细胞生物学实验一.显微镜的使用

细胞生物学实验生命科学学院项黎新、董伟仁13958108940（688940）[e-mail]一．油镜和测微尺的使用及细胞形态观察二．叶绿体分离及荧光镜检（密度梯度离心法）三．线粒体的分离及活性染色（差速离心法）四．细胞化学（Feulgen反应）五．细胞融合六．小鼠染色体标本制作及观察七．植物细胞骨架的制作及观察八．自主实验实验内容安排一．实验报告（70%）二．平时表现（30%）考试成绩课程特点与期望•没想象中简单•努力思考、多动脑•会分析、会设计、会解决实验一油镜和测微尺的使用及细胞形态观察一、实验目的掌握油镜和测微尺的使用方法，学会用显微尺观察和测量细胞，并按比例绘制细胞大小示意图。二、实验用品1.器材：普通光学显微镜，台尺，目尺；2.材料：兔脊神经节（示高尔基体），鼠肝（示线粒体）等；3.试剂：香柏油，二甲苯。显微镜组成：1.光学系统：物镜、目镜和照明装置2.机械装置：镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等物镜镜头：40/0.70(40物镜放大倍数；0.70镜口率)160/0.17(160镜筒长度；0.17盖玻片厚度)显微镜使用原则•先低后高•先近后远•先粗后细油镜的使用1.先用低倍镜观察标本，把油镜下所要观察的移至视野中心，再换高倍镜观察（用细调调节器调节）。2.旋离高倍镜，在标本上滴一滴香柏油，换油镜镜头，继续调节细调即可观察。3.观察完毕后，旋离油镜镜头，下降载物台，先用干擦镜纸擦1～2次，把大部分的香柏油擦掉；再用二甲苯湿润的擦镜纸擦2～3次；最后用干擦镜纸擦1～2次。同样方法擦清标本。注意擦镜头时要顺镜头直径方向擦，不要沿着镜头的圆周擦。三、实验原理（测微尺的使用）•测微尺由目尺和台尺组成。目尺是一块圆形玻璃片，上面刻有等距离的刻度，分成50～100格。实际刻度因不同物镜的放大倍数以及镜筒长度而不同，需要台尺校定。台尺则是一块特制的载玻片，中央封着一把刻度标尺，其每个刻度为0.01mm(10m)。link每个大格又可分为10个小格，每小格的实际长度为0.01mm总长0.1mm镜台测微尺总长1mm共分为10格四、实验步骤1.用台尺标定目尺（10倍或40倍物镜）：将目尺装入目镜，有刻度面朝下。再将台尺固定在载物台上，小心移动台尺和转动目尺，使两尺最左边的直线愈合，然后由左向右找出两尺另一重合的直线。记录两次重合线间目尺和台尺的格数，按公式计算出目尺每格的长度（m)：台尺格数目尺格数取下台尺，换上标本观测。10m目尺每格长度(m)＝2.观察各种切片标本，注意细胞的形态结构、核的形态及数量。3.用目尺测量细胞及核的大小（横距、宽距及厚度），每一类被测物测3个数据，最后取平均值。4.按比例画出细胞大小的示意图。思考题：•低倍镜的镜口率为什么不能过大？•为什么光学显微镜的分辩率极限是0.2m？•擦镜头有几种方法？你认为哪种更合适？理由是什么？•理想的用于擦镜头的试剂应具有哪些特点？