单基因性继发性高血压的基因诊断

单基因性继发性高血压的基因诊断瑞金医院高血压科上海市高血压研究所朱鼎良单基因性继发性高血压糖皮质激素抑制性醛固酮增多症（GRH）表征性盐皮质激素增多症（AME）11羟化酶缺乏症17羟化酶缺乏综合征Liddle综合征Gordon综合征孤立型嗜铬细胞瘤IIA型多发性内分泌瘤IIB型多发性内分泌瘤VonHippel-Lindau综合征I型神经纤维瘤高血压伴短指畸形•糖皮质激素抑制性醛固酮增多症•表征性盐皮质激素增多症•17羟化酶缺乏综合征•11羟化酶缺乏症•Liddle综合征•IIA型多发性内分泌瘤•IIB型多发性内分泌瘤•I型神经纤维瘤•VonHippel-Lindau综合征•Gordon综合征CYP11B1/CYP11B2HSD11B2CYP17CYP11B1SCNN1B,SCNN1GRETproto-oncogeneRETproto-oncogeneNF1geneVHLtumoursuppressorgeneWNK1、WNK4致病基因（单基因性继发性高血压）单基因性继发性高血压基因诊断（国内）病名Liddle综合征IIa型多发性内分泌瘤糖皮质激素抑制性醛固酮增多症*Gordon综合征单位高研所、北医高研所内研所高研所历史(Liddle综合征)1963Liddle首例报道1994Shimkets肾上皮钠通道亚单位基因突变1995Hansson肾上皮钠通道亚单位基因突变特征(Liddle综合征)遗传临床表现常染色体显性遗传病（16p)肾上皮钠通道（ENaC)基因突变高血压低醛固酮低血钾低血浆肾素活性（PRA）Liddle综合征家系-1Liddle综合征家系先证者的临床特征男,25岁18岁发生高血压血压：230/140mmHg血钾:2.7mmol/L高血压家族史:母、兄弟、侄女Liddle综合征家系先证者的临床特征低PRA:0ng/ml/h(0.1-5.5)低尿醛固酮：0.7ug/24h(3.4-12.7)联合用降压药无效安替舒通治疗无效氨苯喋啶（triamterene）治疗和低钠饮食后高血压和低血钾明显改善1985年住院资料氨苯喋啶和低钠治疗前后血压和生化指标改变血压血钾尿ald(mmHg)(mmol/L)(ug/24h)治疗前230/1402.70.7治疗后110/844.26.4Liddle家系一级亲属的临床及生化检查病人血压年龄发病年龄(岁)(mmHg)(岁)高血压卒中Ⅰ-1130/8076Ⅱ-1*120/80463343Ⅱ-3*126/92411832Ⅱ-5*138/1063718Ⅱ-7*144/108311423Ⅲ-2*160/1202415Ⅲ-3105/7521Ⅲ-4110/8015Ⅲ-598/789病人PRA血浆alt.尿ald血钾尿钾(ng/ml/h)(ng/ml/h)(ng/dl)(mmol/l)(mmol/l)Ⅰ-14.03Ⅱ-1*1.027.43.53.5246.6Ⅱ-3*1.2410.11.33.5440.4Ⅱ-5*1.089.60.44.0722.1Ⅱ-7*0.777.72.73.3742.0Ⅲ-2*02.10.43.6455.7Ⅲ-33.80Ⅲ-44.25Ⅲ-54.06Liddle家系一级亲属的临床及生化检查基因诊断方法(Liddle综合征)制备基因组DNA从外周血（5-10ml）白细胞中抽提DNADNA直接测序PCR扩增ENaC513-638密码子和ENaC524-631密码子PCR纯化产物用ABI377测序仪进行序列分析基因诊断结果(Liddle综合征家系-1)•5名家系成员(II-1,3,5,7,III-2)，ENaC基因616密码子存在CCC-CTC(pro-Leu)的错义突变•先证者父亲(I-1)和其他年青子女(III-3,4,5)未检出这一突变Liddle家系成员ENaC基因序列分析II-1II-3II-5II-7CCC-CTCP616L已报道的Liddle综合征ENaC基因的致病突变亚单位密码子碱基改变蛋白改变564CGA-TGAArg-stopcodon582deletionstopcodon589CAG-TGAGln-stopcodon592ACG-ACCGThr-frameshift594CCC-CCCCPro-frameshift615CCC-TCCPro-Ser616CCC-CTCPro-Leu616CCC-TCCPro-Ser618CTA-TTATyr-His574TGG-TGATrp-stopcodonLiddle综合征家系-2基因诊断结果(Liddle综合征家系-2)•3名家系成员(II-5,III-1,4)，ENaC基因616密码子存在CCC-TCC（pro-Ser)的错义突变•其他家系成员(II-2,3,4,6,7,8,III-2,3)未检出这一突变基因诊断结果(Liddle综合征家系-2)•3名CCC-TCC突变者同时存在632密码子的GAC-CAC（Asp-His)变异•150名无关个体测序未发GAC-CAC变异，证明这是一种突变。该突变与Liddle综合征发病间关系有待研究Liddle家系-2的P616S突变(CCC-TCC,Pro-Ser)Liddle家系-2D632H突变(GAC-CAC,Asp-His)ENaC亚单位•ENaCNH2COOHsubunit突变位点Nedd4结合部位II型多内分泌腺瘤（MEN-II)•MEN-IIa型：甲状腺髓样癌（MTC）、甲状旁腺腺瘤或增生、嗜铬细胞瘤•MEN-IIb型：MTC、嗜铬细胞瘤、粘膜神经节瘤、马凡氏体型II型多内分泌腺瘤（MEN-II)•Sipple1961年报道第一例•MEN-IIa型（瑞金1998，2002）•MEN-IIb型（瑞金2002）多内分泌腺瘤病IIa型家系图MEN-IIa家系先证者（III-2）•女、51岁、“血压升高7年、阵发性心悸、多汗2年”、97年入院、160/100mmHg•B超：双側甲状腺实质性肿块、双側肾上腺多发性占位性病变•CT：双側甲状腺占位性病变、双側肾上腺占位性病变•甲状腺及颈前淋巴结穿刺：甲状腺髓样癌、颈前淋巴转移•手术病理诊断：右侧甲状腺髓样癌、左侧混合性髓样-滤泡型癌、左颈前淋巴结转移、双側多发性嗜铬细胞瘤MEN-IIa家系成员（IV-3）•女、51岁、40岁发现有高血压•左侧甲状腺全切术、•病理诊断：左侧甲状腺髓样癌单基因遗传病基因诊断的优点•可靠、准确•方便•临床前诊断Thankyou