TLC_LCMS_NMR基础培训-2

TLCTLCTLCTLC____LCMSLCMSLCMSLCMS____NMRNMRNMRNMR基础培训基础培训基础培训基础培训PartPartPartPartⅠTLCTLCTLCTLC薄层层析技术（Thin-Layerchromatography)Thin-Layerchromatography)Thin-Layerchromatography)Thin-Layerchromatography)1111一、一、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC概述概述：：二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作::::::::三、三、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC应用：应用：四、四、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC常见问题集锦常见问题集锦主要内容：主要内容：2222TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC概述概述原理::::利用吸附剂((((硅胶))))对样品中各组分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各组分达到分离的目的。特点：微量、快速、简单、节省3333二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作1.1.几种硅胶板标注方法几种硅胶板标注方法原点间距0.8－1mm，底边距离0.5-0.8cm即可.+++5mm0.5-0.8cm4444最好中和后取样最好中和后取样最好中和后取样最好中和后取样处理（如加水或酸处理（如加水或酸处理（如加水或酸处理（如加水或酸和有机溶剂）后取和有机溶剂）后取和有机溶剂）后取和有机溶剂）后取样样样样最好简单后处理最好简单后处理最好简单后处理最好简单后处理（加水和有机溶剂（加水和有机溶剂（加水和有机溶剂（加水和有机溶剂萃取）以后取样萃取）以后取样萃取）以后取样萃取）以后取样可以直接取样，也可可以直接取样，也可可以直接取样，也可可以直接取样，也可以稀释后取样。以稀释后取样。以稀释后取样。以稀释后取样。强碱、酸性物质(NaOH,H(NaOH,H(NaOH,H(NaOH,H2222SOSOSOSO4444,etc),etc),etc),etc)需要淬灭的体系(NaH,LiAlH(NaH,LiAlH(NaH,LiAlH(NaH,LiAlH4444,,,,n-BuLi,etc)n-BuLi,etc)n-BuLi,etc)n-BuLi,etc)强极性溶剂体系(DMSO,DMF)(DMSO,DMF)(DMSO,DMF)(DMSO,DMF)一般极性溶剂体系(CH(CH(CH(CH2222ClClClCl2222,THF,,THF,,THF,,THF,ethylacetate,etc)ethylacetate,etc)ethylacetate,etc)ethylacetate,etc)Note:a.a.产品在水相产品在水相oror有机相；有机相；b.b.有无没溶解的固体。有无没溶解的固体。2.2.反应液的取样反应液的取样：二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作55553.3.点样点样::二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作点一遍点二遍点三遍Note:a.a.点样的浓度要控制适当；点样的浓度要控制适当；b.b.点的斑点较小，展开的点的斑点较小，展开的TLCTLC分离度好分离度好c.0.3mmc.0.3mm毛细点有机相，毛细点有机相，0.5mm0.5mm点点水相较方便。水相较方便。一个点,两个点?66664.4.TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC展开剂展开剂:二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作展开剂的选择原则��对所需成分有良好的溶解性对所需成分有良好的溶解性;;;;;;;;��可使各成分间有较好的分离可使各成分间有较好的分离;;;;;;;;��待测组分的待测组分的RRRRRRRRffffffff在在0.20.20.20.20.20.20.20.2～～0.80.80.80.80.80.80.80.8之间之间;;;;;;;;��不与待测组分发生化学反应不与待测组分发生化学反应;;;;;;;;��沸点适中，黏度较小；沸点适中，黏度较小；��展开后组分斑点圆且集中；展开后组分斑点圆且集中；��混合溶剂最好新鲜配制混合溶剂最好新鲜配制;;;;;;;;常用展开剂极性大小顺序石油醚二氯甲烷乙醚四氢呋喃乙酸乙酯丙酮正丙醇甲醇水14.4.TLCTLC展开剂展开剂:二、二、TLCTLC过程过程展开剂的选择原则1.1.对所需成分有良好的溶解性对所需成分有良好的溶解性;;2.2.待测组分的待测组分的RRff在在0.20.2～～0.80.8之间之间;;3.3.不与待测组分发生化学反应不与待测组分发生化学反应;;4.4.沸点适中，黏度较小；沸点适中，黏度较小；5.5.混合溶剂最好新鲜配制混合溶剂最好新鲜配制;;常用展开剂极性大小顺序石油醚二氯甲烷乙醚四氢呋喃乙酸乙酯丙酮正丙醇甲醇水77774.TLCTLCTLCTLC展开剂::::二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作展开剂体系的选择原则::::�一般极性的化合物::::PE/EAPE/EAPE/EAPE/EAPE/EAPE/EAPE/EAPE/EA体系体系�极性较大的化合物::::DCM/CHDCM/CHDCM/CHDCM/CHDCM/CHDCM/CHDCM/CHDCM/CH33333333OHOHOHOHOHOHOHOH体系体系PE/EAPE/EAPE/EAPE/EA展开剂DCM/CH3OHDCM/CH3OHDCM/CH3OHDCM/CH3OH展开剂极性大极性小极性大极性小PEPEPEPE＝100100100100％EAEAEAEA＝100100100100％DCMDCMDCMDCM＝100100100100％CHCHCHCH3333OHOHOHOH＝100100100100％88884.TLCTLCTLCTLC展开剂::::二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作展开剂体系的选择原则::::�脂肪类胺化合物::::在展开剂中加入在展开剂中加入0.1%0.1%0.1%0.1%0.1%0.1%0.1%0.1%（约为（约为11111111滴）的氨水或三乙胺滴）的氨水或三乙胺�有羧基官能团存在的化合物::::在展开剂中加入微量的醋酸（在展开剂中加入微量的醋酸（乙酸乙酸或或甲酸的使用，一方面增大展开剂极性甲酸的使用，一方面增大展开剂极性,,,,,,,,另外也可以抑制硅胶另外也可以抑制硅胶上上羟基的作用，减少拖尾羟基的作用，减少拖尾））另外常用的混合体系::::PE/DCMPE/DCMPE/DCMPE/DCM，PE/AcetonePE/AcetonePE/AcetonePE/Acetone，Ether/DCMEther/DCMEther/DCMEther/DCM，EA/DCMEA/DCMEA/DCMEA/DCM，EA/CHEA/CHEA/CHEA/CH3333OHOHOHOH99995.展开方法:二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作展开方向有单向、单向长板、多次、多种极性展开等....展一次展多次第一次展开PE/EA=4:1第二次展开CH2Cl2/MeOH=10:1101010106.显色::::二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作一看、首先在日光下观察，划出有色物质的斑点位置二照、在紫外灯下观察有无暗斑或荧光斑点三碘、大部分有机物会吸附碘可逆的产生棕色或黄色斑点四显、既无色又无紫外吸收的物质，可以用显色剂显色DIEADIEADIEADIEAPE/EA=1:2NEtNEtNEtNEt3333111111117.各种常用显色剂及其配制方法::::二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作氯化铁1%FeCl3+50%乙醇水溶液.氯化铁还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。乙醇5％磷钼酸乙醇溶液喷后120℃（可用加热枪）缓慢烘烤磷钼酸(PMAPMAPMAPMA)生物碱10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液硫酸铈氨基酸O.2g溶于乙醇l00ml中。方法：喷后于110oC加热。醋酸呈红紫色斑点茚三酮含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛1.5gKMnO4+10gK2CO3+1.25mL10%NaOH+200mL高锰酸钾大部分化合物硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液与0.5-1.5mol／L硫酸铵溶液硫酸溶液121212128.展开判断::::二、二、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC操作操作一般以目标产物的一般以目标产物的RRRRRRRRffffffff值在值在0.40.40.40.40.40.40.40.4－－0.60.60.60.60.60.60.60.6左左右为最佳。右为最佳。一般一般选用展开剂极性应选用展开剂极性应从低到高从低到高原则原则2TLC是有机合成工作者的！原料反应进程后处理产品纯化纯度?状态?合理?可行?三、三、TLCTLC用途用途：14141414三、三、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC应用：应用：1.监测反应进程::::注：1点样量3留样作对照2监测时间4重要板留存��反应有无新点产生反应有无新点产生��原料有无剩余，剩余多少原料有无剩余，剩余多少��反应是否干净反应是否干净��综合判断反应如何处理综合判断反应如何处理snewspotnewspotRS2S115151515三、三、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC应用：应用：极性增大极性增大::NO2�NH2RNH-Bn(Boc,Cbz)��RNH2X��NH-X��CNCHO（R-X）�CH2OH�CO2H2.官能团转化与TLCTLCTLCTLC极性大致表现的讨论极性大极性小极性相近的：极性相近的：R=R��R-RCHO��C=C极性减小极性减小::::::::OH�X(Cl,Br,I)COOH�CO2R,-NH2(-OH)�NH2-R,(OH-R,)16161616三、三、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC应用：应用：3.跟踪萃取、重结晶等后处理的情况::::EAEAEAEAHHHH2222OOOO固体的纯度和母液的取舍SolidSolidSolidSolidMothersolutionMothersolutionMothersolutionMothersolutionsolidmothersolutionaq.org.萃取是否有效17171717三、三、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC应用：应用：4.摸索和确定柱层析时的洗脱条件的情况::::•RRRRffff值在0.20.20.20.2左右的展开剂比例为冲洗剂的合适值•过柱时组分流出顺序未必和TLCTLCTLCTLC上点极性顺序一致Rf=0.2DesiredproductDesiredproductDesiredproductDesiredproductNote:?18181818三、三、TLCTLCTLCTLCTLCTLCTLCTLC应用：应用：6.制备TLCTLCTLCTLC::::展开刮板洗脱点板显色13四、TLC应用E.TLC-MS联用用小板先分离少量的样品，刮取a、b、c三个纯点，MS检测出哪个点可能是我们的产物，取得标样，再展开prep-TLC得到纯化后样品，作NMR鉴定。abc16五、TLC问题集锦1.两个点离的太近怎么办？2.如果有酸碱基团我们需要如何处理？3.极性特别大的怎么展开？4.有高沸点溶剂我们可以怎么处理？5.有强酸或者强碱的反应体系TLC跟踪反应需注意那些方面，同理有固体或者两相反应时如何处理？6.TLC爬板为什么有时会爬歪?PartPartPartPartⅡLCMSLCMSLCMSLCMS基础培训基础培训基础培