QTRAP扫描方式

QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介3200、4000QTRAP™LC/MS/MSsystemIonproductionIontransportIonfilteringIonprocessingIonfiltering•Q3canbeusedasquadrupoleorasalineariontrapIondetection2QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介Principleofalineariontrap-trappingCXPRadialTrappingEXBAxialTrappingAxialTrappingRadialTrappingIonstrappedforaspecifiedfilltime(2-500ms)3QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介Principleofalineariontrap-scanningsimultaneouslyRadialTrappingRampEXBAxialTrappingRadialTrappingAuxiliaryACIonsscannedoutveryfastlyRampedQ0trappingwillincreasesensitivity4QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介Principleofalineariontrap–MS/MSRadialTrappingAxialTrappingTrappingTrappingAxialAxialRadialTrappingMS/MSwithResonanceExcitation5QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介QTRAP离子光路：IontrapMSIontrapMS1、在串联四极杆的基础上，将Q3设计成线性离子阱2、Q2中实现第一次的Fragmentation，进入Q3分析——空间串联空间串联3、Q3的离子阱功能，可以进一步进行Frag/scan……——时间串联时间串联6扫描方式非常丰富！7QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介QTRAPTM独特的扫描功能•增强型扫描1.增强型全扫描，EMS2.增强型产物离子扫描，EPI3.增强型多电荷分离扫描，EMC4.增强分辨率型扫描，ER•时间延迟碎裂扫描，TDFTimeDelayedFragmentation8QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介QTRAP：增强全扫描功能的原理阱Q3的Trapping+q0Trappingq0Q1q2Q3对于低含量的组分，Q0Trapping非常有效Tips:EMS时，一般不用Q0TrappingEPI、ER、TDF、MS3…，Q0Trapping会使信号提高显著9QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EnhancedMSScanmodesQ1ScanEMCEnhancedMSScan4000amu/s1000amu/s250amu/sEnhancedResolutionScan250amu/s10QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EnhancedMS(EMS)11QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介©2007AppliedBiosystems阱扫描方式参数的设置12©2007AppliedBiosystemsQTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介13QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介14QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介15QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EnhancedMultipleChargeSeparation,EMCLITIQ1Q1IQ2Q2IQ3IQ3EffectiveAxialPotential3+2+1+IonkineticenergyAxialPosition16QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EnhancedMultiplyCharged,EMC17QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EMC的参数设置：MCSBarrier：～10V，屏蔽掉1＋离子＞20V，屏蔽掉2＋离子Q3Empty：Q3清空或屏蔽时间时间↑，则离子完全屏蔽时间↓，则离子不完全屏蔽18©2007AppliedBiosystemsQTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EMCexperiment：a-Casein，off-lineNanoSpray，1pmol/ul1＋EMSEMC2＋2＋19QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EnhancedResolution,ER20QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介21QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EnhancedResolution,ER22QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EnhancedMS/MSScanmodesProductIonScanTDFEnhancedProductIonScan23QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EnhancedProductIon,EPI24QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介EPI25AsiaApplicationSupportCenterTimeDelayedFragmentation，TDF时间延迟碎裂扫描去除次级碎片离子，有效简化图谱，便于图谱解析QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介背景知识介绍•串联质谱技术是现代质谱分析、研究复杂混合物体系的核心技术•CID（碰撞诱导解离）是实现串联质谱的主要手段•CID：使用一定压力的中性碰撞气体，对母离子进行激发，母离子吸收碰撞气体的能量，转化为内能，促使母离子解离，产生一定量的碎片离子27QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介碎片离子的产生•母离子能否产生碎片离子取决于活化母离子的分子解离速率与驰豫速率的相对大小，是母离子解离过程与驰豫过程的竞争•采用高能碰撞气，母离子内能高，容易产生碎片，但是此时除产生一级碎片离子外，某些碎片离子极可能再碎裂，产生次级碎片，甚至三级碎片，使MS/MS图谱复杂，难以解析28QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介时间分辨timeresolution•图为母离子被中性碰撞气激发活化后的能量分布，E0为临界能量通过激发后不同时间内，瞬间观察产生的碎片离子，就可以分别看到高能、低能碎裂模式产生的碎片离子29QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介在母离子被激发后，碎裂过程中开了可以移动的窗口30QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介coolingDuringdelaytime,ionsbelow“fillmass”areunstableinQ3;Coolingduringprescanprocedure,letnodissociationoccurring;circledspectrumisresultedfromtime-delayedfragments31QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介所以，时间分辨技术可以用于研究母离子不同内能水平时的碎裂过程和规律时间延迟碎裂(timedelayedfragmentation，TDF)就是一种利用串联线性离子阱，产生母离子激发后不同时间段的子离子图谱的新技术TDF：简化子离子图谱，提供母离子碎裂途径的信息32QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介TDF的实验过程33QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介TDF参数设置：Q3fillmass：需要清除的次级碎片的质量范围设定TDFCE：母离子碎裂能量Q3Cooltime：Q3离子延迟时间34QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介35QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介977_EPICE=45VApeptideofα-caseine36QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介977_TDFFillmass=650TDFCE=37VQ3Cooltime=28ms37QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介MS/MS/MS,MS3MS338QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介MS/MS/MS,MS33940©2007AppliedBiosystemsQTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介MS3参数设置：CE：MS2的碎裂能量设置AF2：MS3的碎裂能量设置1st：MS2的母离子m/z设置2nd：MS3的母离子m/z设置QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介41QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介MS/MS/MS,MS342QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介43QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介44QTRAP_LC-MSMS_扫描功能简介谢谢大家谢谢大家45