033色谱系统数据积分处理标准管理规程

*******标准管理规程页码：1/7文件题目：色谱系统数据积分处理标准管理规程文件编码：SMP-ZKGL03300版本号：00本文件受控，仅限内部使用，未经授权，不得使用或复制色谱系统数据积分处理标准管理规程1、目的：为了规范化验室色谱软件正确的积分方法，确保检测数据的准确性、完整性和可追溯性,制定本规程。。2、适用范围：本规程适用于实验室内色谱的所有积分的管理。3、责任者：质量管理部、中心化验室4、管理规程4.1化验室色谱系统数据处理积分的定义及分类4.1.1定义积分是指色谱软件定量测定峰面积或峰高的过程。4.1.2分类4.1.2.1自动积分自动积分是指采用色谱软件内臵的积分事件设臵积分参数进行积分。4.1.2.2手动积分手动积分是指采用手动积分工具进行积分。4.2色谱系统数据处理积分的基本概念和术语4.2.1色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elutionprofile)。4.2.2基线(baseline)——经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。文件审定起草人审核人审核人批准人部门质量管理部质量管理部质量管理部质量管理部签名日期年月日年月日年月日年月日颁发部门质量管理部生效日期年月日分发部门质量保证部[1]份、质量控制部[1]份*******标准管理规程页码：2/7文件题目：色谱系统数据积分处理标准管理规程文件编码：SMP-ZKGL03300版本号：00本文件受控，仅限内部使用，未经授权，不得使用或复制4.2.3噪音(noise)——基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。4.2.4漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。4.2.5色谱峰(peak)——组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。不对称色谱峰有两种。4.2.6前延峰(leadingpeak)和拖尾峰(tailingpeak)，前者少见。4.2.7峰底—基线上峰的起点至终点的距离。4.2.8峰高(peakheight，h)—峰的最高点至峰底的距离。4.2.9峰宽（peakwidth，W)—峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ。4.2.10半峰宽（peakwidthathalf-height，Wh/2)—峰高一半处的峰宽。4.2.11峰面积(peakarea，A)—峰与峰底所包围的面积。4.2.12保留时间(retentiontime，tR)——从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。4.2.13理论塔板数(theoreticalplatenumber，N)——用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。4.2.14分离度(resolution，R)——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。4.2.15拖尾因子(tailingfactor，T)——T=，用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetryfactor)或不对称因子(asymmetryfactor)。4.2.16斜率(slope)——又叫峰检测灵敏度、阈值，它是用来认识峰的参数。4.3色谱系统积分管理4.3.1色谱系统图谱积分原则：4.3.1.1原则1：色谱数据采集色谱图谱的积分首要原则为使用积分事件完成数*******标准管理规程页码：3/7文件题目：色谱系统数据积分处理标准管理规程文件编码：SMP-ZKGL03300版本号：00本文件受控，仅限内部使用，未经授权，不得使用或复制据处理。4.3.1.2原则2：采用内标与外标计算时，对照与供试品的阈值（斜率）与峰宽必须保持一致。4.3.1.3原则3：同一序列或同时（非同一序列连续进样）采集的色谱图谱属于同一检测项目的使用相同的积分事件进行处理；同一序列或同时（非同一序列连续进样）采集的色谱图属于不同检测项目的可以按照项目使用相同积分事件进行处理，如结合雌激素含量与游离甾体。4.3.1.4原则4：色谱系统软件采用既定的积分事件积分不正确时，需要采用手动积分工具方式处理色谱图谱，即手动积分，或个别图谱增加使用了积分事件部分功能，需填写《手动积分台帐》，经批准后由具有手动积分权限人员执行。4.4色谱系统手动积分管理。4.4.1手动积分原因分类。4.4.1.1低分离度或低响应。4.4.1.2流动相不稳定，基线紊乱，保留时间变化小。4.4.1.3色谱柱性能：运行过程中，出现异常峰。4.4.1.4软件积分的局限性，如由于软件参数阈值的设臵导致峰未积分，峰起点和终点间出现肩峰和异常的基线漂移，软件错误（峰未积分和错误识别峰）。4.4.1.5由于样品母体的干扰导致的复杂色谱图：裂峰、目标杂质的同时洗脱/肩峰、基线噪音、负峰、基线上升或下降（由于某些梯度程序）、峰的严重拖尾或峰前延等导致自动积分不正确。4.2手动积分举例4.2.1分裂峰，如图4-1；*******标准管理规程页码：4/7文件题目：色谱系统数据积分处理标准管理规程文件编码：SMP-ZKGL03300版本号：00本文件受控，仅限内部使用，未经授权，不得使用或复制自动积分手动积分图4-14.2.2主峰与肩峰重复积分，如图4-2；自动积分手动积分图4-24.2.3基线紊乱，如图4-3；自动积分手动积分图4-34.2.4负峰，如图4-4；*******标准管理规程页码：5/7文件题目：色谱系统数据积分处理标准管理规程文件编码：SMP-ZKGL03300版本号：00本文件受控，仅限内部使用，未经授权，不得使用或复制自动积分手动积分图4-44.2.5峰上升或下降，如图4-5；自动积分手动积分图4-54.2.6峰拖尾严重，如图4-6；自动积分手动积分图4-64.3手动积分流程及操作：1）检验员在处理某产品检验批次数据时，需要进行手动积分时，先报告仪器组组长，经组长核对后再决定是否需要进行手动积分。如果不需要手动积分，就照自动积分方法进行数据处理；如果需要手动积分，检验人员填写《手动积分申请表》及检验人员填写《手动积分台账》，经QC主管审核批准后，由仪器组长完成手动积分操作，再提交与QC主管进行审核，最后由现场QA进行审核。2）报告编号：由手动积分四个开头字母“SDJF”+年份+3位流水号；如SDJF-2*******标准管理规程页码：6/7文件题目：色谱系统数据积分处理标准管理规程文件编码：SMP-ZKGL03300版本号：00本文件受控，仅限内部使用，未经授权，不得使用或复制018-000。4.4手动积分方法：4.4.1放大图谱，辨别是否是基线噪音。4.4.2检验员必须以正确的方式进行手动积分。将峰的面积去掉“峰消除”、添加“峰扩大和改变峰高的手动积分都不符合标准。4.5手动积分的注意事项4.5.1手动积分后不能试图通过以下动作来使数据符合标准要求：减少峰（减少峰面积）；增加峰（增加峰面积）；改变峰高。如图4-7自动积分手动积分图4-74.5.2若分离度不好、或响应不好，应查找问题，做出整改，建立预防措施，而不是手动积分。4.5.3自动积分的图谱不得删除或被覆盖，应与手动积分图谱保存于计算机中；同时打印自动积分图谱和手动积分图谱并标识清楚，随同手动积分申请表一起附于检*******标准管理规程页码：7/7文件题目：色谱系统数据积分处理标准管理规程文件编码：SMP-ZKGL03300版本号：00本文件受控，仅限内部使用，未经授权，不得使用或复制验原始记录。4.6注意事项1）手动积分不能试图通过以下动作来使数据符合标准要求：减少峰（减少峰面积）；增加峰（增加峰面积）；改变峰高；2）同一次检验的所有标准品、工作对照品、样品等必须使用同一方法进行手动积分。3）手动积分结束后，应打印自动积分图谱和手动积分图谱附于手动积分申请表之后，提交QC经理审核；QC经理应复核完整的数据找出根因，基于根因制定相应的CAPA措施来避免类似事件。4）自动积分的图谱不得删除或被覆盖，应与手动积分图谱保存于计算机中；打印的自动积分图谱和手动积分图谱应标识清楚签名，随同手动积分申请表附于检验原始记录后面一起交质量管理部经理、QP审核无问题后归档。5、变更记录及原因版本号生效日期变更原因、依据及详细变更内容00/原始版本附件1：手动积分报告处理表文件编码：SMP-ZKGL03300-01附件:2：手动积分台账文件编码：SMP-ZKGL03300-02