药物分析课件第10章A-甾体激素类药物的分析

第十章甾体激素类药物的分析基本要求结构与性质返回主目录鉴别试验杂质检查含量测定练习与思考概述基本要求1．掌握甾体结构类药物的结构特点与分析方法之间的关系。2．掌握甾体类药物的鉴别原理与方法。3．掌握甾体类药物的含量原理与方法。4．熟悉甾体类药物杂质检查的方法。返回基本结构：环戊烷骈多氢菲C20C21ABCD12345678910111213141516171819概述分类：甾体激素肾上腺皮质激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素OHOOHOCH2OHHHH肾上腺皮质激素氢化可的松OHOOHOHFHOCH3OHCH3肾上腺皮质激素醋酸地塞米松OHOHOHCH3HHHOHFCH3O肾上腺皮质激素曲安息龙OHOHCH3HHHHOFCH3OOPONaOONaOH肾上腺皮质激素地塞米松磷酸钠雄性激素OCH3HHCH3OHHCH3甲睾酮OOHHHHOCH3雄性激素丙酸睾酮OOHHHHO蛋白同化激素苯丙酸诺龙孕激素黄体酮OCH3HHHCH3OHCH3OCH3HHCH3OOHCH3OCH3CH3孕激素醋酸甲地孕酮雌性激素炔雌醇OHCH3HHHCCHHO雌性激素OHCH3HHHHHO雌二醇OHOHHHCH3HCCH炔诺酮此外OHOHHHH3CHCCH炔诺孕酮返回一、结构与性质1.肾上腺皮质激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应C17–α–醇酮基还原性2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应C17–β–羟基可成酯3.孕激素主要活性基团性质△4–3–酮UV、与羰基试剂反应C17–甲酮基与亚硝基铁氰化纳反应4.雌性激素主要活性基团性质A环为3–OH苯环UV、与重氮苯磺酸盐反应C17–乙炔基与AgNO3反应C17–羟基可成酯返回二、鉴别试验（一）与强酸的呈色反应甾体激素类药物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）与硫酸显色反应显色荧光加水稀释泼尼松龙深红絮状↓灰泼尼松橙黄→蓝绿炔雌醚橙红黄绿↓红色炔雌醇橙红黄绿絮状↓玫红醋酸可的松黄或微褪色并澄带橙清(二)官能团的反应肾上腺皮质激素药物呈色四氮唑盐OHˉ1、C17–α–醇酮基还原性呈色反应此外还有斐林试液、多伦试液甾酮类激素药物呈色羰基试剂2.C3–酮基和C20–酮基＃常用的羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼具有甲酮基或活泼亚甲基的甾体激素类药物呈色亚硝基铁氰化纳间二硝基酚芳香醛3.甲酮基黄体酮蓝紫色亚硝基铁氰化纳其他甾体淡橙色不显色有机氟Fˉ有机破坏有机氯Clˉ4.有机卤素茜素氟蓝硝酸亚铈硝酸—硝酸银AgCl↓呈色雌激素类药物红色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羟基含炔基的甾体激素银盐沉淀硝酸银6.乙炔基的沉淀反应RCCHAgNO3RCCAg↓(三)制备衍生物测定m.p.盐酸氨基脲苯丙酸诺龙△缩氨基脲衍生物1.缩氨基脲的生成m.p.约180℃（分解）2.酯的水解丙酸睾酮碱性条件睾酮m.p.为150℃~156℃△４-3-酮、苯环、其他共轭结构（四）UV法1.结构依据240nm左右280nm左右2.示例曲安西龙丙酸倍氯米松溶剂甲醇乙醇20μg/ml浓度20μg/ml结果判断在238nm处有最大吸收在239nm处有最大吸收，A为0.57～0.60，在239nm与263nm处的吸收度比值为2.25～2.45结构特征：酚羟基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇OHCCHHO（五）IR法1505cm-1νOH3505cm-13300cm-1νCHCC1590cm-13610cm-1νOH酚羟基醇羟基1615cm-1苯环的骨架振动黄体酮COHHHCH3O结构特征：△４-3-酮、C17-酮基1700cm-1C=O20位酮基1665cm-13位酮基1615cm-1870cm-1C-H双键（七）TLC法主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别方法：对照品法要求供试品溶液所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同。（八）HPLC法主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）方法：对照品法要求在含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的tR与对照品峰的tR一致。返回三、特殊杂质检查（一）其他甾体的检查检查意义：其他甾体与甾体激素药物结构相似，也有一定的药理作用而又互不相同.检查方法（具有一定分离能力）TLC法（高低浓度对比法）HPLC法（类似高低浓度对比法）（1）TLC法（高低浓度对比法）判定方法：规定杂质斑点数目规定杂质斑点颜色例：氢化可的松中其他甾体的检查供试液：本品+氯仿-甲醇（9：1）浓度：3.0mg/ml对照液：供试液（3.0mg/ml）+氯仿-甲醇（9：1）60μg/ml层析：供试液点样、展开、斑点检出。对照液判断：供试液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜色与对照液的主斑点比较，不得更深。（2）HPLC法（主成分自身对照法）判定方法：规定杂质峰数目规定杂质峰面积硒的检查（二）来源合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢有毒方法药物氧瓶燃烧二氨基萘比色法测定