60大学组织胚胎学课件1绪论

绪论SHOU.CXW一、组织胚胎学的研究内容组织胚胎学【组胚】=组织学+胚胎学组培=组织培养SHOU.CXW1.组织学（histology）的定义：研究生物体微细结构及其相关功能的科学。【其中主要是研究显微镜下细胞和细胞外基质的形态、排列及其相关功能。】SHOU.CXW胚胎学的定义：研究从精子和卵子结合形成受精卵，到胚胎的形成，个体的成熟。这是一个从单细胞到多细胞的分化过程，是单细胞到多种组织到多器官的发育过程。因此：组织胚胎学【组胚】=组织学+胚胎学SHOU.CXW细胞的基本知识SHOU.CXW细胞是：构成有机体的基本单位，是有机体生长发育的基础；SHOU.CXW不同的细胞类型：结构，细胞器？真核细胞：细胞核具有核被膜和核仁。原核细胞：核区没有核膜包围，称其为拟核。SHOU.CXW细胞细胞膜细胞质细胞核细胞基质细胞器包涵物线粒体内质网核糖体高尔基复合体溶酶体微体中心体细胞骨架糖元脂滴色素细胞基本结构SHOU.CXW细胞超微结构模式图1.细胞核2.细胞质SHOU.CXW细胞透射电镜图片M线粒体S滑面内质网R粗面内质网L溶酶体P过氧化物酶GL糖原N细胞核SHOU.CXW一、细胞膜细胞膜又称单位膜呈“两暗夹一明”的三层结构。细胞膜SHOU.CXW细胞质细胞基质细胞器包涵物线粒体内质网核糖体高尔基复合体溶酶体微体中心体细胞骨架糖元脂滴色素二、细胞质SHOU.CXW1、核糖体两种存在形式：游离核糖体(freeribosome)合成细胞结构蛋白，供细胞结构更新，细胞功能旺盛则游离核糖体极多。附着核糖体(attachribosome)－位于内质网膜表面，合成分泌蛋白。LM：核糖体丰富的细胞，细胞质呈嗜碱性。SHOU.CXW2．内质网(endoplasmicreticulum，ER)扁平囊状或管泡状膜性结构。“蛋白质的加工厂”。分为两种：粗面内质网(roughendoplasmicreticulum，RER)膜表面有附着核糖体滑面内质网(smoothendoplasmicreticulum，SER)膜表面不附着核糖体SHOU.CXWLM:银染呈黑褐色网状。EM:扁平囊、小泡、大泡凸面－形成面，有小泡凹面－成熟面，有大泡功能：进行蛋白质加工、浓缩、修饰、糖化。“蛋白质物流中心”高尔基复合体（TEM）3.高尔基复合体(Golgicomplex，Gol)SHOU.CXW初级溶酶体(primarylysosome)是新生成的溶酶体次级溶酶体(secondarylysosome)-又称吞噬性溶酶体细胞消化器，“垃圾处理厂”。溶酶体(TEM)4．溶酶体(1ysosome，Ly)SHOU.CXW5.线粒体(mitochondrion，Mit)LM：杆状、圆形或椭圆形，EM:外膜，内膜。功能：能量代谢中心，“发电厂”。线粒体(TEM)SHOU.CXW6．过氧化物酶体(peroxisome)又称微体(microbody，Mb)，膜包圆形小体，多见于：肝细胞、肾小管上皮细胞。具有电子致密的核心。功能：参与脂肪酸氧化；分解过氧化氢，解毒。过氧化物酶体（TEM）SHOU.CXW7．中心体(centrosome)一对互相垂直的圆筒状中心粒构成。功能：参与细胞分裂，形成纺锤体，使染色体的分离。中心粒（TEM）（↙）右下图横断中心粒卫星SHOU.CXW8．细胞骨架(cytoskeleton)组成：微管、微丝、中间丝。A微管SHOU.CXW（2）微丝(microfilament，Mf)功能：支持作用（伪足、微绒毛丰富）细胞收缩、变形运动。B微丝SHOU.CXW（3）中间丝(intermediatefilament)细胞连接，附着。C中间丝SHOU.CXW包涵物(inclusions)1.糖原颗粒LM:PAS染色时呈紫红色。EM:电子密度高，无膜包裹，两种类型：β颗粒－不规则，散在于肌细胞；α颗粒－花簇状，多见于肝细胞。α糖原颗粒2.脂滴LM：脂肪被溶解呈空泡状EM:中等或低电子密度包括：糖原颗粒、脂滴、分泌颗粒、色素颗粒等。A脂滴和β糖原颗粒SHOU.CXW3.分泌颗粒(secretorygranule)常见于各种腺细胞、内含酶、激素等生物活性物质。分泌颗粒有膜包裹形态、大小因细胞种类不同各异。SHOU.CXW4.色素颗粒电子密度不等SHOU.CXWSHOU.CXWSHOU.CXW三、细胞核含有DNA遗传信息LM:HE染色呈强嗜碱性。结构：核被膜、染色质、核仁与核基质细胞核核被膜核仁核基质染色质核(TEM)SHOU.CXW细胞周期是指细胞从上一次分裂结束开始到下一次分裂终了所经历的过程，分为分裂间期与分裂期两个阶段。SHOU.CXW名称人卵口腔上皮细胞肝细胞红细胞变形虫海胆卵伤寒菌肺炎球菌μm12075207100702.4x0.50.2x0.1大多数动植物细胞在20~30μm间；一般真核细胞的体积大于原核细胞；卵细胞大于体细胞。几种细胞的大小人卵与精子SHOU.CXW基本组织上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织细胞细胞间质各个器官、系统（细胞外基质）细胞生物学组织学总论组织学各论组织学的教学内容：SHOU.CXW组织学结构观察的层次：组织学结构光镜结构－用光学显微镜观察的结构（LM）(lightmicroscope,LM简称光镜)微观结构microstructure电镜结构－电子显微镜下观察的结构（EM）(electronmicroscope,EM简称电镜）又称超微结构(ultrastructure)SHOU.CXW2.胚胎学胚前发育：精子和卵子的发育与成熟。胚后发育：幼虫发育到性成熟，到死亡。胚胎学——是个体发育的动态过程。SHOU.CXW组织学分支1.研究对象不同：人体，动物，植物2.研究方法不同：比较组织学，实验组织学，组织培养，病理组织学，SHOU.CXW人和鱼的肝脏SHOU.CXWSHOU.CXWSHOU.CXW胚胎学分支1.叙述胚胎学2.比较胚胎学3.生态胚胎学4.实验胚胎学5.化学胚胎学6.分子胚胎学7.免疫胚胎学SHOU.CXW二、组织学的研究方法和常用技术SHOU.CXWSHOU.CXW(一)光学显微镜技术1、常用组织切片标本制备技术石蜡切片术①取材和固定;②脱水和包埋;③切片和染色;④封片。其他；火棉胶包埋,冰冻切片,涂片,铺片,磨片等SHOU.CXW苏木精伊红碱性染料酸性染料染成红色（嗜酸性）细胞核中的染色质、细胞质中的核糖体细胞质细胞间质成份染成蓝色（嗜碱性）常用染色方法：HE染色（Hematoxylin）（Eosin）HE染色SHOU.CXW嗜碱性：可使细胞核内的染色质及细胞质内的核糖体等结构染成蓝紫色。嗜酸性：可使多数细胞的细胞质染成粉红色。中性：与两种染液亲合力都不强。组织结构的嗜色性嗜碱性嗜酸性SHOU.CXWA嗜银性B嗜铬性C异染性其它染色方法SHOU.CXW普通光学显微镜是观察组织细胞微细结构最常用的工具，分为光学部分机械部分起放大作用光镜的分辨率约为0.2µm可放大1000倍左右（lightmicroscope，LM）SHOU.CXW几种特殊显微镜术（1）相差显微镜(phasecontrastmicroscope)用于观察生活细胞和末经染色细胞的形态结构。神经干细胞培养SHOU.CXW(2)荧光显微镜(fluorescencemicrscope)是用以观察细胞、组织内荧光物质的分布。神经球SHOU.CXW人类染色体端粒DNA的荧光原位杂交照片SHOU.CXW(3)共焦激光扫描显微镜共焦激光扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscope，CLSM)由激光光源、共焦成像扫描系统、电子光学系统和微机图象分析系统四部份构成。可对样品进行断层扫描重建三维图像，进行体视学分析；测定细胞内pH、钙浓度等；更精确地检测、识别，组织细胞的微细结构及其变化。CLSM又称细胞CT。CLSMSHOU.CXWSHOU.CXW(三)电子显微镜技术（electronmicroscope,EM）透射电镜(transmissionelectronmicroscope,TEM)观察细胞内部结构分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万－几十万倍扫描电镜（scanningelectronmicroscope,SEM)观察组织或细胞表面的立体结构冰冻蚀刻（freezeetchingmethod）观察细胞断裂表面形态结构分析电镜X–射线显微分析术（X–raymicroanalysis）研究细胞、组织内元素种类分布和含量SHOU.CXW透射电镜与照片TEM淋巴细胞SHOU.CXW扫描电镜与照片SEMSEM1.纤毛2.微绒毛SHOU.CXW冰冻蚀刻细胞冷冻断裂肾小球右下线粒体冰冻蚀刻照片SHOU.CXW分析电镜－X线微区分析图片分析电镜X线微区分析SHOU.CXW糖类显示法－PAS反应：过碘酸—希夫反应(periodicacidSchiffreaction，PAS)：检测组织或细胞中有无多糖存在。原理：多糖PA氧化醛Schiff试剂紫红色沉淀(四)组织化学和细胞化学技术PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在PAS阳性小肠上皮SHOU.CXW组织细胞化学染色图片酶细胞化学神经元ACP酶阳性脂类显示法苏丹Ⅲ脂类显示法苏丹Ⅲ锇酸髓鞘染色核酸显示法SHOU.CXW(五)免疫细胞化学技术免疫组织化学术(immunohistochemistry)是将免疫学原理与组织化学技术相结合建立的新技术，根据抗原与抗体特异性结合的特点，检测组织细胞内某种多肽、蛋白质等大分子物质的存在与分布。鱼胃上皮中的内分泌细胞SHOU.CXW利用抗原（antigen,Ag），抗体（antibody）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。免疫细胞化学原理SHOU.CXWSHOU.CXW(六)原位杂交术原位杂交(insituhybridization)是一种敏感性高、特异性强的，能在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术。常用的标记物有两种：1、放射性同位素，如3H、14C、32P、35S、125I，2、为非放射性物质，如地高辛等。非放射性原位杂交海马GAP－43mRNASHOU.CXW(七)放射自显影术放射自显影术(autoradiograph)旨在追踪某些物质在体内、组织或细胞中的分布与代谢径路。放射自显影甲状腺125I同位素注入取材制标本涂核乳胶暗室曝光显影、定影染色LM观察SHOU.CXW(八)组织培养和组织工程组织工程基本方法示意图A获取组织B分离、培养种子细胞C制备三维支架D将种子细胞种植于支架E将细胞-支架复合物植入组织缺损处细胞培养－神经干细胞培养SHOU.CXW(九)组织细胞定量术1．显微分光光度术应用显微分光光度计(microspectrophotometer)对组织和细胞内化学成分进行定量分析。2．形态计量术运用数学和统计学原理对组织细胞内各种成分的数量、体积、表面积等的测量。目前多应用图像分析。3．流式细胞术应用流式细胞仪进行细胞定量分析和细胞分类研究。SHOU.CXW三、组织学的学习方法1.理论联系实际2.结构与功能关系3.断面与立体的关系4.建立动态变化的概念5.善于总结，掌握规律SHOU.CXW断面与立体的关系立体断面SHOU.CXW