64气相色谱法

主要内容概论目的与要求常用的方法应用优点：(1)扩大应用范围。例如,不易挥发的氨基酸以及糖类等化合物转化成某些衍生物后,可增加挥发性和降低极性。(2)提高分离效能。一些难以分离的组分转化成衍生物后可相互分离。(3)扩大检测限。将制备的衍生物用选择性检测器检测,可检测低含量组分。例如,卤素团引入衍生物后，用电子俘获检测器可进行低含量组分的检测(4)排除干扰，样品中有些杂质因不能成为衍生物可被除去。衍生化气相色谱法：通过化学反应的方法将被测组分转变成另一种化合物（称为衍生物），再用气相色谱法进行分析。1.概论2.1目的1.增加试样和试样中欲测杂质的挥发性．以适应气相色谱检测的要求。2.减弱试样和试样中欲测杂质的吸附活性，例如通过衍生化反应以除去其活泼的氢原子，以改变其与固定相为配位特性。3.利用柱外或柱上衍生反应可以获得更多的定性信息。4.衍生化对于性质极为相近的化合物，对于位置异构体和光学异构体为分离具有一定的意义。2.2衍生化应注意的问题制备衍生物可能引入误差，这就要求对衍生化反应和影响反应结果的因素有全面的了解,包括衍生化用的溶剂和试剂的纯度,生成的衍生物的稳定性,衍生反应的速率。要求衍生化反应必须满足以下要求：1.衍生化反应必须完全，其反应的产率不一定是百分之百，但测定的重现性要好。2.生成的衍生物必须有足够的挥发性，能在固定液的使用温度下，在要求时间内洗脱出来，但挥发性又不能太强．以减少其自身的损失。3.衍生化反应应步骤少．衍生化反应应尽可能迅速。4.生成的衍生物要稳定，不能随时间分解，也不能在柱上分解。5.生成的衍生物在色谱柱上应能得到完全的分离。3.常用的几种衍生化法1.硅烷化法当试样和试样中欲测杂质含有羟基，氨基(一NH)、(一NHR)和巯基(一SH)时，可以用三甲基氯硅烷(简称TMCS)作硅烷化试剂与试样和其欲测杂质进行硅烷化反应，三甲基硅烷基[一Si(CH3)3]取代了试样和其欲测杂质分子中的氢原子，此类反应称为三甲基硅烷化反应，简写为TMS。各类欲测物与三甲基硅烷化试剂反应得到的相应为衍生物如下：R-OHR-O-Si(CH3)3R-COOHR-CO-Si(CH3)3R-SH+TMS衍生化试剂=R-S-Si(CH3)3R-NH2R-NH-Si(CH3)3,R-N[Si(CH3)3]3R1R2NHR1R2N-Si(CH3)3上述反应生成的衍生物比原物质的挥发性强，热稳定性好。三甲基氯硅烷,六甲基二硅烷和三甲基硅烷基咪唑比较适用于羟基的硅烷化；双(三甲基硅烷基)乙酰胺和双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺适用于含活性较弱的-NH2和-NH-基团或空间位阻大的基团的化合物硅烷化。溶剂则可选用吡啶,二甲基甲酰胺,四氢呋喃,二甲基亚砜,乙腈或烷烃，其中吡啶最为常用。硅烷化的方法称取0.1g一0.2g试样，放到血清瓶中。其体积为5mL～10mL，用橡皮帽封闭。用注射器加入过量10倍的N,O-双三甲硅基乙酰胺(BSA)，充分振摇后，静置15min。由于反应进行，瓶内的溶液会变热。在反应完全后．溶液会变得清晰。这时即可以进行气相色谱法测定，向气相色谱仪进样时，是用注射器直接穿过橡皮帽吸取衍生化的试样，直接注入气相色谱仪。2.酯化反应法酯化反应分为两类：酸酐法和酰卤法。酸酐法是用酸酐的吡啶或四氢呋喃溶液制备成酰化的衍生物，卤代酸酐类试剂有三氟乙酸酐，五氟丙酸酐和七氟丁酸酐等；ROHRO-COR1+R1COOHR-NH2(R1CO)2ORNH-COR1+R1COOHRSHRS-COR1+R1COOH酰卤法中采用的酰卤试剂有乙酰氯和苯甲酰氯。例如，胺与三伏乙酰氯反应：RNH2+CF3COCLRNHOCCF3RN(OCCF3)2除上述反应外，还有羧酸的酯化反应和烷基化反应等。4.应用柱前衍生化技术的应用大大拓展了各种模式色谱的应用，使得一些本来不能用该模式色谱分析的样品可以用该模式色谱进行分析了。分析有机羧酸类化合物有机羧酸类化合物一般不易用气相色谱直接分析，其原因：一是，有机羧酸类化合物（特别是高级脂肪酸）不易气化；二是，直接用气相色谱分析有机羧酸类化合物时，常由于它们的强酸性和极性而引起它们在色谱柱上的强吸附，并造成拖尾而无法分析。为此用气相色谱分析有机羧酸类化合物时，一般都采用衍生物法，而最常用的衍生物则是有机羧酸的各种酯类化合物。分析农药有些农药极性强，蒸汽压低，难以直接进行气相色谱分析；有些带羟基的农药如溴苯腈等若不经过衍生化处理很难得到满意的测定结果；另外一些根本不能用气相色谱分析的农药如草甘膦，矮壮素等，经衍生化处理后，可以进行气相色谱测定。测定表面活性剂疏水基的分布采取一般的国标法测其活性物质的含量，无法测得其疏水基的分布。而采用衍生化后的气相色谱法测疏水基的分布为产品质量控制及结构分析提供了简便，实用的分析方法。分离手性化合物手性化合物的衍生化，通过与光学活性试剂的作用，产生非对映体的衍生物，可在普通固定相上得到分离。气相色谱中衍生化发展方向主要有几个方面：（1）建立现有试剂的新的衍生方法，减少样品的前处理时间。（2）进一步拓展现有试剂的应用范围，特别是在毒物分析及药物分析方面的应用。（3）合成和开发具有特异性的新试剂，如手性衍生试剂，适用于质谱检测的衍生试剂等。Thankyou！