饲料分析及质量检测

1饲料常规成分分析2014年12月13日19:13:182目的要求1.掌握moisture、crudeash测定；2.掌握ＣP(crudeprotein),crudelipid[etherextract(EE)]的测定；3.掌握Ca、P的测定。2014年12月13日19:13:183一、饲料水分的测定（GB6435-86）1、饲料中初水的测定鲜样在60~65℃的恒温干燥箱中烘8～12h，失去部分水份后，再回潮与空气湿度保持平衡，失去的水分为饲料的游离水即初水。2014年12月13日19:13:1842、饲料中吸附水的测定▲A、原理：105±2℃、一个大气压下烘干，试样至恒重，逸失的重量为水分【奶制品、动物和植物油脂及矿物质除外】。2014年12月13日19:13:185电子天平▲B、水分测定相关设备冷冻真空干燥仪干燥箱冷冻干燥仪2014年12月13日19:13:186▲C、测定步骤称样皿编号并恒重精确称取试样2~5g，用已恒重的滤纸包好并放入称样皿不盖称样皿盖，105℃烘3h盖好称样皿盖，燥器冷却30min称重粉碎试样，过40目脱脂滤纸恒重恒重2014年12月13日19:13:187▲D、计算式中：W1──105℃烘干前试样、滤纸及称样皿重，g；W2──105℃烘干后试样、滤纸及称样皿重，g；W0──已恒重的滤纸及称样皿重，g。水分（％）＝W1－W2W1－W0×1002014年12月13日19:13:188▲E、注意•1、重复性：两个平行样测定值相差不得超过0.2%；含水量在10%以上，允许偏差为1%；含水量在5%~10%以上，允许偏差为3%；含水量在5%以下，允许偏差为5%；2014年12月13日19:13:189•2、含脂肪高的样品，烘干时间过长反而增重;•3、含糖分高，易分解或焦化试样，应用减压干燥法测定水分;•4、含挥发性物质的样品，测定结果偏大。2014年12月13日19:13:18103、其他测定方法•真空干燥法；•冷冻干燥法；•蒸馏法；•离心浓缩法2014年12月13日19:13:18111、原理：★样品在550~600℃高温下灼烧后，有机物质被氧化逸失，所剩残渣为粗灰分（含氧化物、无机物、砂石）。二、饲料粗灰分的测定（GB/T6438—92）2014年12月13日19:13:18122、仪器茂福炉（高温炉）2014年12月13日19:13:18133、测定步骤550~600℃下灼烧坩埚(恒重）称取样品2~5g，装入已恒重的坩埚空气中冷却1min，放入干燥器中冷却30min称量高温炉中灼烧2~4h（灰化）直接灰化法醋酸镁灰化法硫酸灰化法样品粉碎过40目炭化至无烟恒重2014年12月13日19:13:18144、计算式中：m0——恒质空坩埚质量，gm1——坩埚加试料的质量，gm2——灰化后坩埚加灰分的质量，g粗灰分（%）=m2-m0m1-m0×1002014年12月13日19:13:18155、注意及误差•A、重复性▲粗灰分含量在5%以上，允许相对偏差为1%；▲粗灰分含量在5%以下，允许相对偏差为5%。•B、灰化温度550-600℃，若低于550℃，结果偏高；若大于600℃，结果偏低；2014年12月13日19:13:1816•C、灼烧残渣颜色与试样中各元素含量有关。灰化后如能观察到炭粒，须加蒸馏水或过氧化氢进行处理。•D、样本重量据粗灰分含量定，粗灰分含量高的称少点。反之，则称多点。2014年12月13日19:13:1817三、饲料粗蛋白的测定（GB/T6432—94）1.测定原理2NH2(CH2)COOH+13H2SO4(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2(NH4)2SO4+2NaOH2NH3↑+2H2O+Na2SO44H3BO3+NH3NH4HB4O7+5H2ONH4HB4O7+HCl+5H2ONH4Cl+4H3BO3CuSO4或硒粗蛋白含量=N%×6.252014年12月13日19:13:18182.仪器设备2014年12月13日19:13:1819凯氏蒸馏装置2014年12月13日19:13:18202014年12月13日19:13:1821消化炉2014年12月13日19:13:18223.试剂•(1)硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。•(2)混合催化剂(K2SO4/Na2SO4+CuSO4)•(3)氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（m/v）。•(4)硼酸：化学纯，20g/L水溶液（m/v）。2014年12月13日19:13:1823•(5)混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合。•(6)0.02mol/L盐酸标准溶液：用无水碳酸钠标定。c（HCl）＝0.02mol/L。【1.67mL盐酸（分析纯），注入1000mL蒸馏水中】。•(7)蔗糖：分析纯。•(8)硫酸铵：分析纯，干燥。2014年12月13日19:13:18244.饲料粗蛋白的测定步骤试样消化氨的蒸馏滴定空白滴定计算前进2014年12月13日19:13:18251）试样消化▲A、样品粉碎过40目;▲B、称重，准确至0.0002g，放入消化管底部;高蛋白样品：0.5～1g；低蛋白样品：2～3g。▲C、加催化剂(6gK2SO4或Na2SO4和0.4gCuSO4)、10ml浓硫酸，2粒玻璃珠;▲D、消化至透明的蓝绿色，再继续消化15min;▲E、空白消化•同B、C，将样品换为0.5g蔗糖（或用蒸馏水）返回2014年12月13日19:13:18262）氨的蒸馏常量蒸馏法半微量蒸馏法•a、将试样消煮液冷却，加入20mL蒸馏水，定容至100mL为试样分解液；•b、将蒸馏装置的冷凝管末端浸入有20mL硼酸和2滴混合指示剂的锥形瓶内；2014年12月13日19:13:1827•c、蒸汽发生器的水中加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，并加热产生蒸汽；•d、准确移取试样分解液10～20mL注入蒸馏装置的反应室中，加10mL氢氧化钠溶液，塞好玻璃塞，且加水密封；•e、蒸馏4min，使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1min，停止蒸馏。返回2014年12月13日19:13:18283）滴定：•用0.1mol/L的盐酸标液滴定吸收液，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。返回2014年12月13日19:13:18294）空白滴定•空白消化液蒸馏后进行滴定。•消耗0.1mol/L盐酸标液不得超过0.2mL。•消耗0.02mol/L盐酸标液不得超过0.3mL。返回2014年12月13日19:13:1830粗蛋白质（%）=（V1-V2）×C×0.0140×6.25m×V’/V5、计算式中：V1——滴定试样时所需盐酸标液，ml；V2——滴定空白所需盐酸标液，ml；C——盐酸标液浓度，mol/L；m——试样质量，g；V——试样分解液总体积，ml；V’——试样分解液蒸馏用体积，m/L；0.0140——每毫克当量氮的克数；6.25——氮换算成蛋白质的平均系数。返回2014年12月13日19:13:18316、注意及误差★1）重复性•CP在25%以上，允许相对偏差为1%；•CP在10%~25%之间，允许相对偏差为2%；•CP在10%以下，允许相对偏差为3%。2014年12月13日19:13:1832★2）试样的粉碎粒度★3）试样的用量★4）样品的消化•硫酸用量，据样品用量确定；•硫酸钾或硫酸钠的用量不能过大；•消化液冷却后呈固态，则说明硫酸钾用量过大或硫酸不足；•消化液浑浊，应冷却后加入H2O2再加热；•消化时，应在瓶底加热。2014年12月13日19:13:1833★5）蒸馏的方法和时间★6）盐酸标液的浓度•常量法中标液取0.1M较合适；•半微量法中标液在0.02～0.05M较合适。2014年12月13日19:13:1834紫外分光光度法双缩脲法6.粗蛋白的其他测定方法2014年12月13日19:13:1835四、饲料粗脂肪的测定（GB/T6433—94）1、测定原理在Soxhlet脂肪提取器中用乙醚提取试样，据试样质量和残渣质量之差计算脂肪含量。脂肪中含有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等。测出的脂肪含量即为乙醚浸出物etherextract（EE)2014年12月13日19:13:18362、仪器2014年12月13日19:13:1837索氏脂肪抽取仪脂肪测定仪2014年12月13日19:13:18383、操作步骤滤纸恒重105℃下样品恒重取样并包于已恒重的滤纸将恒重的滤纸包放入抽提瓶，在60~75℃下浸提5~7h105℃下干燥2h称重试样粉碎至40目测定水分后的样品取出滤纸包使乙醚挥发恒重2014年12月13日19:13:18394、计算式中：Ｗ─试样质量，gＷ1─装有试样滤纸包浸提前质量,gＷ2─装有试样滤纸包浸提后质量,g粗脂肪（％）=Ｗ2－Ｗ1Ｗ×1002014年12月13日19:13:18405、注意及误差•1、重复性；EE在≥10%，允许相对偏差为3%。EE10%，允许相对偏差为5%。•2、试样粗细度适宜；•3、测定时应在通风处进行。2014年12月13日19:13:1841五、饲料中钙的测定（GB／T6436—92）1、测定原理CaCl2+(NH4)2C2O4CaC2O4↓+2NH4ClCaC2O4+H2SO4CaSO4+H2C2O4KMnO4+5H2C2O4+3H2SO410CO2↑+MnSO4+8H2O+K2SO42014年12月13日19:13:18422、试剂•（1）硝酸•（2）盐酸溶液：1+3•（3）硫酸溶液：1+3•（4）氨水溶液：1+1；1+50•（5）草酸胺溶液（42g/L）：4.2g草酸胺溶于100mL水溶液中•（6）高锰酸钾标准[c（1/5KMnO4）=0.05mol/L]（Na2C2O4标定）•（7）甲基红指示剂（1g/L）：0.1g甲基红溶于100mL95%乙醇中2014年12月13日19:13:18433、仪器•（1）实验室用样品粉碎机或研钵。•（2）析筛：孔径0.42mm（40目）。•（3）分析天平：感量0.0001g。•（4）高温炉•（5）坩埚：瓷制。•（6）容量瓶：100mL。•（7）玻璃漏斗：直径6cm。•（8）定量滤纸：中速，7～9cm.•（9）移液管：10，20mL。2014年12月13日19:13:18443、操作步骤550~600℃下样品灰化并恒重制备试样分解液过滤，并用氨水洗涤沉淀滴定试样粉碎至40目测定灰分后的样品坩埚恒重样品装入恒重坩埚并炭化将沉淀及滤纸转入烧杯中，加H2SO4溶解沉淀空白取试样分解液10~20ml，加蒸馏水、指示剂、氨水，煮沸，加草酸铵，搅拌煮沸并过夜2014年12月13日19:13:18456、计算式中：X——以质量分数表示的钙含量，%；V1——样品灰化液定溶体积，mlV2——测定时样品液用量，mlV3——试样消耗KMnO4标液的体积，mlV0——空白消耗KMnO4标液的体积，mlc——KMnO4标液的浓度，mol/L0.02——与1.00mlKMnO4标液相当的钙的质量X（%）=(V3-V0)×c×0.02mV1V22014年12月13日19:13:18467、注意及误差•1、重复性含钙量10%以上，允许相对偏差2%；含钙量在5%~10%时，允许相对偏差3%；含钙量1%~5%时，允许相对偏差5%；含钙量1%以下时，允许相对偏差10%。•2、高锰酸钾液浓度不稳定•3、每种滤纸的空白值不同2014年12月13日19:13:1847•4、洗涤时须等上次洗涤液完全滤净后再加氨水；•5、干法分解的样品应冷却至室温时再加盐酸，且沿坩埚壁滴加；•6、测定中，滴加氨水至溶液橙色时需小心慢滴，且边加边搅拌；•7、含钙较高时，应用250ml容量瓶定溶。2014年12月13日19:13:18488、其他测定方法•乙二胺四乙酸二钠（EDTA）络合滴定法2014年12月13日19:13:1849六、饲料总磷量的测定（钼黄法）1、测定原理：•将试样的有机物破坏，使磷游离出来，在