中药指纹图普研究

中药指纹图谱研究马立娟1中药指纹图谱的含义及重要性2中药指纹图谱的测定方法3存在的问题及前景展望1中药指纹图谱的含义及重要性随着我国加入WTO，被誉为“国粹”的中药越来越被制药界所看好。但是，对中药而言，应用上千年，但仍没摆脱“丸、散、膏、丹”难辨的局面，并且长期以来我们未能从根本上解决质量标准化问题，使中药跨出“国门”受到了阻碍。近年来，我国科研人员经过潜心研究，终于找到了控制中药内在质量标准的办法，中药指纹图谱(fingerprintoftraditionalChinesemedicine)技术。1）含义：指纹图谱最初来源于犯罪学和法医学,依据每个人的指纹（如：拱形、环形和螺形）在微小细节构造上的不同,可以鉴定出不同个体，大大提高了侦破率。中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，借助计算机和现代分析技术，可以将中药的特性和有效成分采用色谱图或光谱图的形式描绘出来，标示其化学特征，使每味中药都拥有如人的指纹一样的标准图谱。它是一种综合的，可量化的鉴定手段，是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。2）重要性目前，指纹图谱已成为国内外公认的鉴别中药品种和评价中药质量的最有效手段，也是中药现代化的重要标志。2000年，美国FDA允许草药保健品申报资料可以提供色谱指纹图鉴别资料[1]。德国药用植物学会、加拿大药用及芳香植物学会、英国草药典和印度草药典也接受色谱指纹图谱。2中药指纹图谱的测定方法（1）薄层色谱法(TLC)（2）高效液相色谱法(HPLC)（3）气相色谱法(GS)（4）高效毛细管电泳法(HPCE)（5）高速逆流色谱法（HSCCC）（6）X-射线衍射法（7）红外光谱法(IR)（8）紫外光谱法(UV)（9）核磁共振法(NMR)（10）质谱法（MS）（11）其他方法（OTHERS）（1）薄层色谱法(TLC)TLC的特点是操作简便、经济、分析速度快、结果直观形象、应用范围广泛。谢培先生等对人参、西洋参、三七，在规范操作条件下得到的TLC荧光彩色图像，在同一板上形象地展示了3个样品的异同。而后谢培山、颜玉贞又使用CAMAG系列薄层扫描仪对黄连中的黄酮类成分等进行了薄层色谱指纹分析。李彩君等以高良姜素为对照品,建立了高良姜药材的薄层色谱定性鉴别。（2）高效液相色谱法(HPLC)HPLC的特点是分离效果好、精密度高、准确性好、分析速度快。GulnurToke等人对土耳其药用植物阔叶椴（TiliaPlatyphylos）中的花、叶以及苞叶中的黄酮类使用反相HPLC进行分析，建立了一种快捷准确的质量检测方法。并且将结果与其他同属的2种土耳其常见植物作比较。结果表明，同属不同种植物的黄酮类成分有其特征性的HPLC色谱图，可用于粗药品的鉴定。JamalFaghihi等人应用反相HPLC技术对大豆的各极性提取物进行了检测，并获得了一系列具有代表性且重现性较好的指纹图谱。（3）气相色谱法(GS)GC的特点是高效、灵敏、样品用量少、分析速度快，用于中药挥发性成分的分离和鉴定。李秀珍,高海等用GC法测定鱼腥草注射液挥发性成分,建立了鱼腥草注射液指纹图谱分析法。吴忠等人研究了仲景胃灵片及其原料药的低级性提取部分的气相色谱,获得其可靠的指纹特征谱图。（4）高效毛细管电泳法(HPCE)HPCE的特点是分离模式多、效率高、速度快、适用范围广、样品用量少、灵敏度高。王寅,乔传等深入研究了不同居群大青叶的理化特征，表明异地栽培的大青叶药材的酸性提取部位的化学成分及含量有很明显的差异，跟据电泳图特征峰的迁移时间和峰面积能有效地鉴别不同居群大青叶药材。王钢力等用HPCE的MECC的分离模式,测定了18个卷柏属植物样品的乙酸乙酯提取物,以相对峰面积和相对迁移时间为参数,建立了18个样品的毛细管电泳指纹图谱。（5）高速逆流色谱法（HSCCC）HSCCC的特点是操作更为简便，容易掌握。袁黎明等通过HSCC研究了虎杖、茜草及决明子，还用HSCC分离、制备黄柏中的生物碱。（6）X-射线衍射法X-射线衍射法的特点是指纹性强，图谱稳定可靠。郑笑为等应用粉末X衍射Fourier谱分析法建立了珍珠粉、海水珍珠、淡水珍珠的指纹图谱,并对珍珠质量进行了评价。王树春等人采用X衍射Fourier谱分析法比较识别了天然熊胆与引流熊胆汁干燥品、熊胆与伪品的区别（7）红外光谱法(IR)孙素琴等采用红外指纹图谱结合计算机辅助比对的技术,能快速地对道地药材进行质量鉴别,适合大量样品的快速鉴别研究,为道地药材的质量鉴别研究提供了科学理论依据。（8）紫外光谱法(UV)石春新等总结了近几年来紫外光谱在中药材真伪鉴别中的应用。（9）核磁共振法(NMR)NMR的特点是具有高度的特征性和重现性。王思宏等通过对NMR的研究，获得了野生和栽培高山红景天有效成分红景天甙的特征核磁共振指纹图谱,并以此为依据对高山红景天进行真伪鉴别和质量评价。（10）质谱法（MS）袁湘林等利用基体辅助激光解析电离飞行时间质谱对黄芪及其伪品进行了分析辨别。（11）其他方法（OTHERS）中药指纹图谱的研究除上述方法外，还有色谱连用技术及DNA指纹图谱等。目前最常用的色谱连用技术是高效液相谱(或毛细管电泳)/二极管阵列检测器/质谱/质谱联用方式(HPLC或CE/DAD/MS/MS)所得的多维指纹图谱。陶钧等获得了天麻基因组DNA的RAPD扩增优化条件和适合于天麻遗传分化研究的DNA指纹图谱。3存在的问题及前景展望在众多的分析方法中,色谱法是主要的手段,尤其是TLC、HPLC和GC色谱技术。TLC是一种开放系统,外界影响因素较多,必然增加了实验的难度；HPLC中色谱峰的定位受很多因素的影响，一般色谱峰用其保留值来定位，虽然色谱实验条件是控制保留值的主要因素，但也有许多非色谱技术（比如操作因素）对其产生影响。另外中药来源复杂，掺伪严重，即使同种正品也会因生长地域、采集时间、加工和存储条件不同而引起组分和含量的变化。因此中药本身的复杂性和测定方法的易变性对保证图谱较好的稳定性、可靠性、重现性有很大的难度。因为指纹图谱本身的特点是整体性和模糊性，所以其共有峰和特异峰仅靠人眼难以确定。而利用计算机模型和模糊数学的方法,可以比较好的解决这一问题。这就要求我们多学科协同开展指纹图谱研究，即用多学科交叉综合技术手段对中药中复杂成分质量的稳定性进行评价的计算机辅助分析检测方法。并在中药指纹图谱数据积累的基础上建立信息数据库，使中药质量控制管理更加科学化，现代化，规范化。如今，中药指纹图谱能鉴别中药的真伪已是一个较为普遍的共识。中药指纹图谱的研究也成为近年来的研究热点,并引起了许多科研单位及药品生产企业的高度重视。随着各项生产技术及分析测定手段的发展，采用指纹图谱有望成为中药质量控制的标准方法,在中药现代化过程中发挥着重要的作用。中药指纹图谱作为一种更为合理更有发展潜力的控制模式，必定能标准化、系统化标、规范化中药质量，使我们的“国粹”走出国门，走向国际市场！参考文献[1]ECRDofFDA.GuidanceforindustryBotanicalDrugproducts(Draftguidance)[s].2000[2]XiePeishan,YanYuzhen.HPTLCFingerprintIdentificationofGinseng[J].HighResolutionChromatography﹠ChromatographyCommunication,1987,10(11):607[3]XiePeishan,YanYuzhen.ApplicationofHPTLCfingerprintAnalysistoStabilityEvaluationofGinsengPreparation[J].JournalofPlanarChromatography-ModernTLC,1988,1(3):258[4]OptimizationofTLCofProtoberberineAlkloidsandFingerprintValuationoftheCoptidesRhizome.J.ofPlannarChromatography[J].ModernTLC,1992,5(5):302307[5]李彩君，林巧玲，谢培山等.高良姜中黄酮类成分薄层色谱指图谱鉴别[J].中药新药与临床药理，2001，12(3)：183.[6]GulnurToker.ComparativeevaluationoftheflavonoidcontentinofficinalTiliaeflosandTurkishlimespeciesforqualityassessment[J].PharmaceuticalandBiomedicalAnalysis,2001,26:111-121[7]JamalFaghihi.Reproducibilityofthehighperformanceliquidchromatographicfingerprintsobtainedfromtwosoybeancultivarsandaselectedprogeny[J].ChromatographyA,2001,915:61-74[8]李秀珍,高海,刘海静.鱼腥草注射液指纹图谱分析方法的研究[J].西北药学杂志,2002,17(4):154-155.[9]吴忠.仲景胃灵片GC指纹图谱研究[J].中药材,2001,24(3):196-197[10]王寅,乔传卓，尹茶.高效毛细管电泳法用于不同居群大青叶药材的鉴别[J].中草药,2003,31（7）:547-549[11]王钢力，戴忠，鲁静，等.11种卷柏属药用植物HPCE指纹图谱的研究[J].中成药，2002，7(24):489-491[12]袁黎明，李本发，王东，等.茜草、虎杖及决明子的高速逆流色谱研究[J]天然产物研究与开发，2002，14（1）:57-59[13]郑笑为等.中药材珍珠的X衍射Fourier谱研究.药物分析杂志,1999,19(4):246～250[14]王树春等.中药材熊胆的X-衍射Fourier谱分析[J].中草药2000,31(3):214[15]孙素琴,袁子民,白雁.红外指纹图谱与计算机辅助解析技术鉴别山药的道地性[J].计算机与应用化学,2002,9(1):77)80.[16]石春新,周晓英,田树革.紫外光谱在中药材真伪鉴别中的应用[J].基层中药杂志,2002,16(2):51.[17]王思宏,金香淑,姚艳红,等.野生和栽培高山红景天的核磁共振指纹图谱的研究[J].延边大学学报（自然科学版），2001,27（4）:274）276[18]袁湘林等.基体辅助激光解析电离飞行时间质谱用于中草药黄芪的鉴别的研究.药物分析杂志,2001,21(1):7[19]陶钧,罗志勇,刘水平,等.RAPD条件优化及天麻基因组DNA多态性分析[J].生命科学研究,2005,(2):57-62谢谢！