血液分析质量控制-江苏[凌励]

血液分析仪质量控制概要希森美康医用电子（上海）有限公司凌励《医疗机构临床实验室管理办法》‹目的¾为加强医疗机构临床实验室管理。¾提高临床检验水平。¾保证医疗质量和医疗安全‹颁布机构¾中华人民共和国卫生部‹颁布日期¾2006-2-27发布，2006-6-1起施行‹水平¾临床实验室的基本要求《医学实验室－质量和能力的具体要求》国际标准草案ISO文件：ISO/DIS15189,2-20022003年3月正式颁布，核心是加强实验室全面质量管理Particular:特别的，苛刻的，特殊的CAP认证和CLIA‹CAP认证：¾指由美国病理学会对临检实验室进行的认可活动，¾认可依据的标准是CAP自己制定的文件，¾主要参照了美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的业务标准和操作指南。•NCCLS：NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards•CLSI：ClinicalAndLaboratoryStandardsInstitute,2005‹CLIA67：¾美国国会在1967年通知第一个专门对临床实验室管理的法律即临床实验室改进法案（ClinicalLaboratorylmprovement,Act1967），¾由疾病控制中（CDC）对跨州进行业务活动的实验室进行认可，‹CLIA88：A¾美国国会在1988年通过对CLIA67的修正案（ClinicalLaboratorylmprovementAmendment88）¾1992年正式实行。CLIA88是一个法律文件，在美国公布的法律为493章，题目为“实验室要求”。多通道血液分析仪室内质量控制性能目标‹H26-A：NCCLS，1996¾PerformanceGoalsfortheInternalQualityControlofMultichannelHematologyAnalyzers;ApprovedStandard.¾批准的方案¾Calibrationoftheinstruments¾Imprecisionoftheanalyticalmeasurements¾Analyticvariationwithinanindividual¾Inherentdifferenceinvaluesamongpersons自动血液分析仪的质量控制和校正‹CalibrationandQualityControlofAutomatedHematologyAnalyzers;ProposedStandard(H38-P)NCCLS.1999；19（7）；1～29白细胞分类参照标准和仪器方法评价，2007网织红细胞计数方法（自动血细胞计数仪；流式细胞仪；活体染色）；批准指南‹MethodsforReticulocyteCounting(AutomatedBloodCellCounters,FlowCytometry,andSupravitalDyes);ApprovedGuideline–SecondEdition(H44-A2)AnNCCLS-ICSHjointproject.2004血液分析仪的校正的要求‹血液分析检测系统的完整性、有效性¾血液分析仪¾配套的试剂¾配套的校正品¾适当的质控品¾其他耗材校准与校准品‹校准（1991年ICSH的定义）¾在特定条件下，测定分析过程偏倚的转换因子，以获得准确的测量结果。¾必须用合适参考方法、参考品或校准品。¾必须按厂商特定的方法进行校准。‹校准品(1991年ICSH的定义)¾一种用以校准测量、分级或调准的物质¾必须能溯源到一种参考标准¾必须确定厂商提供/建议的校准品设定值的有效性¾如为多种物质校准品，应验证每种测量物质四川华西医科大学第一附属医院HST-402-XE复旦大学附属华山医院HST-302-XE校准方案实例‹SYSMEXXE-2100血液分析仪校准方案‹校准频度¾每年校准2次，上半年一次下半年一次（用SCS-1000进行校准，由工程师进行操作）。‹校准前工作¾精密度测试：取两个不同值标本，每份连续测11次结果，去除每份第一次结果进行统计。要求符合精密度标准。¾线性评价：由CAP提供CBC-Line，每年两次¾校准前后病人标本结果比对，新鲜血close和open进样模式结果比对，做质控，由实验室操作人员完成。项目比对要求CV%精密度要求CV%RBC、HBB±1.5%B±1%WBCB±5%B±3%PLTB±8%B±4%‹校准后工作¾每次校准完后立即做质控比对，质控应在控。¾再用5份新鲜血液标本做全自动闭盖进样和手动开盖进样间的比对，若检测参数两种检测模式的结果在允许的偏差之内，就不再对全自动闭盖进样模式进行校正，反之，则需用新鲜样本按校正模式对全自动闭盖进样模式进行校正。室内质控方案实例‹质控品（4种）：¾市临检中心（1种）、Sysmex（高、中、低值3个水平e-CHECK）¾储存条件：2℃～8℃¾质控品开启后应注明开启日期，失效期并签名。‹质控频度：¾每天开机后在标本检测前进行一次质控品的分析（4个质控品均做）。¾从冰箱中取出e-CHECK，使用前检查有效期及状况（如极度溶血或失效，应及时更换）,在室温环境下（18～30℃）静置15分钟。混匀至红细胞完全混合，在质控模式下进行检测。‹质控期望值：至少满足2个e-CHECK在靶值±极限值内，记录质控结果后开始做标本。‹失控时应采取的措施：¾检查质控品是否在有效期内，过期或近过期需更换新的质控品¾检查试剂情况，是否需更换。¾检查仪器的各项参数是否在控¾如各项检查操作后质控仍失控则联系工程师，责任人需通知组长。¾每次失控必须分析原因，记录处理过程并签名。失控记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。‹更换批号后靶值设定：¾取开始10次QC结果，计算均值，为靶值，靶值应落在厂商提供的范围内，以累计6个月CV%均值（或近两个月CV%较大值），通过均值乘以CV%=1SD,质控范围设定为2.7SD。由组长或组长指定人员负责计算。‹定期打印质控曲线，曲线上注明使用质控品的批号和效期，并签上责任人姓名。‹所有室内质控打印及记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。‹每日由操作员记录质控状况与记录本。批号质量控制品是否失效混匀更换批号超出质控点：显性失效试剂是否配套保质期电压仪器温度失控是否检修操作加样是否准确是否更换新手操作批号未超出质控点：隐性失效试剂沉淀析出温度电压电源仪器是否修改参数是否磨损失控原因查找程序图使用国产试剂存在的主要问题‹溶血素溶解红细胞不全¾细胞碎片报警¾血红蛋白结果不稳定‹平均红细胞体积（MCV）变异大¾浮动均数易漂移‹血小板检测本低高¾低值血小板结果受干扰¾血液病病人的治疗风险‹盐份（磷酸缓冲液）含量高，管道接口渗漏，导致仪器部件腐蚀血液分析仪的性能评价方案稀释效果精密度携带污染可比性准确性标本陈旧干扰血细胞计数仪＋＋＋＋＋＋＋白细胞分类仪＋＋＋＋＋＋＋网织细胞计数仪－＋＋＋＋＋＋流式细胞仪－＋＋－－＋－血液分析仪白细胞分类评价方案‹CLSI：H20-A2分类%范围分类%范围分类%范围00~0.33225.4~38.66659.3~72.70.10~0.53326.4~39.66760.4~73.60.50~1.53427.3~40.76861.4~74.610~2.43528.3~41.76962.5~75.520.0~4.03629.2~42.87063.5~76.530.6~5.43730.2~43.87164.6~77.441.2~6.83831.1~44.97265.7~78.351.9~8.13932.1~45.97366.7~79.362.6~9.44033.1~46.97467.8~80.273.4~10.64134.0~48.07568.9~81.184.2~11.84235.0~49.07670.0~82.095.0~13.04336.0~50.07771.0~83.0105.8~14.24437.0~51.07872.1~83.9116.6~15.44538.0~52.07973.2~84.8127.4~16.64639.0~53.08074.3~85.7138.2~17.84739.9~54.18175.5~86.5149.1~18.94840.9~55.18276.6~87.41510.0~20.04941.9~56.18377.7~88.31610.8~21.25042.9~57.18478.8~89.21711.7~22.35143.9~58.18580.0~90.01812.6~23.45244.9~59.18681.1~90.91913.5~24.55345.9~60.18782.2~91.82014.3~25.75447.0~61.08883.4~92.62115.2~26.85548.0~62.08984.6~93.42216.1~27.95649.0~63.09085.8~94.22317.0~29.05750.0~64.09187.0~95.02418.0~30.05851.0~65.09288.2~95.82518.9~31.15952.0~66.09389.4~96.62619.8~32.26053.1~66.99490.6~97.42720.7~33.36154.1~67.99591.9~98.12821.7~34.36255.1~68.99693.2~98.82922.6~35.46356.2~69.89794.6~99.43023.5~36.56457.2~70.89896.0~1003124.5~37.56558.3~71.79997.6~100白细胞分类Rümke表血液分析仪检测的干扰什么情况将血小板当白细胞数了？什么情况将白细胞当红细胞数了？什么情况将白细胞当血小板数了？什么情况将红细胞当血小板数了？什么情况将红细胞当白细胞数了？什么情况将血小板当红细胞数了？重视仪器的报警信息男,7天，检测时间时间:2006-5-11仪器和镜检的差异仪器镜检评价WBC57.2x109/LWBC人工镜检校准值5.1x109/LRBC5.03x1012/L难溶RBC严重干扰WBC的计数这样的案例必须镜检才能报告,机器没用脂血(XE-2100检测结果)脂血异常结果‹WBC,RBC,HGB,PLT都受干扰，都有报警提示。‹白细胞、血小板采用荧光染色法自动纠正。‹红细胞、血红蛋白没有纠正。‹MCV,MCH,MCHC都是错误结果。‹表现形式：¾MCHC360g/L¾或MCH36pg‹纠正方法：¾慢速离心，吸取一定量的血浆，再加入相同量的稀释液后再检测。红细胞假性减少：冷球蛋白表现形式和对策‹表现形式¾MCHC360g/L¾或MCH36pg¾假性低RBC，¾假性高MCV‹解决方案：将标本在37度水浴半小时PLT假性减低部分干扰因素血小板假性计数结果减低有关参数改变PLT聚集（EDTA抗凝剂等）血小板聚集，被计数为WBCPLT卫星现象（主要与EDTA相关）:围绕NC等PLT－中性粒细胞聚集（主要与EDTA相关）白细胞计数假性减低大PLT（超出设定范围）计数为白细胞标本内凝血异常CBC过分充盈（混合不当）异常CBC脂肪（脂肪餐后标本、脂滴）白细胞和血红蛋白假性增高EDTA-K2依赖血小板凝集（EDP）‹EDTA致血细胞分析仪血小板计数假性减少的病理机制，到目前为止并不是特别清楚.‹可以确定的原因之一是：¾EDTA致血小板假性减少的发生，是在EDTA盐作为抗凝剂的前提下出现的免疫介导的血液中冷抗血小板自身抗体¾BragnaniG等认为，EDTA可导致血小板活化，因而改变血小板膜表面某种隐匿性抗原构象，与存在于血浆中的自身抗体结合，激活PLA、PLC、AA、ADP、5-TH等活性物质。¾这些活性物质又能活化血小板纤维蛋白原受体，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团，出现使血小板互相凝集现象。¾这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体直接作用于血小板膜糖蛋白IIb/IIIa上。‹流行病学调查，EDP的发生率在0.07-0.