培养果蝇的饲养瓶

－－果蝇性状观察及杂交实验设计综合实验内容：实验一、果蝇性别鉴定、性状观察与饲养方法实验二、果蝇分离定律的实验分析实验三、果蝇自由组合的实验分析实验四、果蝇的伴性遗传实验分析实验五、果蝇的三点测验实验分析实验六、果蝇的连锁与交换实验分析实验一果蝇性别鉴定、性状观察与饲养方法实验目的1、了解果蝇的生活史；3、通过实验学习掌握果蝇性别的鉴定方法；4、了解果蝇的饲养方法；5、仔细观察并记录实验室各品系果蝇的性状。2、掌握果蝇的麻醉及观察方法；（一）果蝇的生活史果蝇属于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种。它的生活史包括：卵→幼虫→蛹→成虫。受精卵一龄幼虫二龄幼虫三龄幼虫蛹成虫图一、果蝇生活史图解果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度20—25℃。10℃15℃20℃25℃卵→幼虫8天5天幼虫→成虫57天18天6.3天4.2天从表中可以看出25℃时，从卵到成虫约10天；在25℃时成虫约活15天。果蝇一般是培养在恒温箱内，盛夏时，要注意降温。生长迅速，生活史较短，短时间内可获得大量子代；容易饲养，在常温下以玉米粉做饲料就可使之生长繁殖；染色体数目少，加之唾腺染色体巨大，是细胞学观察的好材料；突变性状多，且多数是形态突变，便于观察。（二）果蝇是遗传学分析的好材料对果蝇进行检查时，可用乙醚麻醉，使它保持静止状态。因果蝇对乙醚很敏感，易麻醉，麻醉的深度看实验要求而定(作种蝇以轻度麻醉为宜，做观察可深度麻醉，致死也无妨。果蝇翅膀外展45℃角表示已死)。麻醉时将乙醚(2－3滴)滴到麻醉瓶塞的绵球上(注意不要让乙醚流到瓶内)，同时麻醉瓶要保持干燥，否则会粘住果蝇翅膀。将培养瓶倒置，让果蝇向瓶底部运动，然后打开麻醉瓶和培养瓶塞，迅速将两者瓶口相接(麻醉瓶在上，培养瓶在下)，轻拍培养瓶壁使果蝇落入麻醉瓶中，迅速盖好两个瓶塞，并倒置麻醉瓶，一分钟后果蝇即处于昏迷状态。麻醉后的果蝇放在白瓷板上，用毛笔轻轻拨动进行观察。必要时可进行第二次麻醉。观察完毕后倒入煤油或酒精瓶中(死蝇盛留器)。（三）果蝇的麻醉及观察方法（四）果蝇的雌雄鉴别果蝇有雌雄之分，幼虫期区别较难，成虫区别容易。雄性体型较小，腹部环纹5节，末端钝而圆，颜色深。第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳(sexcombs)。雌性体型较大，腹部环纹7节，末端尖，颜色浅，跗节前端无黑色鬃毛流苏。图2、雌雄果蝇（左雄，右雌）1下一张雌雄果蝇（左雌，右雄）2下一张雌雄果蝇（左雌，右雄）3返回图3、性梳性梳下一张下一张性梳（五）果蝇的培养果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为生，而是食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料。目前本实验室所用的果蝇培养基配方如下：A：蔗糖13克，琼脂1.3克，加水100毫升，煮沸溶解。B：玉米粉17克，加水80毫升，混合均匀。将B慢慢倒入A中，并不停搅动混合，加热成糊状后，再加1.4克酵母粉，混合均匀，稍冷却后加入1毫升丙酸，调匀后即可分装到培养瓶中。A、培养基的制备返回除了以上的饲料外，常用的还有米粉饲料和香蕉饲料：1.米粉饲料的配制：琼脂0.9—2.5克加入100毫升水中，加热煮沸溶解；再加10克红糖，待溶解后将8克米粉（或麸皮）倒入正在煮沸的琼脂—红糖溶液中去，不断搅拌煮沸数分钟，待成稀粥状后即可分装使用。2.香蕉饲料配制：将熟透的香蕉捣碎，制成香蕉浆（约50克）。将1.5克琼脂加到48毫升的水中煮沸，溶解后拌入香蕉浆，再煮沸后即可分装。以上两种饲料容易生霉菌，必要时需加少量防霉剂。返回培养果蝇的饲养瓶，常用的有牛奶瓶，大中型指管，用纱布包裹的棉花球作瓶塞（有条件的地方可改用泡沫塑料作瓶塞）。饲养瓶先消毒，然后倒入饲料（2厘米厚），待冷却后使用。B、培养容器返回C、原种培养在作为新的留种培养时，事先检查一下果蝇有没有混杂，以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶5—10对，移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇清醒过来后，再把培养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。原种每2－4周换一次培养基（按温度而定），每一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称，培养日期等，作为原种培养，可控制到10—15℃，培养时避免日光直射。返回（六）果蝇的性状果蝇的性状主要从以下四个方面进行观察：体色翅型眼刚毛每个方面都有不同的性状：灰体黑体b(2)黑檀体e(3)黄体y(1)红眼白眼w(1)棒眼B(1)长翅短翅m(1)卷翅Cy(2)残翅vg(2)直刚毛卷刚毛sn(1)返回1、体色灰体果蝇下一张黑檀体果蝇下一张黄体果蝇返回2、眼色红眼下一张白眼下一张棒眼返回3、翅型长翅下一张下一张短翅卷翅下一张下一张卷翅残翅返回4、刚毛直刚毛卷刚毛（七）实验室果蝇品系性状观察品系体色眼色翅型刚毛346182226认真观察实验室果蝇品系的性状，完成下表显示答案返回（七）实验室果蝇品系性状观察品系体色眼色翅型刚毛3黄红长直4灰红残直6灰白短卷18灰红长直22灰白长直26黑檀红长直认真观察实验室果蝇品系的性状，完成下表（八）思考题1、如何准确鉴定果蝇的雌雄个体？最主要特征是什么？2、果蝇的生活史分几个阶段？3、果蝇作为遗传学模式材料的优点有哪些？附：果蝇综合大实验杂交设计1、果蝇分离定律的实验分析2、果蝇自由组合的实验分析3、果蝇的伴性遗传实验分析4、果蝇的三点测验实验分析5、果蝇的连锁与交换实验分析利用实验室保存的哪两个果蝇品系进行杂交，一次实验即可验证前述四个遗传基本定律？体色翅型眼刚毛灰体黑体b(2)黑檀体e(3)黄体y(1)红眼白眼w(1)棒眼B(1)长翅短翅m(1)卷翅Cy(2)残翅vg(2)直刚毛卷刚毛sn(1)品系体色眼色翅型刚毛3黄红长直4灰红残直6灰白短卷18灰红长直22灰白长直26黑檀红长直品系体色眼色翅型刚毛3黄红长直4灰红残直6灰白w(1)短m(1)卷sn(1)18灰红长直22灰白长直26黑檀e(3)红长直正交：6(♀）×26(♂)反交：26(♀)×6(♂)设计果蝇杂交实验（PPT及纸质）一、实验目的二、实验原理三、实验材料1、果蝇材料；2、实验器具与药品四、实验步骤（技术路线）正交：6(♀）×26(♂)反交：26(♀)×6(♂)用箭头短线逐步示出实验流程，并注明每步骤所需的时间及注意事项。自行设计果蝇培养瓶标签。以8人为小组，提交PPT；纸质设计报告每人一份。正交组讲台反交组正交组反交组五、实验结果记录表格参考实验指导书，自行设计实验记录表格。六、预期的实验结果及统计学分析方法正交组：1、分离定律；2、自由组合定律；3、伴性遗传；4、三点测验反交组：1、分离定律；2、自由组合定律；3、伴性遗传；自行设计卡方检测表。七、实验中可能存在的困难、问题及解决方法亲本雌蝇为何一定要选用处女蝇？怎样才能保证所选雌蝇为处女蝇？在进行亲本杂交或F1自交一定时间后为什么要释放杂交亲本或F1？反交组为何不能直接进行三点测验？如果需要进行反交组的三点测验，应如何对实验过程加以调整？伴性遗传的性状在正交和反交的后代中为什么会出现差异？与性别的关系如何？本实验中为何正交组与反交组自由组合定律的预期分离比不同？参考文献张贵友，普通遗传学实验指导，北京：清华大学出版社，2003卢龙斗、常重杰，遗传学实验技术，合肥：中国科学技术大学出版社，1996刘祖洞、江绍慧，遗传学实验，北京：高等教育出版社，1987