小管形成

事先准备：1、提前一天将基质胶放在4度冰箱融化（注意：基质胶在-20为冰冻状态，4度为液态，常温下即会凝固，且不会再溶解，所以胶要始终放于低温）2、提前一天将黄色中枪头、96孔板放在负20度冰箱预冷，防止使用时基质胶凝固步骤:1、在无菌操作台中照上需要用到的用品和冰盒2、将融化的基质胶和96孔板放于照好的冰盒中，途中也要放在冰盒上3、每孔加入60ul左右的基质胶（50-60ul），注意枪头不要打净，以免产生气泡。此步操作要迅速，防止胶凝固4、加好胶后，可轻轻摇动混匀，注意不要产生气泡。可先将板子放在4度冰箱，板子上用东西压着，以使胶平坦，放置10min5、然后取出板子放于培养箱中，至少30min。注意不要被人碰到，防止胶不均匀和产生气泡6、计数每孔中加入100ul细胞悬液，每孔约2-3×104个细胞。在镜下观察，根据情况调整细胞数，保证细胞数量适中，已形成单层细胞0最适。7、根据细胞的成管情况观察，一般在6-8h观察成管，不超过12h。但有的细胞成管速度较快，要定时观察。