上课动物细胞培养和核移植技术

动物细胞工程常用的技术1、概念：是从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞,放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖一、动物细胞培养胚胎组织或幼龄动物组织贴壁生长接触抑制5%CO2维持培养液的pHP46讨论剪碎胰蛋白酶10代以后，细胞增殖缓慢，细胞核型可能变化贴壁生长接触抑制2、动物细胞培养过程：转入培养液中进行原代培养转入培养液中进行传代培养制成细胞悬液胰蛋白酶制成细胞悬液细胞贴壁:培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖.有关概念细胞接触抑制细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。有关概念原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。有关概念细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。动物组织细胞间隙中含有一定量的蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。传代培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶（分解弹性纤维）10代细胞原代培养50代细胞细胞株无限传代细胞系动物细胞培养讨论:细胞株与细胞系的特点有何不同?思考：1.根据细胞生活的内环境的知识，体外培养细胞时需要提供哪些物质？2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？3、动物细胞培养的条件（抗生素，更换培养液）①无菌、无毒②营养：与体内基本相同③温度和PH④气体环境（95%空气+5%CO2）（36.5±0.5℃7.2-7.4）（合成培养基）培养目的培养基特有成分培养基性质原理动物细胞培养植物组织培养植物组织培养、动物细胞培养的比较细胞的全能性获得细胞或细胞产物获得植株或细胞产品物动物血清植物激素液体培养基固体培养基细胞增殖4.动物细胞培养技术的应用1生物制品的生产如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体2基因工程中的受体细胞的培养、获得大量自体健康皮肤3用于检测物质的毒性4细胞的生理、药理、病理研究1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是--------------------（）A．细胞系B．细胞株C．原代细胞D．传代细胞2、动物细胞工程技术的基础是------（）A.动物细胞融合B.单克隆抗体C.胚胎移植D.动物细胞培养AD3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（）A.容易产生各种变异B．具有更强的全能性C.取材十分方便D．分裂增殖的能力强D4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于------------------------------（）A.培养基不同；B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。A离体的植物组织或细胞在适当的条件下可发育成完整的植株，那么，是否能用类似的方法，使动物的细胞发育成一个完整的个体？克隆羊多利二、细胞核移植技术和克隆动物Ａ绵羊Ｂ绵羊乳腺细胞卵细胞重组胚胎C母绵羊子宫多莉羊克隆羊多利的培育过程细胞核移植胚胎移植(减Ⅱ中期卵母细胞)1、概念——将一个动物的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组发育成新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。2、结果：3、原理：克隆动物动物细胞核的全能性二、细胞核移植技术和克隆动物4、种类体细胞核移植胚胎细胞核移植（难度较高）5、体细胞核移植的过程（克隆高产奶牛）高产奶牛（供体）供体细胞培养(去核)重组胚胎胚胎移植MⅡ期卵母细胞重组细胞P496、应用①器官移植②加快家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育④转基因克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白③保护频危物种⑤体细胞核移植技术用于人类疾病治疗7、存在问题①成功率非常低③对克隆动物食品的安全性问题也存有争议②存在健康问题P50思考与探究第2步提炼——要点归纳，整合提升1．体细胞核移植技术过程分析第4步巧练——精选习题，落实强化1．(2015·海淀区高二检测)下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述不正确的是()A．该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植B．通常采用减数第二次分裂期卵母细胞作为受体细胞C．可通过显微操作法除去卵母细胞核D．克隆动物是对提供体细胞核的动物进行了完全复制D2．乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂发育成重组胚胎，再植入丙马的子宫内发育，结果产下一匹小马。下列叙述正确的是()A．直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎B．小马的性状与甲马完全相同C．此项技术可用于保护濒危物种D．该过程可以很好地证明动物细胞的全能性C