15药物的杂质检查

药物的杂质检查基本内容一概述二一般杂质的检查方法三特殊杂质的检查方法一、药物纯度的概念与要求第一节概述1.药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯净程度。对药物纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来的如：阿司匹林中除了水杨酸外，还存在乙酰水杨酸酐等水杨酸的衍生物，具有致敏作用。2.对药物纯度的要求随着临床应用的实践和分析测试技术的发展，在不断改进，使之更加完善。如：度冷丁（Ⅰ）1948年收入BP，1970年经GC分离鉴定出两种无效异构体（Ⅱ）和（Ⅲ），有时高达20%～30%。3.杂质：药物中存在的无治疗作用的、影响药物稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。4.药物纯度的评价：应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。5.与试剂的纯度不同，不能用化学试剂的规格代替药品标准，更不能将化学试剂当作药品直接用于临床。如：试剂规格的BaSO4,允许存在可溶性钡盐;药品中不允许：可导致医疗事故1．杂质的来源生产过程中引入贮藏过程中产生二、杂质的来源贮藏过程中产生：外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、微生物等引起药物产生例：麻醉乙醚O醛及有毒的过氧化物2．杂质的种类（1）杂质的来源分类一般杂质特殊杂质一般杂质:在自然界分布比较广泛,在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质。如：pH值、溶液澄清度、氯化物、硫酸盐、重金属等特殊杂质：在有关药物的生产和贮存过程中，因其生产工艺或药物本身的性质可能引入的杂质。（2）杂质的理化性质分类无机杂质有机杂质残留溶剂（3）杂质的毒性分类毒性杂质普通杂质三、杂质的限量检查在不对人体有害、不影响疗效的情况下，允许药物中存在一定量的杂质。1.杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。表示方法(g/g)：％或ppm（百万分率,10-6）2.限量检查：药物中杂质的检查，一般不要求测定其含量，而只是检查杂质的量是否超过限量。杂质限量检查方法：对照法合格不合格供试液供试液＜对照液相同条件现象现象下反应比较供试液＞对照液对照液现象现象NaCl对照液葡萄糖稀硝酸10ml硝酸银1ml稀硝酸10ml硝酸银1ml对照液浊度供试液浊度合格※杂质限量的计算：杂质限量=杂质最大允许量／供试品量×100％=标准溶液的浓度×标准溶液的体积×100％供试品量即L=C·V/S×100%式中：L杂质的限度（%）C对照液浓度（g/ml）V对照液的加入体积（ml)S供试品的量(g)注意:单位统一例：对乙酰氨基酚中氯化物的检查：样品2.0g溶于100ml水中，取25ml检查Cl-，与标准NaCl溶液(10μg/ml)5ml对照液相比，不得更深。C=10μg/mlV=5.0mlS=252.0100=0.5g6105.010100%0.01%0.5L一．氯化物检查法：1.原理：供试液：Ag＋+Cl－→AgCl↓（白色混浊）对照液：标准氯化钠溶液……………第二节一般杂质的检查方法比浊2.条件：硝酸酸性条件（稀硝酸10ml）反应试剂：硝酸银试液1.0ml杂质对照：NaCl(10µg/ml)灵敏度范围：50-80g/50ml讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。3.讨论比浊方法：同置黑色背景下，从上至下观察。氯化物适宜浓度：50-80μg/50ml。硝酸酸性：作用。避光。供试液若不澄清，需经滤过处理。供试液若有色，需经处理后方可检查。供试品有色：（1）内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。供试品+AgNO3放置10min过滤澄清溶液+标准NaCl+水对照溶液供试品+AgNO3+水供试品溶液暗处放置5min后比较（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。二、硫酸盐检查法1.原理：供试液：SO４2－＋Ba2＋→BaSO４↓（白色混浊）对照液：标准硫酸钾溶液………………………2.方法mlml240稀盐酸水供试品mlml240稀盐酸水标准液后比较摇匀水'10505%252mlmlBaCl比浊3.讨论比浊方法：同置黑色背景下，从上至下观察。硫酸盐适宜比浊浓度：100-500μg/50ml。盐酸酸性。供试液如不澄清，需滤过。供试液若有色，可采用内消色法处理。三．铁盐检查法(一）硫氰酸盐法1.原理：供试液：Fe3＋＋6SCN－→[Fe(SCN)6]3－（红色）对照液：标准铁溶液………………………………比色2.方法:ml25水供试品ml25水标准液，摇匀比较水％硫氰酸铵水mlmlml5035330mgml504过硫酸铵稀盐酸3.讨论比色方法：白色背景下，从侧面观察。盐酸酸性作用。过硫酸铵的作用。Fe3＋的适宜比色范围：10-50μg/50ml。色调不一致时或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时：可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别取醇层比色。(二）巯基醋酸法（BP）原理：巯基醋酸还原Fe3+为Fe2+，在氨碱性试液中与Fe2+作用生成红色配位离子。2Fe3++2HSCH2COOH2Fe2++SCH2COOH+2H+SCH2COOHFe2++2HSCH2COOHFe(SCH2COOH)2+2H+Fe(SCH2COOH)2[Fe(SCH2COOH)2]2-+2H2O2OH-四、重金属检查法重金属是指在实验条件下与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。第一法(硫代乙酰胺法)用于溶于水、稀酸和乙醇的药物1.原理：供试液：CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2SH2S+Pb2＋→PbS↓+2H＋（黄～棕黑）对照液：标准铅溶液………………………………ml25规定方法供试品mlmlpH2525.3规定溶剂醋酸盐缓冲液标准液后比较摇匀，硫代乙酰胺'22ml5.3pH比色2.方法：3.讨论同置白色背景下，从上至下观察。pH3.5醋酸盐缓冲液。Pb2＋适宜比色范围：10-20μg/25ml。供试液有色时,需预先处理。供试品有微量Fe3+:在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出S产生混浊影响比色，可加Vc或盐酸羟胺使Fe3+还原成Fe2+再检查。第二法：炽灼后的硫代乙酰胺法用于在水、稀酸、乙醇中难溶，或含芳环、杂环（能与重金属离子形成配位化合物）的有机药物1.原理：C-M炽灼破坏后→Mn＋→第一法检查2.方法：500～600℃炽灼第三法：硫化钠法用于难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物（磺胺类、巴比妥类）供试液：Pb2＋＋Na2S→PbS↓＋２Na＋（灰黑色）对照液：标准铅溶液………………………………第四法(微孔滤膜法)：用于重金属限量低（含2-5μg重金属）的药物。2010版《中国药典》已不收载。比色五．砷盐检查法（一）古蔡氏法：※※※1.原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢，氢与药物中微量砷盐反应，生成具挥发性的砷化氢气体，遇溴化汞试纸产生黄至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液在同样条件下生成的砷斑比较，颜色不得更深。--3432333AsOAsHHOAsAs砷斑2HgBr棕黄Ag吡啶DDCAg-红色胶态Zn+HCl古蔡氏法:SbH3+HgBr2→SbH2(HgBr)+HBr锑斑供试品、HCl、Zn、KI、SnCl2Pb(Ac)2棉HgBr2试纸古蔡氏法仪器装置图KI和酸性SnCl2的作用：AsO43-+2I-+2H+→AsO33-+I2+H2OAsO43-+Sn2++2H+→AsO33-+Sn4++H2O②I2+Sn2+→2I-+Sn4+4I-+Zn2+→[ZnI4]2-AsO43-AsO33-AsH3慢快KISnCl2①将五价砷还原为三价砷，加快反应速度＋5＋3③抑制锑化氢的生成促进AsH3的生成④形成Zn-Sn齐，去极化Pb(AC)2棉的作用：消除锌粒和供试品中可能含有的少量的硫化物的影响。S2-+2H+H2SH2S+HgBr22HBr+HgS（汞斑）H2S+Pb(Ac)2PbS+2HAc2.供试品处理（1）供试品为S2-,SO32-,S2O32-等:因在酸中生成H2S,SO2,与HgBr作用生成HgS或Hg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫酸盐可消除。（2）供试品为Fe3+，能消耗KI，SnCl2，可先加足量SnCl2。（3）环状结构有机药物，先有机破坏（4）含锑药物，改用白田道夫（Betterdorff）法2As3++3SnCl2+6HCl→2As↓+3SnCl4+6H+胶态、棕褐色（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（silverdiethyldithiocarbamate)（Ag-DDC法）1.原理：供试液：AsH3+6Ag（DDC）→６Ag＋…（红色胶态）对照液：标准砷溶液………………………比色或测定AAg(DDC)的吡啶溶液仪器装置小结六、溶液颜色检查法控制药物中有色杂质的含量1.目视比色法5种色调10种色号标准比色液标准贮备液比色原液K2Cr2O7CoCl2CuSO42.分光光度法有色杂质对光有吸收，通过测定吸收度可控制其限量3.色差计法通过比较供试品、标准比色液与水之间的色差值黄绿、黄橙黄,橙红棕红七、易炭化物检查法•检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。•这类杂质多数结构未知，常采用加硫酸呈色后与对照液比较的方法进行检查。八、溶液澄清度检查法(检查不溶性杂质)•与浊度标准液比较浊度标准贮备液：硫酸肼＋乌洛托品→甲醛腙（白色混浊）浊度标准原液浊度标准液：5个级号•澄清：系指供试品溶液的澄清度相当于所用溶剂或未超过0.5号浊度标准液H2OH2O九、炽灼残渣检查法（控制非挥发性无机杂质）•炽灼残渣：有机药物经炭化或经加热使挥发性无机物分解后，高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。•加硫酸炽灼法：700～800℃;如炽灼残渣需作重金属检查，则炽灼温度应控制在500～600℃•恒重：供试品连续两次炽灼或干燥后的重量差异在0.3mg以下除尽硫酸蒸气湿润炭化供试品低温～放冷缓缓炽灼ml15.0SOH42恒重放冷灰化℃炽灼～干燥℃炽灼～800700800700十、干燥失重测定法检查药物中水分和其他挥发性物质干燥失重：药品在规定条件下，经干燥后所减失的量。•1.常压恒温干燥法适用于受热较稳定的药物温度：105℃•2.减压干燥法适用于熔点低、受热分解的药物•3.干燥剂干燥法适用于受热易分解或升华的药物干燥剂：硅胶、硫酸、五氧化二磷4.热分析法（在程序控制温度下，测定物质的物理、化学性质与温度关系的一类技术。）①热重分析法（TGA）在程序升温下，测量物质的质量与温度的关系。特点：样品用量少、灵敏、快速常用于贵重和易氧化药物的干燥失重测定。草酸钙(CaC2O4·H2O)的热重曲线ΔG1ΔG2ΔG310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T(℃)在温度T1时CaC2O4·H2OCaC2O4+H2O在温度T2时CaC2O4CaCO3+CO在温度T3时CaCO3CaO+CO2②.差热分析法（DTA)是在程序升温下，测量供试品和参比物之间的温度差与温度关系的一种技术。参比物是一种惰性物质，在加热过程中不发生相变和化学变化。因此温差(△T)只与被测物质的量质变化有关。△T=0被测物未发生吸热或放热反应△T=-为吸热峰，峰顶向下△T=+为放热峰，峰顶向上测定药物熔点应用尖峰为物理变化药物定性分析宽峰为化学变化估测药物的纯度鉴别③.差示扫描量热法(DSC)是在程序升温下，测量维持样品和参比物的温度相同，系统所需输给待测物质和参比物的能量差随温度（或时间）变化的热分析技术。供试品吸热：系统供能增加供试品放热：系统供能减少应用：鉴别、晶型鉴别、纯度检查、测定熔点或水分不同纯度苯甲酸的DSC曲线温度97.2%98.6%