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维生素C负荷试验摘要:负荷试验是评定人体水溶性维生素营养水平方法之一。其方法是先给被测者大剂量维生素,然后测定一定时间内尿中该维生素排出量。若被测者体内有充足的该维生素储备,大剂量摄入后则将从尿中大量排出,反之,被测者的该维生素营养状况较差,因而组织中储备贫乏,摄入大剂量后组织将大部分或全部储留,则尿中排出量减少。进行维生素C负荷试验时,被测者空腹,排尿后服维生素C500mg,饮水量可视季节而定,收集服用药后四小时尿。在尿瓶中应先加入1克草酸,使尿液pH保持在3-5,维生素C稳定而不被破坏。还原型维生素C其强还原性可还原染料2,6-二氯酚靛酚,该染料在酸性溶液中呈红色,被还原后失去红色,其溶液中过量,滴一滴染料时呈红色。在无杂质干扰时,被测溶液中维生素C还原的染料量与维生素C浓度成正比。关键词:维生素C、尿液、负荷量1材料与方法1.1实验材料与设备1.1.1实验材料及试剂1.1.1.1实验材料维生素C、220ml尿液(W)1.1.1.2实验试剂:(1)1%草酸称取草酸10克,溶解于100ml蒸馏水中。(2)2,6-二氯酚靛酚溶液称取NaHCO340.2mg,溶解于200ml沸水中,待冷,称取2,6-二氯酚靛酚染料50mg溶液于上述NaHCO3溶液中,冰箱内过夜,次日过滤在250ml容量瓶中,蒸馏水稀释至刻度,摇匀,置棕色瓶中,冷藏保存。标定:取已标定过的维生素C溶液2ml及1%草酸溶液5ml于锥形瓶中。以待标定的染料滴定,呈淡红色,15秒内不退色为终点。(3)维生素C溶液称取维生素C粉末20mg,以1%草酸稀释至100ml,冷藏保存。标定:吸取以上维生素C溶液2ml于锥形瓶中,加入6%KI溶液0.5ml,1%淀粉溶液2滴,再以标准的0.0010NKIO3溶液滴定至终点淡兰色。(4)0.1000NKIO3溶液:精确称取干燥的KIO30.3567克,用蒸馏水稀释至100ml。(5)0.0010NKIO3溶液:取上述溶液1ml,用水稀释至100ml,次溶液1ml相当于维生素C0.088mg。(6)1%淀粉溶液:称取可溶性淀粉0.5mg,加水一滴,搅拌成糊状倒入50ml沸水中,混匀。冷藏待用。(7)KI溶液:称取KI0.6g,溶解于10ml水中,临用时配置。21.1.2实验仪器及设备烧杯、容量瓶、锥形瓶、酸式滴定管、刻度吸管、量筒1.2实验方法步骤(1)留尿,在留尿样前在烧杯中先放入0.2-0.3g草酸。(2)保留约50ml尿样在小烧杯中,其余弃入厕所。(3)取2ml尿样,以10%草酸稀释至15ml,用2,6-二氯酚靛酚滴定,至出现淡红色15秒内部褪色为终点,记录染料用量。2实验数据记录与处理2.1实验结果表2-1实验结果记录表项目实验结果尿液量(ml)220消耗0.0010NKIO3溶液的量(ml)3.12标定维生素消耗染料ml数3.56标定尿液消耗染料ml数0.792.2数据处理2.2.1维生素C浓度维生素C浓度(mg/ml)=消耗0.0010NKIO3溶液ml数*0.088(mg/ml)所取维生素Cml数=3.12*0.088/2=0.13728mg/ml2.2.2T的计算T(1ml染料/维生素Cmg数)=维生素C溶液浓度(mg/ml)*维生素C溶液ml数/消耗染料ml数=0.13728*2/3.56=0.077122.2.3尿中维生素C含量尿中维生素C含量(mg/4小时)=VT*尿量(ml)WV:滴定尿样时所用染料的ml数T:1ml染料相当于维生素Cmg数(mg/ml)W:滴定时取尿样ml数尿中维生素C含量(mg/4小时)=0.79*0.07712*220/2=6.7mg/4小时33注意事项(1)收取尿样应调节pH至3-5,以保持尿中维生素C。(2)取样后立即测定,操作过程迅速。(3)所有试剂应用蒸馏水配制,滴定过程中应避免接触金属离子。(4)尿样用1%草酸稀释,稀释倍数视尿中维生素C含量而定,负荷尿为5-10倍,最好用去燃料量为1-4ml,结果较为准确,否则可加大或减少尿样量。4结论负荷试验是评定人体水溶性维生素营养水平方法之一。其方法是先给被测者大剂量维生素,然后测定一定时间内尿中该维生素排出量。若被测者体内有充足的该维生素储备,大剂量摄入后则将从尿中大量排出,反之,被测者的该维生素营养状况较差,因而组织中储备贫乏,摄入大剂量后组织将大部分或全部储留,则尿中排出量减少。测得尿中维生素C含量为6.7mg/4小时,口服500mg维生素C,4小时尿中排出维生素Cmg,一般认为尿中维生素C营养状况正常,所以根据所测得数据,本人维生素C营养状况正常。5参考文献[1]食品营养学、食品卫生学实验讲义[2]于守洋,刘志诚.营养与食品卫生监督检验方法指南.1989
本文标题:维生素C负荷试验
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