骨髓染色

骨髓细胞化学染色(一)过氧化酶染色（POX）【结果判断】细胞中出现蓝绿色颗粒为阳性反应。按颗粒大小和密集程度分为强阳性和弱阳性。【临床意义】过氧气酶主要存在于粒细胞系统，除早期原始粒细胞外，其后各阶段均呈阳性反应。单核细胞从幼稚单核细胞起呈弱阳性反应。淋巴细胞各阶段均为阴性。故对急性粒细胞白血病和急性淋巴细胞、急性粒细胞与急性单核细胞白血病的鉴别诊断有帮助。急性淋巴细胞白血病全部阴性，急性单核细胞白血病POX颗粒细小、染色浅淡。(二)中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞中，其他细胞均阴性。网状细胞及吞噬细胞的酶活性很强。【结果判断】染色结果，在细胞浆中出现灰色至棕黑色颗粒者为阳性，阴性与阳性程度可表示为：(一)胞浆呈淡红色，无颗粒。(＋)全部胞浆呈淡灰色，无颗粒。或胞浆中出现棕黑色或黑色颗粒，但不超过整个细胞的1/4。(十十)同(＋)，胞浆呈灰色，或颗粒不超过细胞1/2。(＋十十)胞浆内充满棕黑色或黑色颗粒，但尚不十分致密，范围可超过整个细胞的3/4。(十十十十)颗粒粗大稠密，甚至遮盖细胞核。以积分值表示：正常人阳性率一般在40%左右，NAP积分值80分左右，以弱阳性为主。【临床意义】(1)急性白血病与中性粒细胞类白血病样反应的鉴别。前者NAP减弱，后者活性明显增强。(2)慢性粒细胞性白血病时降低。阵发性睡眠性血红蛋白尿患者的成熟粒细胞NAP降低。(3)急性淋巴细胞白血病、淋巴肉瘤、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症、骨髓硬化症患者NAP明显增强。(4)再生障碍性贫血时NAP增强，而其他类型贫血多无变化。(5)激素的影响，垂体肾上腺皮质功能亢进，或应用皮质激素时NAP增强。妊娠亦出现NAP增强。(三)糖原染色(PAS)糖原存在于细胞浆内，粒系统细胞自早幼粒细胞开始就可呈现阳性，阳性程度随细胞成熟而增强。成熟中性分叶粒细胞糖原最为丰富。单核细胞呈弱阳性。成熟巨核细胞亦呈阳性。淋巴细胞和幼稚红细胞亦现阳性。【结果判断】(1)中性粒细胞(十)胞浆内呈淡红色，无颗粒。(十十)胞浆呈粉红色，有少量小颗粒o(十十十)胞浆内呈片状深红色。(十十十十)胞浆内呈深紫红色。(2)淋巴细胞(十)胞浆内呈弥散淡红色或少数红色颗粒(9个)。(十十)胞浆内呈弥散较深的淡红色，或少数红色颗粒(10个)。(十十十)胞浆内多数红色颗粒或小块或大块红色物质。(十十十十)胞浆内多数红色颗粒或红色块状物。(3)幼稚红细胞(一)无反应，正常红细胞为(一)。(十)胞浆内有少数红色散在颗粒，或弥漫淡红色。(十十)胞浆内有1～10个中等大小的红色颗粒或弥漫性红色。(十十十)胞浆中有11～20个较粗红色颗粒，或弥漫深红色。(十十十十)胞浆中深紫红色粗大而呈块状或充满均匀的红色物质。以积分值表示：正常人成熟淋巴细胞PAS阳性率参考值为20%以下，积分值一般在30以下。幼稚红细胞积分参考值40。【临床意义】(1)急性白血病鉴别诊断。急性粒细胞白血病PAS多为阳性。急性单核细胞白血病阳性率和积分较高，颗粒细小而多，急性淋巴细胞白血病的幼稚细胞中PAS染色呈大块红色物。(2)慢性淋巴细胞白血病中的淋巴细胞糖原增加，而慢性粒细胞性白血病中的淋巴细胞糖原积分正常。(3)淋巴细胞增生性疾病。如淋巴肉瘤、何杰金病、传染性单核细胞增多症等，淋巴细胞的糖原积分增高，一般病毒感染性疾病糖原在正常范围。感染、骨髓增生综合征及再生障碍性贫血，成熟中性粒细胞糖原增加。(四)酸性磷酸酶染色(ACP)网状细胞、吞噬细胞、白细胞系统(其中粒细胞系统最强)均有此酶活性。【结果判断】在细胞内有酶活性部位可呈现棕黄色；近乎黑色的硫化铅沉着，主要在细胞浆。【临床意义】(1)此酶对网状细胞、吞噬细胞、高雪(Gaucher)细胞、组织细胞、单核细胞均呈阳性反应。在急性单核细胞白血病时，原始及幼单核细胞常有强的反应。急性粒细胞性白血病的原始细胞酶的反应不一，急性淋巴细胞性白血病原始细胞常有弱阳性反应。亦有助于高雪病的诊断。(2)毛细胞性白血病细胞呈阳性反应，且不为左旋-酒石酸所抑制，故本法加酒石酸抑制试验有助于毛细胞性白血病的确诊。(3)感染类白血病样反应，成熟中性粒细胞此酶常增高。(五)特异性酶酶染色(SPE)此酶为中性粒细胞所特有。【结果判断】细胞浆中出现红宝石样颗粒为阳性。阳性反应见于粒系细胞，原始粒细胞呈弱阳性；早幼粒细胞呈强阳性；嗜酸性粒细胞呈阴性或弱阳性；嗜碱性粒细胞呈强阳性。单核细胞一般为阴性，也可出现弱阳性反应；淋巴细胞呈阴性反应。【临床意义】急性粒细胞性白血病时，原粒和幼粒细胞SPE呈强阳性反应，但成熟粒细胞的酶活性下降或消失；急性单核细胞性白血病一般呈阴性反应，若出现弱阳性，则可用非特异性脂酶染色法及氟化纳抑制试验来进行判断；急性淋巴细胞白血病为阴性反应。(六)非特异性酶酶染色(SPE)非特异性酯酶又称单核细胞酯酶，主要存在于单核细胞和组织细胞内【结果判断】胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性。在单核细胞、吞噬细胞中此类酶的含量较多且多数受到氟化钠（NaF）抑制；粒细胞、淋巴细胞、部分幼红细胞、巨核细胞和血小板等呈阴性。【临床意义】1.非特异性酯酶又称单核细胞酯酶，主要存在于单核细胞和组织细胞内，正常单核细胞细胞各阶段均成阳性，且可被氟化钠抑制。2.急性粒细胞白血病可呈阳性或弱阳性，急性早幼粒细胞白血病细胞呈强阳性，但不被氟化钠抑制。3.急性淋巴细胞白血病一般为阴性。(七)铁染色正常骨髓中有一定量的铁，以含铁血红素形式贮存，供细胞利用，以合成血红蛋白，这种贮存铁称为细胞外铁;骨髓中有核红细胞也含有铁颗粒，称细胞內铁，他们经盐酸作用释放出高铁离子，与亚铁氰化钾作用，形成亚铁氰化铁，呈蓝色颗粒。【结果判断】【临床意义】降低：见于缺铁性贫血。缺铁性贫血时骨髓细胞外铁明显降低，甚至消失，铁粒幼细胞降低。经铁剂治疗后，细胞外铁增多。铁粒染色可作为诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的一个方法。升高：见于铁粒幼细胞贫血、骨髓增生异常综合征（铁粒幼细胞难治性贫血）等。另外，也见于溶血性贫血、营养性巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血和白血病、感染、肝硬化、慢性肾炎、尿毒症、多次输血、血色病等，细胞外铁也可增加。