微生物实验报告病毒

微生物实验报告题目脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业2013级临床医学八年制实验者学号小组成员指导老师一、实验目的1.掌握病毒的血凝试验操作方法2.掌握病毒凝集价（抗原效价）的判断二、实验器材50孔反应板、病毒材料、红细胞悬液、生理盐水、微量吸液器、注射器、抗凝剂、离心机、恒温箱等。三、实验方法与步骤(一)制备鸡红细胞悬液：1.用注射器抽取Alsever氏抗凝剂1.5ml。2.用上述注射器，采用无菌法抽取健康的未免疫鸡的静脉血，与抗凝剂等量3.5ml。3.混匀，取抗凝鸡血2.5ml+生理盐水7.5ml，洗涤离心，共离心三次（第一、二次2000转/分5分钟、第三次3000转/分8分钟）洗去血清及白细胞，第2、3次加生理盐水10ml。4.所余的纯红细胞，用生理盐水稀释100倍（0.4+40ml），即成1%的鸡红细胞悬液。(二)按下表顺序加样(甲、乙）管号123…89对照生理盐水（ml）0.450.250.25…0.250.250.25病毒（ml）0.050.250.25…0.250.250.0红细胞（ml）0.250.250.25…0.250.00.25病毒稀释倍数(1:10)(1:20)(1:40)…(1:1280)(1:2560)第9孔最后弃去0.25ml液体，均匀摇晃平板，室温放置45min后观察结果。四、结果与讨论HAtiter1020408016032064012802560Neg.试验实际只有从第四空开始出现凝集反应，当平面中红细胞沉于孔底时表明红细胞没有完全被病毒凝集若呈均匀层状铺于孔底说明红细胞被病毒凝集五、注意事项1.在加入材料时，不同材料需更换移液管，倍比稀释不需更换移液管2.释病毒时将材料充分混匀后在吸出滴入下一孔中。3.先平行摇动平面，使液体充分混匀，注意静置时间，时间太短红细胞未凝集，时间太长，红细胞发生凝集后能被该病毒的神经氨酸酶裂解而使凝集现象消失。