动物细胞融合(1)

专题二细胞工程乌苏高二生物动物细胞培养动物细胞融合核移植技术动物细胞工程常用技术胚胎移植技术单克隆抗体技术细胞贴壁过程克隆步骤上克隆步骤下动物细胞能否融合呢？细胞A细胞B杂种细胞细胞A细胞B细胞B细胞A细胞B细胞A细胞B杂种细胞细胞A细胞B细胞A细胞B杂种细胞细胞A细胞B资料太空中的“婚礼”2003年1月5日，“神舟”四号准备着陆。这次历时6天零18个小时的太空飞行，开展了多项在轨研究，其中有一项被媒体描述成“太空婚礼”的生物实验。不过，“婚礼”中的“新郎”和“新娘”是一些体细胞：动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，植物细胞“新人”是有液泡的黄花烟草原生质体和脱液泡的革新一号烟草原生质体。作为“新房”的是一个黑色的小盒子----电融合仪。这是科技工作者在空间微重力条件下进行的细胞融合实验。160min后，中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。一、动物细胞融合1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导方式指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒5.过程：注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞细胞A细胞B杂种细胞灭活的病毒物理法、化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒细胞核病毒颗粒细胞核用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程病毒颗粒黏附在细胞表面病毒颗粒穿通细胞膜细胞膜连接结束的标志6.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。7.应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞融合的方法诱导方法用途植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性细胞融合的方法诱导方法用途植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法用途植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）灭活的病毒用途植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）灭活的病毒用途获得杂种植株制备单克隆抗体1.什么是抗体？2.抗体是由何种细胞产生的？抗体是具有免疫作用的蛋白质。B淋巴细胞受抗原刺激后，增殖分化为浆细胞，浆细胞可以产生抗体。问题1）.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。2）.每种抗体只能与特定的抗原发生结合反应。3、抗体有哪些特点？4、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？问题常规抗体的缺陷抗原不纯抗体不纯筛选单一浆细胞特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏浆细胞抗体动物体刺激抗原不能增殖产生大量抗体5、怎样才能获得单克隆抗体？提示1：仅用细胞培养技术可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？5、怎样才能获得单克隆抗体？设计方案：一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖杂交细胞既能产生一种特异性抗体，又能无限增殖二、单克隆抗体由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。1、单克隆抗体的概念杂交瘤细胞单克隆抗体2、单克隆抗体制备过程筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群细胞培养细胞融合、筛选骨髓瘤细胞体外培养注射到小鼠腹腔B淋巴细胞注射抗原具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能产生足够数量的单一抗体。免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理1.本过程利用了哪些原理？2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B淋巴细胞分泌特异性抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可获得大量单克隆抗体思考：三、单克隆抗体的应用单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高2、用于运载药物：制成“生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗优点：准确、高效、简易、快速优点：疗效高、毒副作用小1、作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合小结两个过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势1、动物细胞工程技术的基础是：（）A．动物细胞融合B．胚胎移植C．动物细胞培养D．核移植Ｃ２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A．结果是相同的B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同Ｂ３.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③C