检验科微生物室ppt模版 20121202

临床微生物质量控制湖南省肿瘤医院检验科博爱敬业求真务实内容二、临床微生物的质量控制三、标本采集、运送和显微镜检四、细菌鉴定的基本步骤五、细菌药物敏感试验六、实验室质量保证和报告规范化七、工作中常见的问题和解决方法八、目标一、临床微生物实验室的重要性博爱敬业求真务实一、临床微生物实验室的重要性微生物实验室在临床中的地位：及时、准确地作出病原学诊断和抗菌素敏感试验，为临床制订抗感染治疗方案提供依据监测和分析细菌耐药性的变迁和某些重点的耐药细菌提供目标用药依据或纠正经验用药的依据参与医院感控监测并定期发布医院细菌耐药率和耐药趋势博爱敬业求真务实一、临床微生物实验室的重要性人类面临着微生物的挑战，要打赢这场战争不仅需要有经验的医生，还需要一支优秀的临床微生物检验队伍。与过去的10年或20年相比，临床微生物实验室的规模和发展速度已经发生了巨大的变化。目前，我们离CLSI(临床实验室标准化研究所)标准化文件要求还相差很远，我们应进行规范操作，才可能应对微生物向人类的挑战，才能适应临床的需要。临床微生物检验，在感染性疾病及相关病患的诊断治疗预防及研究工作中起着越来越重要的作用，为了保障检验结果的准确性和可靠性，日常工作中要注意开展质量控制。博爱敬业求真务实为了保证检验结果准确无误，应对室间质评和室内质控实行全面质量管理。临床微生物检验是对人体的各种物质进行微生物学检验，整个检验过程包括病人样品的采集、运送、处理，样品中致病微生物的分离、培养、鉴定，药物敏感试验，出具检验报告。其质量控制环节多、涉及的知识面广、复杂性高、需要超强的责任心。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实临床微生物检验质量控制的有关概念为了保证质量控制，首先应了解以下有关概念：1.细菌检验的质量：结果真实显示标本中存在的病原菌及其生化特征和抗药性2.细菌检验的质量控制：制定细菌检验的质量水平，并采取监测手段，这一过程称为细菌检验的质量控制。3.质量保证：为达到应有的质量水平而采取的措施。4.质量评价：用一个客观的公认的标准来评定一个实验室或实验室中某项试验是否达到标准的过程。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实5.室间质量控制：是各地实验室之间进行质量控制的一种方式，也是上一级实验室对各实验室进行质量管理的手段。参加由省临床检验中心或卫生部临床检验中心组织的室间质控，会遇见一些平时罕见或未见过的菌株，通过质控检验对它们的生长条件、菌落形态、染色、镜下形态等有了较深的感性认识。日后工作中倘若再遇见这些菌将不再会漏检。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实6.室内质量控制：做好室内质控直接关系到日常检验工作的质量。室内质控主要包括几个方面：实验室前的质量控制、标本接种前的质量控制、培养基的质量控制、试剂质量控制、常用仪器的质量控制、药敏实验的质量控制、及发报告前的质量控制。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实临床微生物实验室质量管理目标a.临床微生物实验室室是为临床诊断与治疗提供有否感染病原菌以及药物敏感实验依据的检查科室之一。b.临床微生物实验室室的工作是面向全院临床医生与患者。其工作目的是一切为了患者，服务于患者；一切为了临床，服务于临床；急其所急，想其所想，检验报告及时、准确。c.根据循证医学的观点，不断进行实验方法学的研究与改进，临床价值探讨，经济学评估，优选出最直接、最有效、最准确、最经济的实验或实验组合，用于临床。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实d.不断加强实验室与临床的信息交流与学术探讨，直接参与临床诊断治疗，促进检验医学的发展。e.本室所进行的试验方法、量值可溯源，不准确度限制在国内有关部分标准。力争达到国家规定的质量控制标准.f.仪器设备完好率≥85%。g.参加国际、国内室间质评，其总成绩“优秀”应为90％，“良好”小于10％。h.对患者热情，服务周到，使全科平均满意率为95％以上。i.检查差错发生率应小于0.4％。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实临床微生物实验室的基本装备光学显微镜孵育箱、烛缸、高压锅生物安全柜或安全罩试剂、染液、质控菌株、培养基冰箱、酒精灯、接种环、尺、温度计等二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实临床微生物室的制度•生物安全防护制度•三级报告制度：①涂片；②初步药敏和确切涂片；③正式鉴定和药敏•传染病原报告制度•菌毒株保存制度•废弃物处理制度•质量控制制度二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实室间质评是在建立实施室内质控体系的基础上，我们收到质控物后认真检查核对，如有破损、缺失、标本编号错误等要及时向科室反映，以便及时与部临检或省临检中心联系，及时补寄。由卫生部临床检验中心或省临床检验中心组织，如实地反映实验室的真实工作状况和水平，是临床实验室全面质量管理重要组成部分，也是实验室认可的重要依据。二、临床微生物的质量控制需仔细阅读室间质评的通知和要求，由室负责人将质评样本保存在2℃～8℃冰箱，妥善保管好报表和项目编码。博爱敬业求真务实室间质评样本的检测操作程序1.测试环境、仪器、试剂的要求①室温：20～25℃②湿度：80%③试剂：所用试剂或试条均为仪器配套产品④质控品：为仪器配套产品，并在使用效期内，同时无变质或污染。⑤仪器：仪器必须有质量控制保证。2.质评样品的准备①按测定日期从冰箱中取出参评物，放置至室温(约30min)。②根据标本种类，质控菌株分到各组进行培养分离鉴定。3.质评样品的测定①质控菌株用小牛血清或肉汤溶解，按标本种类接种各种选择培养基，放适当环境培养。②培养分离病原菌，根据病原菌种类进行鉴定和耐药表型检测，并根据质控要求，病原菌进行药敏试验(重复2次)。4.填写报表或网上回报①填写报表时应按要求逐项填写，字迹清晰整洁。②填写完后再次核对，以防笔误、样本号顺序错误等。③然后则测定者、室负责人签字。5.结果存档填写完后复印或将网页另存，一份寄出，一份存档，以备核查。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实室间质评的评价方法1.单项PT值评分标准每一批号每一项目结果在允许范围内时，测定结果合格，得分为100%，若在允许范围外时，测定结果不合格，得分为0%。单个项目的得分计算公式为：(该项目的合格结果数÷该项目的总的测定样本数)×100%。合格：该项目的测定成绩≥80%不合格：该项目的测定成绩≤80%2.总项目的PT值评分标准总项目的计算公式为：(总项目的合格结果数÷总项目的总的测定样本数)×100%合格：总项目的测定总分≥80%不合格：总项目的测定总分≤80%3.部临检中心给参加实验室发证书的规定合格证书：每年每个专业参加2次或3次以上，不得缺席，每次有五个调查样本。每次总项目的测定总分≥80%；颁发合格证书。参加证书：不符合合格证书的要求和标准的均颁发参加证书。注意：若失控，应将调查所有失控原因及相关纠正措施，并做好记录，上报科质量控制小组和科主任，由科主任签字后，质控结果归档保存。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实临床微生物室需建立室内质控11234常规试验室内质控培养基质控药敏试验的质控自动化设备质控：鉴定和药敏、血培养系统二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实ATCC：美国典型菌株保存中心-主要来源NCTC：英国国家典型菌株保存中实验中用标准方法鉴定，鉴定值95％典型菌株，并经多次传代，特征衡定的菌株质控菌株参考菌株临床分离菌二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实质控必备菌株细菌名称菌号用途金黄色葡萄球菌ATCC25923纸片扩散质控金黄色葡萄球菌ATCC29213MIC测定质控大肠杆菌ATCC25922纸片和MIC绿脓假单胞菌ATCC27853纸片和MIC粪肠球菌ATCC29212胸腺嘧啶含量测定淋病奈瑟菌ATCC49226淋球菌药敏流感嗜血杆菌ATCC49247嗜血杆菌药敏肺炎克雷伯菌ATCC700603ESBL阳性菌二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实低温速冻苛养细菌冷冻干燥长期保留菌株参考菌株保存方法高层琼脂非苛养菌二、临床微生物的质量控制琼脂斜面现用菌株博爱敬业求真务实常规试验的质量控制-天天做•触酶试验：3％H2O2每三天更换一次•血浆凝固酶试验：人血浆或商品乳胶试剂•氧化酶试验：1％盐酸四甲基对苯胺水溶液浸泡厚滤纸，室温吹干压成小纸片，置含干燥剂容器－20℃保存，或买商品制剂•β－内酰胺酶：头孢硝噻吩(Nitrocefin)为底物，适于测试嗜血杆菌、淋球菌、卡他莫拉菌、肠球菌•革兰染色：革兰阳性菌染成红色；革兰阴性菌染成紫色；另涂片厚度、染色和脱色时间、染料沉渣等也影响染色质量二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实培养基的质量控制一般性状：①外观：透明、清亮、无混浊、无沉淀，颜色符合要求，表面湿润但无水汽、平整、光洁无凹坑和气泡。整块平板厚薄均匀。②厚度：一般厚度在3mm，但MH平板厚度≥4mm。斜面的长度≤试管长度的2/3。③pH是细菌生长的重要条件之一，合格培养基的pH应在规定值上下0.2的范围内。无菌试验：新制备或新买的培养基在使用前要随机抽取一定数量的样品作无菌试验。购买的培养基要有质量保证如合格证明等文件；若无质量保证需检测相应的性能。三、标本采集、运输和显微镜检博爱敬业求真务实培养基的质量控制细菌生长试验：所有的培养基在使用前还必须做细菌生长试验以测定培养基性能是否符合要求。标准菌株分2种：一种是已知的可在某种培养基上生长并产生典型生物学性状的，对培养基中的某种物质产生阳性反应的菌株；另一种是用已知的不能在某种培养基上生长或对培养基中的某种物质产生阴性生化反应的菌株。如血琼脂平板：乙型溶血性链球菌生长，β溶血；甲型链球菌，a溶血；巧克力琼脂平板：流感嗜血杆菌生长良好；中国蓝琼脂平板和SS琼脂平板：革兰阴性菌生长，革兰阳性菌不生长。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实试剂质控临床微生物实验室常用的试剂包括染色液、诊断血清以及各种生化反应试剂等。染色液及染色方法质量控制：购买的或配置的染色液，每次需做好相关的记录，如操作者和开瓶日期等；还要进行染色步骤质控，如革兰染色在一张玻片上同时涂有金葡菌和大肠杆菌，以保证染色性判断准确无误。常用生化试剂的质控：随着细菌鉴定仪和快速微量生化鉴定板条的普及，临床微生物检验常用的生化试剂种类日趋减少，应注意在用试剂在贮存时的避光、冷藏等要求，保证试剂的稳定性。不要使用过期的试剂。诊断血清的质控：诊断血清是一种重要的细菌鉴定试剂，应从有资质的生产单位购买。验收时必须看清生产批号、血清效价、透明度与色泽。试验中应注意无菌操作，避免细菌污染。要经常检查贮存在4℃冰箱中的各种血清，若发现混浊，出现絮状，应停止使用。为保证血清凝集反应结果准确，应每3个月对血清进行一次质控。不要使用过期的血清。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实纸片药敏试验的室内质控•基础质控：连续做30天，如失控超过3次还需继续，如失控低于3次可改为每周1次•纠控：每周质控中发生失控应纠控，方法：连续5天，每天1次，每次重复5个纸片，如找到明确失控原因，可立即改为每周1次，否者继续•4℃冰箱保存一周的用量•药物敏感试验是临床微生物检验的重要步骤之一，其结果正确与否涉及治疗效果的好坏。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实仪器的质量控制•按仪器说明规定用标准菌株定期对不同批号的试剂进行质控•国产试剂应采用自动或半自动标准化的系统，如ATB、VITEK等进行标定•包括对冰箱、二氧化碳孵箱、普通孵箱、水浴箱等基本设备的每日温度、气体浓度的监控记录；显微镜、细菌鉴定仪等仪器的使用、保养、维修记录。以保障实验室各种设备、仪器的正常运转。二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实12分析前：标本采集、运送分析中：细菌鉴定和药敏试验分析后：报告的处理3室内质控二、临床微生物的质量控制博爱敬业求真务实实验室前的质量控制要想获得可靠的检验结果，首先要取得一份合格的标本，所以实验室前的质量控制是保障检验结果准确性的关键。包括标本采集时间（时机）、采集方法与运送等。各种临床标本送到实验室后，大致检查其是否合格。不合格的标本不应进行