常用显色剂

一、通用显色剂（1）硫酸①浓硫酸与甲醇等体积小心混合，冷却；②15％浓硫酸的正丁醇溶液；③5％浓硫酸的乙酸酐溶液；④5％浓硫酸的乙醇溶液；⑤浓硫酸与乙酸等体积混合。用以上任一试液喷薄层板后，于110℃烘烤15min，不同类的成分显不同颜色。（2）碘①0.5％碘的氯仿溶液；②碘蒸气在一密闭的玻璃缸内预先放入少许碘结晶，使缸为碘蒸气饱和。将薄层板放入缸内数分钟即可显色，碘对很多化合物显黄棕色。（3）高锰酸钾-硫酸高锰酸钾0.5g溶于15ml40％硫酸中。检测易还原性物质。（4）铬酸-硫酸重铬酸钾5g溶于100ml40％硫酸中。易还原性物质显色。（5）荧光显色液①0.25％的罗丹明B乙醇溶液；②0.01％的荧光素乙醇溶液；③0.1％的桑色素乙醇溶液。用以上任一试液喷薄层板后，在荧光背景下可能显黑色或其他荧光斑点。二、专属性显色剂（一）生物碱及含氮类化合物（1）改良碘化铋钾（Dragendorff）试剂①碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸与40ml水中；②碘化钾0.8g溶于20ml水中。试液①与试液②等量混合置棕色瓶内保存作贮备液。用前将1ml贮备液、2ml冰醋酸与10ml水混合。用于生物碱与某些含氮化合物，显橙红色。（2）碘-碘化钾（Wagner）碘1g与碘化钾10g溶于50ml水（微温），加2ml乙酸，加水至100ml。用于生物碱，显棕褐色。（3）碘铂酸5ml15％氯化铂溶液加45ml10％碘化钾溶液，用水稀释至100ml。用于生物碱，不同生物碱显不同颜色。（4）碘铂酸钾10％六氯铂酸溶液3ml与97ml水混合，加100ml6％碘化钾溶液，混匀。新鲜配制。用于生物碱与其他有机含氮化合物，不同生物碱显不同颜色。（5）Ehrlich①10％对二甲氨基苯甲醛盐酸溶液与丙酮按1:4混合。②对二甲氨基苯甲醛1g，溶于100ml96％乙醇中。用于吲哚类，有时喷后要加热。（6）硫酸高铈铵1％本品的85％磷酸溶液。用于吲哚类，长春花生物碱显各种颜色。（7）对二甲氨基苯甲醛-硫酸65ml浓硫酸与35ml水混合，放冷后加对二甲氨基苯甲醛125mg，再加入5％三氯化铁溶液0.05ml。本试液可保存一周。用于麦角生物碱。（8）肉桂醛-盐酸肉桂醛5ml、乙醇95ml和5ml36％盐酸混合，新鲜配制。用于吲哚类衍生物。（9）呫吨氢醇0.1g本品溶于90ml乙醇中，加10ml36％的盐酸，用前新鲜配制。用于色氨酸及其他吲哚类生物碱。（10）氯化铁-过氯酸0.5mol/L三氯化铁溶液1ml与35％过氯酸溶液50ml混合。用于吲哚类生物碱。（11）三氯化铁-碘三氯化铁5g、碘2g溶于50ml丙酮与50ml20％酒石酸的混合液中。用于黄嘌呤生物碱类，不同生物碱显不同颜色。（12）硫酸铈-硫酸（改良Sonnenschein试剂）硫酸铈0.1g混悬于4ml水中，加1g三氯乙酸，加热煮沸，放冷，逐滴加入浓硫酸直至浑浊消失。用于生物碱、含碘有机化合物的显色，喷后110℃烤几分钟，不同生物碱显不同颜色。（13）硫氰酸钴（Ⅱ）试液硫氰酸铵3g、氯化钴1g溶于20ml水中。用于生物碱，伯、仲、叔胺类。（14）碘化汞钾（Meyer）试剂1.36g氯化汞和5g碘化钾各溶于20ml水中，混合后加水稀释至100ml即可。（15）硅钨酸（Bertrand）试剂5g硅钨酸溶于100ml水中，加盐酸少量调至pH＝2左右。（16）苦味酸试剂1g苦味酸溶于100ml水中。（17）鞣酸试剂鞣酸1g加乙醇1ml溶解后再加水至10ml。（18）4-甲基伞形酮0.02g本品溶于35ml乙醇，加水至100ml。用于含氮杂环化合物。（19）硫酸铜-联苯胺①0.3g硫酸铜溶于100ml水-乙醇（5：4）的混合液中；②0.1％联苯胺的50％乙醇溶液。用时先喷试液①，于60℃干燥后再喷试液②。用于吡啶单羧酸的显色。（20）氯化铜0.5％氯化铜溶液。用于肟类。（21）硝普钠-铁氰化物10％氢氧化钠溶液、10％硝普钠溶液、10％铁氰化钾溶液和水按（1：1：1：3）混合，冰箱内保存（可保存数周），使用前取适量与等体积丙酮混合。用于氯基氰、胍、肌酸、肌酸酐、脲和硫脲及其衍生物的显色。（22）硝普钠-过氧化氢5％硝普钠溶液2ml、10％氢氧化钠1ml与5ml3％过氧化氢溶液混合后，加15ml水。冰箱可保存数日。用于胍、尿素、硫脲及其衍生物、肌酸和肌酸酐的检测。（23）三氯化锑试剂25g三氯化锑溶于75g氯仿中成饱和溶液。用于秋水仙生物碱类。（二）黄酮类黄酮类化合物在紫外灯或日光下多显不同颜色，用氨薰、喷三氯化铝或氢氧化钠溶液等皆会使颜色加深或变色。（1）三氯化铝-乙醇试液三氯化铝1g，加100ml乙醇溶解，即得。用于含氧杂环化合物。（2）氢氧化钾（钠）试剂10％氢氧化钾或氢氧化钠水溶液。（3）氨气。（4）三氯化锑试液10％三氯化锑的氯仿溶液。喷后110℃烤5min，用于黄酮类。（5）碱式（或中性）醋酸铅试剂1％碱式醋酸铅（或饱和中性醋酸铅）水溶液。用于黄酮类。（6）硫酸铜-枸椽酸钠硫酸铜（CuSO4•5H2O）1.73g、柠檬酸钠17.3g与无水碳酸钠10g溶于水并稀释至100ml。用于含邻二羟基的黄酮类与香豆精类。（7）硼氢化钾试剂①1％～2％硼氢化钾异丙醇溶液，必须新鲜配制；②浓盐酸。先喷①溶液，5min后放入盐酸蒸气缸内。用于双氢黄酮类化合物，显红、橙红色。（8）盐酸镁粉试剂浓盐酸和镁粉。（9）醋酸镁试剂2％醋酸镁甲醇溶液。（三）糖类（1）茴香醛-硫酸试剂①茴香醛0.5ml加入50ml乙酸，混匀后加1ml硫酸，用前新鲜配制。②改良试液。0.5ml茴香醛、9ml乙醇、0.5ml浓硫酸与0.1ml乙酸混合后立即使用。用于糖类、甾族、萜类。喷后将薄层板置100～105℃烤，不同糖显不同颜色。（2）α-萘酚-硫酸15％的α-萘酚-乙醇溶液10.5ml、浓硫酸6.5ml、乙醇40.5ml与水4ml的混合液。喷后100℃烤几分钟，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色。用于糖类的显色。（3）苯胺-二苯胺-磷酸4g二苯胺、4ml苯胺与20ml85％磷酸共溶于200ml丙酮中。喷后85℃烤10min，用于还原糖，不同糖显不同颜色。（4）对二甲氨基苯甲醛-乙酰丙酮①a.50％氢氧化钾溶液5ml与20ml乙醇混合；b.乙酰丙酮与正丁醇（1:100）的混合液。两种溶液均需新鲜配制，临用前混合。取a.混合液0.5ml，加入10mlb.溶液。②对二甲氨基苯甲醛1g溶于30ml乙醇中，加30ml36％盐酸，需要时用180ml正丁醇稀释。使用时先喷试液①，于105℃加热5min，再喷试液②，于90℃干燥5min。用于氨基糖类。（5）酚-硫酸试剂酚3g、浓硫酸5ml溶于95ml乙醇中。喷后110℃加热几分钟，糖显棕色。（6）1,3-二羟基萘酚-磷酸试剂0.2％1,3-二羟基萘酚乙醇溶液100ml与85％磷酸100ml混匀。喷后120℃加热5～10min，酮糖显红色，醛糖显淡蓝色。（7）邻氨基联苯-磷酸邻氨基联苯0.3g溶于5ml85％磷酸与95ml乙醇，即得。用于糖类。（8）苯胺-磷酸2mol/L苯胺的水饱和正丁醇溶液与0.67mol/L磷酸正丁醇溶液，按1:2（体积）混合。用于糖类。（9）咔唑-硫酸0.5g咔唑、5ml硫酸溶于95ml乙醇中。用于糖类。（10）3,5-二氨基苯甲酸-磷酸试剂3,5-二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于25ml80％磷酸中，加水稀释到60ml。喷后100℃加热15min，2-去氧糖在日光下显棕色，在紫外光下显黄绿色荧光。（11）苯胺-邻苯二甲酸试剂0.93g苯胺、1.66g邻苯二甲酸溶于100ml水饱和的正丁醇溶液中。喷后105～110℃加热10min，糖显红棕色。（12）百里酚-硫酸试剂百里酚0.5g、硫酸5ml溶于95ml乙醇。喷后120℃加热15～20min，多数糖在白色背影上显暗红色，继续加热则变成浅紫色。（13）萘雷锁辛-磷酸0.2％萘雷锁辛乙醇溶液100ml与85％磷酸溶液10ml相混合。用于糖类。（14）4-氨基马尿酸0.3％的4-氨基马尿酸乙醇溶液。用于还原糖。（15）酞酸苯胺0.93g苯胺和1.66g酞酸溶于100ml水饱和的正丁醇中。用于糖类。（16）硝普钠-偏高碘酸钠①2.5％偏高碘酸钠溶液；②7％硝普钠溶液、水与饱和的哌嗪乙醇溶液按照1：3：20比例混合。使用时先喷试液①，室温干燥10min，再喷试液②。用于脱氧糖。（17）偏高碘酸钠-联苯胺-硝酸银①0.1％偏高碘酸钠溶液；②联苯胺2.8g溶于80ml乙醇、70ml水、30ml丙酮与1.5ml1mlo/L盐酸的混合液中；③20ml丙酮加1ml饱和硝酸银溶液，然后逐滴加水直至沉淀的硝酸银刚刚溶解。使用时先喷试液①，干燥，再喷试液②，放入含25％氢氧化铵溶液的容器内5min后，取出轻轻喷试液③。用于糖和含1,2二羟基多醇类。（18）联苯胺-三氯乙酸0.5g联苯胺溶于10ml乙酸，加10ml40％三氯乙酸水溶液，用乙醇稀释至100ml。用于糖类。（19）蒽酮0.3g蒽酮溶于10ml乙酸与20ml乙醇中，加入3ml85％磷酸与1ml水。置冰箱内保存。用于酮糖。（20）氨性硝酸银试剂1g硝酸银，加20ml水溶解，滴加适量的氨水，边加边搅拌，至开始产生的沉淀将近全溶为止，过滤。用于糖类。（21）碱性酒石酸铜试剂①结晶硫酸铜6.23g，加100ml水；②酒石酸钾钠34.6g、氢氧化钠10g，加100ml水。用时将试液①与试液②等量混合。用于糖类。（22）呫吨氢醇冰醋酸（Xanthydrol）试剂10mg呫吨氢醇溶于100ml冰醋酸（含1％的盐酸）中。用于α-去氧糖。（四）强心苷（1）3,5-二硝基苯甲酸（Kedde）试剂2％3,5-二硝基苯甲酸的甲醇液与2mol/L氢氧化钾甲醇溶液或5％氢氧化钠乙醇液，用前等量混合。强心苷显紫红色，几分钟后褪色。（2）三氯乙酸①25％三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液。②三氯乙酸3.3g溶于10ml氯仿，加30％过氧化氢溶液1～2滴。喷后110℃加热7～10min，紫外灯下观察荧光。用于甾族、洋地黄苷与藜芦碱。（3）碱性三硝基苯试剂①间三硝基苯100ml溶于40ml二甲基甲酰胺溶液，加浓盐酸3～4滴，加水至100ml；②5％碳酸钠溶液。使用时先喷试液①，再喷试液②，于90～100℃加热4～5min。用于强心苷，在浅橙色背景上显橙红色。（4）硫酸-次氯酸盐10ml1mol/L硫酸与3ml次氯酸钠溶液（10％活性氯）混合。用于洋地黄苷。（5）三氯化锑试剂25％或饱和的三氯化锑氯仿溶液。喷后100℃加热5min，在紫外灯或日光下观察。（五）蒽醌类蒽醌类化合物本身在日光下显黄色或橙黄色，在紫外光下则显黄、红、橙色荧光。薄层展开后用氨熏或喷氢氧化钾（钠）碱溶液，则颜色变深或变色。（1）氢氧化钾试剂10％氢氧化钾甲醇溶液。（2）氨气。（3）醋酸镁试剂0.5％醋酸镁甲醇溶液，喷后100℃加热5min。（4）乙酸铝溶液0.5％乙酸铝水溶液，喷后紫外灯下看荧光。（5）硼酸试剂1％硼酸水溶液。（6）碱式醋酸铅试剂1％碱式醋酸铅水溶液。（六）香豆素与酯类香豆素母体本身无荧光，但羟基香豆素在紫外光下常显亮蓝色荧光。层析法检识常用以下显色剂。（1）羟胺-氯化铁①a.盐酸羟胺20g溶于50ml水，用乙醇稀释至200ml，冷凉处保存；b.氢氧化钾50g溶于少许水中，加500ml乙醇。②氯化铁（FeCl3•6H2O）10g溶于20ml36％盐酸溶液中，加乙醚200ml摇匀，置密闭容器内保存。使用时将试液①a.与①b.按1：2混合，滤去沉淀，滤液放冰箱保存。先喷此试液，稍干，再喷试液②。用于内酯类、酯类、酰胺与羧酸酐类。香豆素类显红色。（2）三氯化铁试剂5％三氯化铁的水溶液或甲醇溶液。检识含有酚羟基的香豆素。（3）重氮化试剂①对硝基苯胺0.35g，溶于浓盐酸5ml中，加水至50ml；②亚硝酸钠5g，加水50ml。取①、②液等量在冰水浴中混合后使用。香豆素显黄、橙、红、棕、紫等颜色。（4）4-氨基安替比林-铁氰化钾①2％4-氨基安替比林乙醇溶液；②8％铁氰化钾溶液。使