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脑脊液检验•祁景一、cerebrospinalfluid•脑室脉络丛通过主动分泌和超滤作用,在室管膜和蛛网膜下腔形成的一种具有保护脑和维持神经中枢生理功能的无色透明液体,为细胞外液。左、右侧脑室脉络丛—经室间孔→第三脑室—经中脑水管→第四脑室—经正中孔、外侧孔→蛛网膜下隙→蛛网膜粒→上矢状窦→窦汇→左右横窦→左右乙状窦→颈内静脉二.CSF生成及生理功能1.生成量★成人120~180ml/天。★新生儿10~60ml/天。2.分布蛛网膜下腔占75%,脑室系统约占25%。3.CSF的功能(1)缓冲保护作用。(2)运输。(3)调节压力和酸碱。(4)参与神经内分泌。4.bloodbrainbarrier(BBB)作用脉络丛上皮细胞对各种物质的选择性:★最易通过物质:氯、钠、镁离子及乙醇★不易通过物质:清蛋白、葡萄糖、钙离子、乳酸、氨基酸、尿素和肌酐★不能通过:纤维蛋白、补体、抗体、某些药物、胆红素、胆固醇第一节脑脊液标本采集★每管2mL脑脊液第1管细菌培养第2管化学分析和免疫学检查第3管理学及显微镜检查★疑有恶性肿瘤,多留1管作脱落细胞检查。第二节脑脊液理学检验一、颜色正常CSF是无色透明液体。1.红色:穿刺损伤、SAH或脑室出血。穿刺与SAH出血的区别。2.黄色:出血、梗阻、黄疸等。3.白色或灰白色:白细胞增多。4.褐色或黑色:脑膜黑色素肉瘤、黑色素瘤。颜色原因临床意义无色正常脑脊液、病毒性脑炎、轻型结核性脑膜炎、脊髓灰质炎、神经梅毒红色出血穿刺损伤出血、蛛网膜下隙或脑室出血黄色黄变症出血、黄疸、淤滞和梗阻,黄色素、胡萝卜素、黑色素、脂色素增高白色白细胞增高脑膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性链球菌引起的化脓性脑膜炎绿色脓性分泌物增多绿脓杆菌性脑膜炎、急性肺炎双球菌性脑膜炎褐色色素增多脑膜黑色素肉瘤、黑色素瘤脑脊液常见的颜色变化及临床意义项目新鲜性出血陈旧性出血外观浑浊清晰、透明易凝性易凝不易凝离心后上清液无色、透明红色、黄褐色或柠檬色红细胞形态无变化皱缩上清液OB试验阴性阳性白细胞不增高继发性或反应性增高脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血的鉴别二、透明度1.清晰、透明:正常、病脑、神经性梅毒。2.浊度:明显混浊、混浊、轻度混浊、毛玻璃样混浊。见于细胞数增多(WBC>300×106/L);蛋白质和病原菌增多等。三、薄膜与凝块1.正常时静置12~24h不出现凝块。2.病理情况可出现凝块、沉淀、薄膜。3.蛋白质>10g/L时可成凝块,>15g/L,呈黄色胶胨状。三、比密健康人CSF比密为:★腰穿1.006~1.008★脑池1.004~1.008★侧脑室1.002~1.004第三节化学和免疫学检验一、蛋白质测定方法方法比较优点缺点Pandytest灵敏度高,标本少,结果易观察,操作简便标本可现弱阳性Ross-Jonetest检测球蛋白,操作简便灵敏度较弱None-Apetttest分别检测球蛋白和清蛋白操作较繁琐1.脑脊液蛋白定性方法比较3.参考范围(1)定性:(-)~(±)(2)定量:成人腰池:0.2~0.40g/L小脑延髓池:0.10~0.25g/L脑室:0.05~0.15g/L2.定量法方法优点缺点比浊法简便,快速,无需特殊仪器标本量大,对两种蛋白沉淀能力不同染料结合法考马斯亮蓝快速,灵敏度高,标本量少对实验条件的pH值要求较高4.临床应用•脑屏障通透性↑→蛋白↑或CSF循环障碍,见于:(1)CNS感染性疾病(2)出血性疾病(3)循环梗阻(4)CNS肿瘤(5)实质性病变原因临床意义感染以化脓性、结核性脑膜炎脑脊液蛋白质增高最明显,病毒性脑膜炎则轻度增高神经根病变常见于急性感染性多发性神经根神经炎,有蛋白质-细胞分离的现象梗阻脊髓肿瘤、肉芽肿、硬膜外脓肿造成的椎管部分或完全梗阻,可有脑脊液自凝现象出血脑血管畸形、高血压病、脑动脉硬化症以及全身出血性疾病等其他肺炎、尿毒症等出现中枢神经系统症状时,脑脊液蛋白质含量也可增高脑脊液蛋白质增高常见的原因二、葡萄糖CSF中的葡萄糖约为血液的60%。1.参考范围成人腰椎2.5~4.4mmol/L;小脑髓池2.8~4.2mmol/L;脑室2.8~4.2mmol/L。2.临床应用:增高:糖尿病、脑出血。降低:感染、CNS肿瘤、脑寄生虫病。三、氯化物1.测定法:比色法、滴定法、电量法。2.参考范围120~130mmol/L,脑脊液氯离子浓度约为血氯的1.2~1.3倍。3.临床应用(1)增高肾炎、尿毒症、呼吸性碱中毒等。(2)降低★感染性CSN、CSF蛋白增高等。★低氯血症。<85mmol/L时,有可能导致呼吸中枢抑制。四、免疫球蛋白1.参考范围:2.临床应用:①IgG↑:细菌性脑膜炎、多发性硬化。②IgA↑:化脑、结核性脑膜炎及神经性梅毒等。③IgM↑:化脓性脑膜炎。脑脊液免疫球蛋白变化的意义免疫球蛋白临床意义IgG增高多见于细菌性脑膜炎、亚急性硬化性全脑炎、多发性硬化症、急性感染性多发性神经根神经炎,且结核性脑膜炎IgG增高较化脓性明显IgG减低癫痫、放射线损伤和服用类固醇药物等IgM增高多见于化脓性脑膜炎,也可见于多发性硬化症、肿瘤和血管通透性改变等。IgM明显增高可排除病毒性感染IgA增高多见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎等五.MBP(髓鞘碱性蛋白)1.参考范围<4µg/L★增高:见于MS、多发性硬化症、神经性梅毒、脑血管病和外伤患者。★MS病人疾病活动参考的指标:MS急性期游离型增高明显。结合型增高不明显,游离型/结合型↑;游离型/结合型↓缓解后2周多数恢复正常,六、酶学检查正常时,血清酶不能通过血脑屏障。1.ADA↑:TBM显著高于其他脑(膜)炎。2.LDH↑:脑组织损伤、细菌感染。3.CK↑:脑实质破坏。4.AST↑:脑组织坏死、出血、脑萎缩等。5.溶菌酶↑:细菌感染。第四节显微镜检查一、细胞计数1.方法评价(1)影响因素:标本凝固、放置时间长,细胞变形、破坏等。(2)改良牛鲍氏法:简便、易行、形态准确。(3)血细胞分析仪法:重复性高,可自动化。2.参考范围(1)总数WBC:成人(0~10)×106/L儿童(0~15)×106/L新生儿(0~30)×106/L3.临床应用(1)化脓性脑膜炎细胞数显著增多,90%以上为中性粒细胞,后期病情好转,中性粒细胞急剧下降,单个核细胞和吞噬细胞增高。(2)急性病毒性感染CSF中细胞数轻度增高,以淋巴细胞为主。(3)结核性脑膜炎初期以中性粒增多为主,病情好转,粒细胞下降,单个核细胞和浆细胞等混合出现。(4)CNS出血早期表现为均匀血性CSF,大量红细胞,白细胞中大多数为中性粒细胞。2~3d后可出现吞噬细胞吞噬有红细胞或含铁血黄素。(5)脑寄生虫病CNS寄生虫感染,CSF细胞总数一般﹤100×106/L,以淋巴细胞和嗜酸性粒细胞增多为主,可>60%。二、细胞学检查1.方法(1)直接分类:单个核及多型核细胞。(2)染色分类:取沉淀物进行瑞氏染色后分类或其他染色法染色。2.临床应用(1)多型核粒细胞:见于急性炎性渗出期。(2)单个核:此类细胞如单核-吞噬细胞、淋巴细胞等。见于急性细菌性感染的亚急性增殖期、恢复期、慢性细菌性感染、病毒感染、霉菌性感染、梅毒螺旋体感染等。2.临床应用★颅内肿瘤细胞★白血病细胞:诊断CNS白血病的重要依据。★lymphoma细胞:lymphoma细胞是诊断CNSlymphoma的可靠依据。lymphoma分为霍奇金病和非霍奇金病。脑脊液中的白血病细胞三、微生物、寄生虫检查1.微生物检查:墨汁染色:脑膜炎隐球菌革兰染色:脑膜炎双球菌等抗酸染色:结核杆菌2.细菌培养3.寄生虫检查第五节临床应用临床应用1、适应证①有脑膜刺激症状。②疑有颅内出血。③中枢神经系统肿瘤。④不明原因的剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪。⑤中枢神经系统疾病需管内给药治疗及手术前麻醉、造影等。2、禁忌证①对疑有颅内压升高者。②休克、衰竭或频危状态的病人。③穿刺位置局部皮肤有炎症。④颅后窝占位性病变或伴有脑干症状的病人。3.临床价值①中枢神经系统感染性疾病诊断与鉴别②脑血管病诊断与鉴别诊断③脑肿瘤诊断④中枢神经系统疾病疗效观察Theend
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