重金属检查法⑤干扰物的排除方法在弱酸性溶液中氧化H2S析出S,影响检查.a.供试品中的微量Fe3+加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+,消除Fe3+的影响.如：葡萄酸亚铁中重金属的检查四重金属检查法b.大量的Fe3+____即样品本身为Fe3+Fe3++HCl→[HFeCl6]2-（黄色）用乙醚提取后，水层加氨试液调至碱性，残存的Fe3+可用KCN掩蔽，第三法检查（Na2S试液）.如：枸橼酸铁铵的重金属检查四重金属检查法c.药物本身能生成不溶性硫化物—可加入掩蔽剂消除干扰.如：葡萄酸锑钠或硫酸锌中重金属的检查--加掩蔽剂KCN，使Sb、Zn形成稳定的配合物后，用第三法（Na2S）.四重金属检查法第二法（炽灼后的硫代乙酰胺法）适用于在水、稀酸或碱、乙醇中难溶，或与金属离子形成配位化合物的有机药物，如具有芳环、杂环的有机药物中重金属的检查按中国药典的第二法检查.四重金属检查法1.原理重金属与药物的芳环、杂环形成较牢固的共价键,不能直接被检出。供试品要炽灼破坏后,加硝酸加热处理，重金属游离后,再按第一法检查.四重金属检查法2.操作方法缓缓炽灼放冷H2SO40.5-1.0ml供试品炭化加热HNO3500-600℃H2SO4除尽放冷完全灰化蒸干HCl2ml水15ml中性按第一法检查蒸干氨试液注意：做空白试验四重金属检查法3．讨论1）炽灼温度：500-600℃2）HNO3处理后，必须蒸干，除尽NO3）含钠或氟的有机药物改用铂坩埚或硬质玻璃（玛瑙）蒸发皿.例:盐酸氟奋乃静中Pb2+四重金属检查法第三法硫化钠法用于不溶于稀酸或在稀酸中难溶的药物但能溶解于碱性溶液的重金属的检查.如:磺胺、巴比妥的检查四重金属检查法1.原理在碱性介质中，以Na2S为显色剂,Pb2+与S2－作用生成PbS的混悬液,与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较,判断供试品中重金属的限量.四重金属检查法2.方法取供试品加NaOH5ml和水20ml使溶解后加Na2S5滴,摇匀,与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较.四重金属检查法3.讨论Na2S对玻璃有腐蚀性，久置产生絮状物，应临用新配四重金属检查法第四法微孔滤膜法适用于重金属限量低的药物,2-5g1.原理同第一法2.方法比较滤膜上的铅斑四重金属检查法3.讨论供试品溶液有色或浑浊,应进行预滤,直至滤膜无污染.原理同第一法使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上(铅斑)提高检查的灵敏度.硫代乙酰胺0.01～0.02mgPb2+/27ml3～3.5检测范围pH试剂适用范围第一法第二法第三法第四法NaOH3～3.50.002～0.005mg硫化钠硫代乙酰胺可溶于水,稀酸和乙醇的药物不溶于水,稀酸和乙醇的药物溶于碱的药物2～5g重金属、有色溶液白田道夫法(JP)古蔡氏法(Ch.P,JP,BP)Ag-DDC法(Ch.P,JP,USP)奇列氏法(BP)五砷盐检查法（一）古蔡氏法（Gutzeit）1．原理——ChP,BP,JP利用金属锌与酸作用产生新生态的氢,与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢,遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑,与同条件下一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较,判断砷盐的含量.五砷盐检查法反应式如下：五砷盐检查法2.操作1）装置：检砷瓶：砷化氢发生瓶A导气管B配套具孔塞CABC五砷盐检查法2）方法五砷盐检查法2操作方法④加锌粒2g,立即将装妥的导气管B密塞与A瓶,置25-40℃水浴中,反应45分钟,取出溴化汞试纸,比较砷斑.①导气管B中装入醋酸铅棉花（60mg）②再于旋塞C的平面上放一片溴化汞试纸③样品、对照品分别置于检砷瓶中,加盐酸5ml与水21ml,再加2.5%碘化钾试液5ml与0.3%酸性氯化亚锡试液5滴,在室温放置10分钟五砷盐检查法砷斑3．讨论1)试剂的作用a.KI的作用-还原剂五价砷反应速度比三价砷反应速度慢,加入KI使五价砷还原为三价砷,以增大生成AsH3的速度.五砷盐检查法b.酸性SnCl2的作用(1)还原剂：(表现在3方面)①As5+→As3+五砷盐检查法进而促进AsH3不断生成稳定的络离子②将KI被氧化生成的I2再还原为I-五砷盐检查法五砷盐检查法③SnCl2与Zn粒表面形成Zn-Sn齐——起去极化作用,使氢气均匀而连续地发生.H2阻碍酸与锌粒反应Zn超电压0.70Sn超电压0.50SnCl2C.PbAc2棉花的作用排除硫化物的干扰.五砷盐检查法d.HgBr2试纸的作用与AsH3作用较HgCl2灵敏，但所成砷斑不够稳定，反应中，应保持干燥和避光，并立即比较。五砷盐检查法2)反应最佳条件Zn粒的大小及用量大小：能通过1号筛（850~2000m）用量：约2g所用Zn粒应不含砷.五砷盐检查法试剂浓度：KI试液2.5%酸性SnCl20.3%供试液酸度2mol/L盐酸标准砷溶液1g/ml反应时间及温度25~40C,反应40min.五砷盐检查法排除方法：加入浓硝酸处理3)古蔡氏法中干扰物的排除(1)供试品是硫化物,亚硫酸盐,硫代硫酸盐五砷盐检查法(2)供试品是铁盐（Fe3+）消耗还原剂（KI，SnCl2）,并能氧化砷化氢。排除方法：先加酸性SnCl2试液使Fe3+→Fe2+五砷盐检查法如枸橼酸铁铵中砷盐的检查(3)共价键结合的砷化物排除方法：要先进行有机破坏——酸破坏法和碱破坏法五砷盐检查法碱破坏法a加入氢氧化钙500-600C灼烧例：酚磺酞b加入无水碳酸钠碱融例：苯甲酸钠酸破坏法加稀硫酸与溴化钾例：葡萄糖中砷盐检查五砷盐检查法(4)含锑药物不用古蔡氏法改用白田道夫法.五砷盐检查法4)优点、缺点优点：灵敏度高，1gAs即被检出.缺点：Sb干扰，SbH3灰白色五砷盐检查法2.白田道夫法(Betterdorff)1)原理SnCl2在HCl中能将As盐还原为棕褐色的胶态砷,与一定量的标准砷溶液按同法处理后进行比较,判断供试品中砷盐的限量.2As3++3SnCl2+6HCl2As+3SnCl4+6H+深褐色与标准溶液同法处理比较五砷盐检查法2)优点、缺点优点：不受Sb干扰缺点：灵敏度低——20gAs2O3/10ml加入少量HgCl2，灵敏度提高至2gAs2O3/10ml五砷盐检查法AgSSCNC2H5C2H5Ch.P,USP收载,可用于限量检查和微量砷盐的含量测定.3.二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）五砷盐检查法原理：第一步：同古蔡氏法生成砷化氢第二步：砷化氢还原Ag-DDC的吡啶溶液,产生红色的胶态银,与同条件下一定量标准砷溶液所呈颜色用目视比色法或在510nm波长处测定吸收度,进行比较判断。五砷盐检查法2)优点、缺点优点：a灵敏度高0.5gAs/30mlb重现性好，仪器测定cSb干扰小缺点：吡啶恶臭，用三乙氨-氯仿代替，但灵敏度降低.五砷盐检查法4.奇列氏法（次磷酸法）1)原理在盐酸酸性溶液中，次磷酸还原砷盐为棕色的游离砷，与标准砷溶液同法处理后比较颜色五砷盐检查法NaH2PO2+HCl→H3PO2+NaCl3H3PO2+H3AsO3→3H3PO3+2As↓BP收载五砷盐检查法2)优点、缺点优点：不受S2-，SO32-，Sb，Hg，Ag干扰缺点：灵敏度低.五砷盐检查法Sb≤100ugSb≤500ugSb500ugZn、HClKI、SnCl2HgBr2Zn、HClKI、SnCl2Ag-DDCSnCl2HCl黄棕色砷斑红色胶态银棕褐色胶态砷方法适用范围试剂结果古蔡氏法Ag-DDC法白田道夫法氯化物硫酸盐铁盐重金属砷盐适宜检测浓度0.05～0.08mg/50ml0.2～0.5mg/50ml0.01～0.05mg/50ml0.01～0.02mg/27ml0.002mg/33ml标准溶液氯化钠10g/ml硫酸钾100g/ml硫酸铁铵10g/ml硝酸铅10g/ml三氧化二砷1g/ml沉淀或显色剂硝酸银氯化钡硫氰酸铵硫代乙酰胺或硫化钠溴化汞试纸Ag-DDC试剂10ml稀硝酸2ml稀盐酸4ml稀盐酸2ml醋酸盐缓冲液5ml盐酸指药品在规定的条件下,经干燥后所减失的量,以百分率表示.干燥失重的内容物主要指水分,也包括其它挥发性物质（如乙醇）.六干燥失重中国药典采用的测定法常压干燥法干燥剂干燥法减压干燥法六干燥失重（一）常压恒温干燥法适用于受热较稳定的药物干燥温度一般为105℃供试品平铺在称量瓶中的厚度一般不超过5mm（二）干燥剂干燥法适用于受热易分解或挥发的药物干燥剂