实验一-红、白细胞计数

实验一红细胞计数、白细胞计数实验诊断学第一临床医学院检验医学系实验诊断学教研室实验内容红细胞计数（Redbloodcellcount）白细胞计数（Whitebloodcellcount）手工显微镜计数法细胞计数仪法（直接计数法）（间接计数法）利用电阻抗和（或）光散射原理计数方法一、红细胞计数（手工显微镜法）用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算求得每升血液中的红细胞数量。1.原理显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板2.器材手工显微镜计数法原理改良Neubauer计数板充池显微镜观察细胞数/L等渗稀释液微量吸管检测试剂：RBC稀释液①Hayem稀释液：NaCl,Na2SO4，HgCl2②枸橼酸钠甲醛盐水溶液:枸橼酸钠，甲醛，NaCl③生理盐水或含1%甲醛的生理盐水：仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用改良Neubauer计数板大方格→中方格→小方格（9个）（25个）（16个）充液位置充液位置为红细胞计数区域压线细胞的计数原则：数左不数右，数上不数下为红细胞计数区域3.检测方法①小试管加RBC稀释液2.0ml。②采血，取血10μl。③擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2~3次，立即混匀。④混匀后充入计数室，静置3~5min，高倍镜下计数。检测方法2ml稀释液充分混匀10μl血液充池、静止镜下计数4.计算男性：(4.0～5.5)×1012／L女性：(3.5～5.0)×1012／L新生儿：(6.0～7.0)×1012／LRBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×106＝5个中方格内RBC数/100×1012RBC：△△△×1012／L6.参考值5.报告方式二、白细胞计数（手工显微镜法）WBC稀释液:冰醋酸3.0mL（破坏红细胞）蒸馏水97.0mL亚甲蓝（染色）1.检测方法小试管加WBC稀释液0.38mL。采血，微量吸管取血20μL。擦去管外的血，轻吹入试管底部，再清洗吸管2~3次，立即混匀。混匀后充入计数室，静置2~3min，低倍镜下计数。白细胞计数：用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。2.计算WBC/L＝3.报告方式＝4个大方格内WBC数/20×1094个大方格内WBC数4×10×20×106WBC:△△△×109／L手工显微镜计数的注意事项采血时不要过分挤压。取血量须准确，动作要迅速，防止血液凝固。血液加入稀释液后，应立即混匀。充池前要摇匀，一次性充池，不能产生气泡压线细胞应数上不数下，数左不数右。