2.2.2-(公开课)动物细胞融合与单克隆抗体-(2)

(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交过程示意图温故知新：最新考纲高频考点1.动物细胞培养和核移植技术Ⅰ2.动物细胞融合与单克隆抗体Ⅱ结合基因工程、细胞工程等知识，综合考查单克隆抗体的制备方法灭活病毒、PEG、电激等①诱导融合的方法？③细胞融合的标志？三种AA、AB、BB（A、B）3、过程：②为什么灭活的病毒能作诱导剂？核融合④融合后细胞的类型？灭活：丧失感染性保留融合活性1、概念：2、原理：细胞膜的流动性4、比较动、植物体细胞杂交：一、动物细胞融合:5、意义、应用：A细胞B细胞比较项目原理相关酶诱导融合的手段意义用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性细胞的全能性纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动、聚乙二醇克服远缘杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，还有灭活的病毒获得杂交细胞、制备单克隆抗体比较动、植物细胞杂交技术【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）A.离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（）A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息B.能无限增殖C.可形成新个体D.培养过程会贴壁【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（）A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞BBA抗体：浆细胞分泌的能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。二、单克隆抗体B淋巴细胞效应B细胞记忆B细胞分化1、抗体的传统生产方法：从血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且特异性差、灵敏度低。多种效应B细胞动物体内多种抗体抗原读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。2、单克隆抗体的概念•单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？②会有几种融合细胞？③杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？④如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。克隆化培养、抗体检测4、单克隆抗体的应用1、诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。2、治疗疾病和运载药物主要用于癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物单抗导向，药物为弹头单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来:【例1】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞A【例2】某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家却能够以该小鼠为实验材料获得抗某种病原体的高纯度单克隆抗体，这是因为()A．小鼠体内只有一种抗体B．小鼠体内只有一种B淋巴细胞C．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只产生一种杂交瘤细胞D．可以通过克隆培养法和抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞D(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B是取自小鼠脾脏内的细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。(2)d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。(3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是，其特点是_________________________________________。效应B抗原细胞融合聚乙二醇灭活的病毒选择性3既能无限增殖又能产生特异性抗体杂交瘤细胞(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________（5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。特异性强、灵敏度高、可大量制备有丝无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境对下面制备单克隆抗体的过程示意图的叙述不正确的是()A．①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B．④中的筛选是通过抗原、抗体反应进行C．②促进细胞融合的过程可以利用聚乙二醇作介导D．⑤可以无限增殖A